目的HSPB8為CMT2L的致病基因,我們意圖通過攜帶K141N突變的HSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型上進行超微病理學(xué)研究,觀察K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型中HSPB8是否與HSPB1存在共定位。方法pCAGGS-K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠傳代并經(jīng)PCR基因鑒定,取pCAGGS-K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠與正常小鼠坐骨神經(jīng),應(yīng)用免疫組織化學(xué)雙重標(biāo)記染色后,在電鏡下觀察HSPB8、HSPB1的共定位情況。結(jié)果（1）轉(zhuǎn)基因小鼠經(jīng)基因診斷確定HSPB8基因存在423G→T的錯義突變。（2） pCAGGS-HA-K141NHSPB8小鼠10nm標(biāo)記的HSPB8蛋白顆粒表達較多,20nm標(biāo)記的HSPB1蛋白表達增多,且HSPB8與HSPB1兩種蛋白之間存在著良好的共定位。結(jié)論（1）證實pCAGGS-K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型的成功構(gòu)建,并順利傳代至F7代。（2） HSPB1可能參與了HSPB8在pCAGGS-K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因模型小鼠的致病過程。 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要藥品及試劑、試劑盒
        2.1.3 主要儀器與設(shè)備
        2.1.4 引物
    2.2 方法
        2.2.1 試劑配制
        2.2.2 實驗相關(guān)容器處理
K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型傳代和基因診斷">        2.2.3 pCAGGS-HA-^K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型傳代和基因診斷
K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠HSPB8、HSPB1共定位分析">        2.2.4 正常小鼠與pCAGGS-HA-^K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠HSPB8、HSPB1共定位分析
第三章 結(jié)果
K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型傳代和基因診斷">    3.1 pCAGGS-HA-^K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型傳代和基因診斷
K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型F2、F3、F4、F5、F6、F7代小鼠的基因診斷">        3.1.1 pCAGGS-HA-^K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型F2、F3、F4、F5、F6、F7代小鼠的基因診斷
        3.1.2 HSPB8、HSPB1免疫雙標(biāo)電鏡共定位分析
第四章 討論
    4.1 研究背景和前期工作
    4.2 轉(zhuǎn)基因小鼠坐骨神經(jīng)的HSPB8、HSPB1共定位分析
    4.3 存在的問題與展望
第五章 結(jié)論
主要參考文獻
綜述 腓骨肌萎縮癥的治療研究進展
    參考文獻
致謝
作者攻讀碩士學(xué)位期間的主要研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3156527