目的:本研究對3例缺血性腦卒中高危人群未發(fā)缺血性腦卒中及其缺血性腦卒中發(fā)病24h的血漿轉(zhuǎn)錄組microRNA（miRNA）測序,篩選出表達差異最為顯著的microRNA（miR-423-5p）。通過實時熒光定量PCR進一步驗證miR-423-5p在健康人群、缺血性腦卒中高危人群及缺血性腦卒中24h內(nèi)患者血漿中的表達水平,評價miR-423-5p在缺血性腦卒中的早期預(yù)警的臨床意義。方法:收集3例缺血性腦卒中高危人群未發(fā)缺血性腦卒中及其發(fā)病24h的外周靜脈血液樣本,通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)高通量測序,獲得差異性miRNA（miR-423-5p）。收集了46例24h內(nèi)缺血性腦卒中患者,43例缺血性腦卒中高危人群及46例健康人群的靜脈血樣。通過離心分離出血漿,然后提取血漿中總RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,運用實時熒光定量PCR的方法檢測三者血漿中miR-423-5p的表達,以U6作為內(nèi)參。運用2^-△△Ct算法來計算并獲得目的miRNA（miR-423-5p）的相對表達量,統(tǒng)計分析miR-423-5p在健康人群組、缺血性腦卒中高危人群組及缺血性腦卒中發(fā)病24h患者組三個不同組別血漿中的表達... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第一章 前言
第二章 實驗材料與方法
    2.1 高通量測序?qū)嶒灢牧?br>        2.1.1 研究對象
        2.1.2 實驗試劑與實驗儀器
    2.2 驗證實驗材料
        2.2.1 研究對象
        2.2.2 驗證實驗試劑與耗材
        2.2.3 驗證實驗儀器
    2.3 高通量測序?qū)嶒灧椒?br>        2.3.1 總RNA的提取
        2.3.2 miRNA 文庫構(gòu)建及測序
    2.4 驗證實驗方法
        2.4.1 血漿采集
        2.4.2 血漿總RNA的提取
        2.4.3 miRNA逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
        2.4.4 實時熒光定量PCR檢測
        2.4.5 瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產(chǎn)物
        2.4.6 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 高通量測序篩選差異miRNA
        3.1.1 實驗結(jié)果
    3.2 血漿miR-423-5p在缺血性腦卒中預(yù)警和早期診斷中的作用
        3.2.1 實驗結(jié)果
            3.2.1.1 研究對象的一般臨床資料
            3.2.1.2 血漿miR-423-5p檢測的敏感性和特異性
            3.2.1.3 血漿miR-423-5p在健康對照組、缺血性腦卒中高危人群組及缺血性腦卒中24h患者組直接的表達差異
            3.2.1.4 血漿miR-423-5p對缺血性腦卒中高危人群預(yù)警及缺血性腦卒中發(fā)病早期診斷的價值
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻
文獻綜述 miRNA在缺血性腦卒中的研究進展
    參考文獻
附錄
本課題資助項目
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝



本文編號：3178749