目的：利用Cell-SELEX技術(shù)，體外篩選得到可以特異性識別人多形性膠質(zhì)母細胞瘤細胞的核酸適配體。方法：利用化學(xué)方法人工合成長度為84個堿基的隨機寡核苷酸庫，以人工培養(yǎng)的人多形性膠質(zhì)母細胞瘤細胞系U118-MG細胞為靶細胞，以人正常神經(jīng)膠質(zhì)細胞系SVGp12細胞為反篩細胞，利用Cell-SELEX技術(shù)，篩選得到可以特異性結(jié)合U118-MG細胞的核酸適配體，并利用流式細胞術(shù)以及激光共聚焦顯微鏡等技術(shù)對所得適配體的生物性能進行表征。結(jié)果：1、經(jīng)過30輪的篩選得到了兩條名為GBM128和GBM131的核酸適體。這兩條適體可特異性地與U118-MG細胞結(jié)合。2、兩條適體在復(fù)雜體系中仍能很好的與靶細胞結(jié)合，而且其靶標(biāo)是位于靶細胞表面的某種蛋白質(zhì)成分。3、兩條適配體可以很好地與人腦膠質(zhì)瘤組織結(jié)合，而不與正常的人腦膠質(zhì)組織相結(jié)合。結(jié)論：篩選得到的核酸適配體GBM128和GBM131可以特異性的結(jié)合于靶細胞表面的靶標(biāo)蛋白分子，為適配體在尋找膠質(zhì)瘤的生物標(biāo)志物，以及膠質(zhì)瘤的分子成像、靶向載藥、術(shù)中導(dǎo)航等研究領(lǐng)域的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
第一章 多形性膠質(zhì)母細胞瘤核酸適體的篩選
    1.1 引言
    1.2 實驗材料
    1.3 實驗方法
        1.3.1 U118-MG 細胞和 SVGp12 細胞的培養(yǎng)
        1.3.2 U118-MG 細胞核酸適配體的篩選
        1.3.3 克隆與測序
        1.3.4 帶熒光標(biāo)記 DNA 鏈的合成
        1.3.5 流式細胞分析法
    1.4 結(jié)果
        1.4.1 U118-MG 細胞核酸適配體的篩選
        1.4.2 克隆與測序
        1.4.3 流式細胞分析法
    1.5 討論
第二章 核酸適配體 GBM128 和 GBM131 生物性能的表征
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細胞培養(yǎng)
        2.3.2 帶熒光標(biāo)記核酸適體的合成
        2.3.3 流式細胞分析法
        2.3.4 激光共聚焦顯微鏡分析法
        2.3.5 適配體對臨床組織標(biāo)本的結(jié)合能力檢測
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 流式細胞分析法
        2.4.2 激光共聚焦顯微鏡分析法
        2.4.3 適配體對臨床腫瘤標(biāo)本的檢測
    2.5 討論
第三章 結(jié)論與展望
參考文獻
致謝
綜述 核酸適配體及其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用
    參考文獻



本文編號：3176699