目的:本研究對3例缺血性腦卒中高危人群未發(fā)缺血性腦卒中及其缺血性腦卒中發(fā)病24h的血漿轉(zhuǎn)錄組microRNA（miRNA）測序,篩選出表達(dá)差異最為顯著的microRNA（miR-423-5p）。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)一步驗(yàn)證miR-423-5p在健康人群、缺血性腦卒中高危人群及缺血性腦卒中24h內(nèi)患者血漿中的表達(dá)水平,評價(jià)miR-423-5p在缺血性腦卒中的早期預(yù)警的臨床意義。方法:收集3例缺血性腦卒中高危人群未發(fā)缺血性腦卒中及其發(fā)病24h的外周靜脈血液樣本,通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)高通量測序,獲得差異性miRNA（miR-423-5p）。收集了46例24h內(nèi)缺血性腦卒中患者,43例缺血性腦卒中高危人群及46例健康人群的靜脈血樣。通過離心分離出血漿,然后提取血漿中總RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測三者血漿中miR-423-5p的表達(dá),以U6作為內(nèi)參。運(yùn)用2^-△△Ct算法來計(jì)算并獲得目的miRNA（miR-423-5p）的相對表達(dá)量,統(tǒng)計(jì)分析miR-423-5p在健康人群組、缺血性腦卒中高危人群組及缺血性腦卒中發(fā)病24h患者組三個(gè)不同組別血漿中的表達(dá)... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第一章 前言
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 高通量測序?qū)嶒?yàn)材料
        2.1.1 研究對象
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 研究對象
        2.2.2 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
        2.2.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 高通量測序?qū)嶒?yàn)方法
        2.3.1 總RNA的提取
        2.3.2 miRNA 文庫構(gòu)建及測序
    2.4 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 血漿采集
        2.4.2 血漿總RNA的提取
        2.4.3 miRNA逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
        2.4.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測
        2.4.5 瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產(chǎn)物
        2.4.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 高通量測序篩選差異miRNA
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.2 血漿miR-423-5p在缺血性腦卒中預(yù)警和早期診斷中的作用
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.2.1.1 研究對象的一般臨床資料
            3.2.1.2 血漿miR-423-5p檢測的敏感性和特異性
            3.2.1.3 血漿miR-423-5p在健康對照組、缺血性腦卒中高危人群組及缺血性腦卒中24h患者組直接的表達(dá)差異
            3.2.1.4 血漿miR-423-5p對缺血性腦卒中高危人群預(yù)警及缺血性腦卒中發(fā)病早期診斷的價(jià)值
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 miRNA在缺血性腦卒中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
附錄
本課題資助項(xiàng)目
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝



本文編號：3178749