目的:通過(guò)新生大鼠缺氧缺血性損傷模型,了解海馬神經(jīng)元的損傷情況,以及損傷后不同時(shí)間點(diǎn)及各組間細(xì)胞自噬變化和Ca-A/K通道亞基情況,并初步研究缺氧缺糖后Ca-A/K通道亞基變化與自噬的關(guān)系。方法:采用新生SD大鼠進(jìn)行海馬細(xì)胞原代培養(yǎng),行氧糖剝奪處理方法,模擬神經(jīng)元缺氧缺血模型。選0h、6h、12h、24 h、48h、72 h、96 h七個(gè)時(shí)間點(diǎn),通過(guò)Western blot及RT-qPCR法測(cè)定氧糖剝奪前后LC-3、Beclin-1、mRNA的變化和Ca-A/K通道亞基的蛋白變化;透射電鏡下檢測(cè)自噬的特異性結(jié)構(gòu);CCK8法檢測(cè)細(xì)胞活性,Fluo-3AM流式檢測(cè)缺氧缺血后Ca2+i的水平變化,3-MA干預(yù)后,初步探討自噬和Ca-A/K通道的關(guān)系及可能機(jī)制。結(jié)果:1、電鏡結(jié)果,缺氧缺糖后神經(jīng)元細(xì)胞漿內(nèi)有大量自噬體形成;預(yù)先采用3-MA干預(yù)的細(xì)胞組也有自噬體形成,但比缺氧缺糖組明顯降低。2、RT-qPCR結(jié)果,缺氧缺糖組0.5h和1h組LC3、Beclin-1均表達(dá)上升,缺氧缺糖0.5h組在0h表達(dá)就開(kāi)始上升,48h達(dá)到高峰后開(kāi)始下降。缺氧缺糖1h組則72h達(dá)到高峰后下降,且比缺氧缺糖0.5... 

【文章來(lái)源】：2015年泛長(zhǎng)三角圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)暨浙江省圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編浙江省科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)會(huì)議論文集

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