膠質(zhì)瘤相關(guān)抗原MAGE-D4 T細(xì)胞抗原肽的預(yù)測(cè)和鑒定
發(fā)布時(shí)間:2021-04-24 20:05
目的:預(yù)測(cè)膠質(zhì)瘤相關(guān)抗原MAGE-D4的HLA-A2限制性T細(xì)胞抗原肽,分析這些抗原肽負(fù)載DC后是否能誘導(dǎo)出具有腫瘤殺傷作用的T細(xì)胞,為MAGE-D4的膠質(zhì)瘤免疫治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:(1)MAGE-D4表位肽的預(yù)測(cè):利用SYFPEITHI和BIMAS網(wǎng)站,分析HLA-A*0201限制性MAGE-D4 T細(xì)胞抗原肽,篩選高得分的候選肽;(2)肽-HLA-A2親和力檢測(cè):合成篩選出的抗原肽,將抗原肽與T2細(xì)胞孵育,流式細(xì)胞儀檢測(cè)HLA-A2表達(dá)熒光強(qiáng)度,分析抗原肽肽與HLA-A2的親和力;(3)HLA-A*0201表型的篩選鑒定:提取膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87的DNA,用HLA-A*0201特性引物進(jìn)行PCR鑒定;分離健康志愿者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),用流式細(xì)胞儀篩選HLA-A2健康志愿者。(4)樹突狀細(xì)胞(DC)的體外誘導(dǎo)培養(yǎng)及鑒定:分離HLA-A*0201健康志愿者的外周血PBMC,使用磁珠分選法從PBMC中分離出CD14+細(xì)胞,將用細(xì)胞因子(rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-a)與CD14+細(xì)胞孵育,誘導(dǎo)出成熟的DC,并通過形態(tài)學(xué)觀察、細(xì)胞表面標(biāo)志物(CD83,CD80,CD1...
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞索引
摘要
ABSTRACT
前言
緒論
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案
材料方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]黑素瘤相關(guān)抗原D4(MAGE-D4)多克隆抗體的制備和應(yīng)用[J]. 賀菽嘉,顧永耀,肖紹文,張慶梅,陳芳,羅彬,付駿,謝小薰. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(01)
[2]A Simplified PCR-SSP Method for HLA-A2 Subtype in a Population of Wuhan,China[J]. Bing Liang1, Lijun Zhu1, Zhihui Liang1, Xiufang Weng1, Xiaoling Lu1, Cai’e Zhang1, Hui Li1 and Xiongwen Wu1, 21Department of Immunology, Tongji Medical College, Huazhong University of Science & Technology, Wuhan, China;. Cellular & Molecular Immunology. 2006(06)
[3]HLA-A02基因型與中國(guó)高發(fā)區(qū)肝細(xì)胞癌的密切關(guān)聯(lián)[J]. 明利華,朱源榮,王曉宏,吳志遠(yuǎn),孫宗棠. 中國(guó)免疫學(xué)雜志. 1999(07)
[4]北方漢族人群HLA-A2亞型分布及p53的合成肽體外誘導(dǎo)CTL反應(yīng)[J]. 侯亞非,孫宗棠,曲春楓,吳志遠(yuǎn). 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 1999(01)
[5]黑色素瘤抗原-D4在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及其意義[J]. 馬勤運(yùn),陳志明,龐烈文,朱勇俊,陳剛,陳佶. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2012 (03)
本文編號(hào):3157993
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞索引
摘要
ABSTRACT
前言
緒論
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案
材料方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]黑素瘤相關(guān)抗原D4(MAGE-D4)多克隆抗體的制備和應(yīng)用[J]. 賀菽嘉,顧永耀,肖紹文,張慶梅,陳芳,羅彬,付駿,謝小薰. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(01)
[2]A Simplified PCR-SSP Method for HLA-A2 Subtype in a Population of Wuhan,China[J]. Bing Liang1, Lijun Zhu1, Zhihui Liang1, Xiufang Weng1, Xiaoling Lu1, Cai’e Zhang1, Hui Li1 and Xiongwen Wu1, 21Department of Immunology, Tongji Medical College, Huazhong University of Science & Technology, Wuhan, China;. Cellular & Molecular Immunology. 2006(06)
[3]HLA-A02基因型與中國(guó)高發(fā)區(qū)肝細(xì)胞癌的密切關(guān)聯(lián)[J]. 明利華,朱源榮,王曉宏,吳志遠(yuǎn),孫宗棠. 中國(guó)免疫學(xué)雜志. 1999(07)
[4]北方漢族人群HLA-A2亞型分布及p53的合成肽體外誘導(dǎo)CTL反應(yīng)[J]. 侯亞非,孫宗棠,曲春楓,吳志遠(yuǎn). 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 1999(01)
[5]黑色素瘤抗原-D4在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及其意義[J]. 馬勤運(yùn),陳志明,龐烈文,朱勇俊,陳剛,陳佶. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2012 (03)
本文編號(hào):3157993
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