近年來的研究表明，中樞神經(jīng)系統(tǒng)除神經(jīng)元之外，神經(jīng)元周圍的膠質(zhì)細(xì)胞（星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞）在慢性疼痛的產(chǎn)生和維持中發(fā)揮著不可忽視的作用。膠質(zhì)細(xì)胞在被激活的情況下，還能作為免疫反應(yīng)細(xì)胞，產(chǎn)生一些信號分子，參與對神經(jīng)元功能的調(diào)節(jié)。在膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的信號分子中，細(xì)胞因子（cytokines）和趨化因子（chemokines）是參與慢性疼痛調(diào)節(jié)的重要物質(zhì)之一。本實(shí)驗(yàn)研究了脊神經(jīng)結(jié)扎（SNL）后脊髓中趨化因子CXCL1在神經(jīng)病理性疼痛中的作用及機(jī)制。方法：1.結(jié)扎小鼠的左側(cè)L5脊神經(jīng)（spinal nerve ligation, SNL）誘發(fā)神經(jīng)病理性疼痛模型。2.用行為學(xué)檢測來判斷小鼠的機(jī)械性觸誘發(fā)痛和熱痛覺過敏的程度。3.用Real-time PCR法檢測CXCL1mRNA和TNF-α mRNA的表達(dá)。4.免疫熒光染色檢測CXCL1、GFAP、OX-42、IBA1、CXCR2、pERK、c-Fos的免疫陽性細(xì)胞變化情況。用免疫熒光雙標(biāo)染色來定位表達(dá)CXCL1、CXCR2、pERK、c-Fos的細(xì)胞類型。5.用western blot方法檢測CXCR2蛋白含量變化情況。6.用原位雜交和免疫熒光... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
    參考文獻(xiàn)
材料與方法
    1. 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 溶液配制
    2. 方法
        2.1 脊神經(jīng)結(jié)扎（Spinal Nerve Ligation, SNL）神經(jīng)病理性疼痛模型的建立
        2.2 行為學(xué)檢測
        2.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)
        2.4 組織和細(xì)胞的免疫熒光染色
        2.5 原位雜交檢測
        2.6 組織和細(xì)胞的 ELISA 檢測
        2.7 Real-time RT-PCR
        2.8 Western blot
        2.9 鞘內(nèi)注射藥物
        2.10 圖像數(shù)據(jù)的處理及統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    1. SNL 神經(jīng)病理性疼痛模型的建立及行為學(xué)檢測
        1.1 脊神經(jīng)結(jié)扎（SNL）手術(shù)不影響小鼠的生長發(fā)育
        1.2 SNL 手術(shù)后小鼠運(yùn)動協(xié)調(diào)能力不受影響
        1.3 SNL 誘發(fā)小鼠同側(cè)后爪產(chǎn)生了神經(jīng)病理性疼痛
    2. SNL 誘導(dǎo)脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá) CXCL1
        2.1 SNL 后脊髓中 CXCL1 mRNA 表達(dá)增加
        2.2 SNL 后同側(cè)脊髓背角中 CXCL1 蛋白表達(dá)增加
        2.3 SNL 誘導(dǎo)脊髓 CXCL1 表達(dá)的細(xì)胞類型
        2.4 SNL 誘導(dǎo)激活同側(cè)脊髓的星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞
        2.5 SNL 后脊髓 CXCL1 的表達(dá)和激活的星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞相關(guān)性分析
    3. 星形膠質(zhì)細(xì)胞通過 TNF-α—JNK 信號通路表達(dá) CXCL1
        3.1 SNL 誘導(dǎo)脊髓 TNF-α mRNA 和 CXCL1 mRNA 表達(dá)相繼增加
        3.2 抑制 TNF-α的功能緩解神經(jīng)病理性疼痛的產(chǎn)生并減低 CXCL1 mRNA 的表達(dá)
        3.3 TNF-α鞘內(nèi)注射誘導(dǎo)脊髓 CXCL1 表達(dá)升高
        3.4 JNK 信號通路介導(dǎo) TNF-α引起的 CXCL1 表達(dá)上調(diào)
        3.5 鞘內(nèi)注射 CXCL1 中和性抗體部分逆轉(zhuǎn) SNL 誘導(dǎo)的機(jī)械性觸誘發(fā)痛和熱痛覺過敏
    4. CXCL1 增強(qiáng)脊髓背角神經(jīng)元興奮性在神經(jīng)病理性疼痛的易化中發(fā)揮作用
        4.1 鞘內(nèi)注射 CXCL1 蛋白多肽誘發(fā)熱痛覺過敏
        4.2 鞘內(nèi)注射 CXCL1 蛋白多肽能興奮脊髓背角神經(jīng)元
        4.3 CXCR2 表達(dá)于脊髓神經(jīng)元
        4.4 SNL 誘導(dǎo)脊髓 CXCR2 表達(dá)增加
        4.5 鞘內(nèi)注射 CXCR2 拮抗劑部分逆轉(zhuǎn) SNL 誘導(dǎo)的機(jī)械性觸誘發(fā)痛和熱痛覺過敏
討論
    1. 神經(jīng)病理性疼痛模型的選擇
    2. SNL 后脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞上調(diào)表達(dá) CXCL1 與神經(jīng)病理性疼痛
    3. 星形膠質(zhì)細(xì)胞通過 TNF-α—JNK 信號通路上調(diào)表達(dá) CXCL
    4. CXCL1-CXCR2 參與神經(jīng)病理性疼痛的中樞敏化
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
英文縮寫詞表（Abbreviation）
博士生期間完成的論文
博士生期間承擔(dān)科研項(xiàng)目情況
博士生期間科研獲獎(jiǎng)情況
博士生期間參編教材情況
博士生期間參加學(xué)術(shù)會議情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]SNL大鼠CD4+T細(xì)胞脊髓浸潤及其分子機(jī)制研究[J]. 孫彩霞,劉嫣方,周成林,陳盼,張盼,蘇兆亮,朱琛平,王勝軍,許化溪.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2011(12)



本文編號：3167107