目的應(yīng)用RNA干擾技術(shù)體外抑制大鼠MuRF1基因表達(dá)的效果，以期篩選出針對(duì)MuRF1基因抑制效果最佳的siRNA重組質(zhì)粒。方法根據(jù)大鼠MuRF1基因的mRNA序列，設(shè)計(jì)四組干擾序列，即siRNAMuRF1-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，利用lipofactamine2000轉(zhuǎn)染試劑將siRNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大鼠成肌細(xì)胞系L6，于轉(zhuǎn)染后48h與72h，采用實(shí)時(shí)定量PCR和Westernblot或免疫印跡檢測(cè)其對(duì)MuRF1表達(dá)的抑制效果。結(jié)果1.實(shí)時(shí)定量PCR顯示四組干擾質(zhì)粒MuRF1Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ對(duì)基因MuRF1的mRNA的抑制率在轉(zhuǎn)染后48h分別為67﹪、31﹪、11﹪，20﹪,不同干擾序列的抑制效果有差異（F=4.527，P=0.024）；72h分別為79﹪、59﹪、50﹪和61﹪，不同干擾序列的抑制效果有差異（F=19.088，P<0.001）,與48h相比，抑制效應(yīng)更為明顯，但以siRNAMuRF1-Ⅰ的抑制效果最為明顯（t=8.201,P<0.001）。2.使用Western印跡灰度分析顯示四組干擾序列對(duì)基因MuRF1的蛋白的抑制率在轉(zhuǎn)染后48h分別為61﹪、40﹪、9﹪，15﹪，... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：33 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略詞
前言
    參考文獻(xiàn)
材料與方法
結(jié)果
附圖
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]失神經(jīng)骨骼肌萎縮中泛素蛋白連接酶Murf1和核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB表達(dá)與被動(dòng)運(yùn)動(dòng)干預(yù)[J]. 韓利軍,梁炳生,王樂(lè),張磊.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(24)
[2]失神經(jīng)骨骼肌萎縮與氯沙坦通過(guò)核因子κ B/MuRF1通路的延緩作用[J]. 王樂(lè),梁炳生,李文斌,張磊,韓利軍,吳啟平.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(15)
[3]核轉(zhuǎn)錄因子-κB與肌環(huán)狀指蛋白1在失神經(jīng)肌萎縮中的表達(dá)及意義[J]. 李文斌,梁炳生,梁緒.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2010 (04)
[4]失神經(jīng)骨骼肌萎縮防治研究進(jìn)展[J]. 李永平,梁炳生.  國(guó)際骨科學(xué)雜志. 2006(06)
[5]被動(dòng)活動(dòng)對(duì)失神經(jīng)支配骨骼肌萎縮的影響[J]. 徐建廣,顧玉東,屠永全,李繼峰.  中華顯微外科雜志. 2003(03)
[6]功能性電刺激對(duì)脊髓損傷后功能恢復(fù)的治療作用[J]. 李民,邵陽(yáng),伍亞民,廖維宏.  中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志. 2001(02)
[7]被動(dòng)活動(dòng)對(duì)小鼠失神經(jīng)支配肌肉萎縮的影響[J]. 陳德松,顧玉東,滿富強(qiáng),劉國(guó)慶.  中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志. 1992(05)



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