本文關鍵詞：黃芩苷對小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬神經(jīng)細胞中Kir4.1、AQP4表達的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究海人酸(kainic acid,KA)誘導小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus,SE)后及使用黃芩苷干預海馬神經(jīng)細胞中Kir4.1、AQP4表達的變化,并探討黃芩苷(Baicalin,BCL)對海馬神經(jīng)細胞的可能保護機制。方法:體重為22-28g之間的ICR雄性小鼠60只隨機分為3個組,對照組(Sham)、癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)組、黃芩苷治療組(100mg/kg),每組各為20只。采用側腦室注入海人酸0.1μg(0.1μg/5μl)建立小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)模型。待模型制作成功后,治療組立即給予黃芩苷(100mg/kg)腹腔注射一次,12h后予同等劑量黃芩苷重復注射一次。對照組及模型組分別于癲癇發(fā)作后相應時間及12h后腹腔給予同等劑量的生理鹽水注射。制模48h后,各組分別取6只小鼠腦組織行石蠟包埋切片,行HE染色觀察各組海馬CA3區(qū)細胞形態(tài)學的變化和免疫組化實驗檢測蛋白Kir4.1和AQP4的表達情況。每組各剩14只小鼠取大腦海馬組織,行Western blot檢測Kir4.1和AQP4蛋白的表達量。結果:①制模48h后,HE染色可見Sham組海馬組織CA3區(qū)錐體細胞排列規(guī)整,形態(tài)正常,未見異型性細胞,胞質(zhì)呈淡紅色,胞核染成藍色、居中,未見有凋亡、壞死細胞;SE組錐體細胞排列散亂,大量的壞死細胞,鏡下可見破碎的細胞器,殘留細胞有明顯的異型性,有的細胞胞漿有空泡形成,有的細胞腫脹明顯,胞核分布不均、固縮、邊集、核仁消失等;黃芩苷治療組鏡下見有大量完整的正常細胞,在正常細胞之間分散著少數(shù)異型性細胞或胞膜破裂的壞死細胞。②免疫組化結果:1)Kir4.1:制模48小時后,鏡下見對照組海馬CA3區(qū)分布有少量散在被染成淡黃色的Kir4.1陽性細胞,而SE組可見排列較多,被染成棕黃色的陽性細胞,與對照組相比,二者具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與SE組相比,黃芩苷治療組中被染成棕褐色的陽性細胞明顯增多,二者差異明顯(P0.05);2)AQP4:制模48小時后,高倍鏡下見對照組海馬CA3區(qū)可見少量散在被染成淡黃色AQP4陽性細胞,而SE組中被染成呈棕褐色的陽性細胞分布密集,與對照相比,二者具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。相比較于SE組,黃芩苷治療組中的AQP4陽性細胞分布稀疏,且染色較淺,呈棕黃色,二者差異明顯(P0.05)。③Western blot結果:1)Kir4.1:對照組中Kir4.1蛋白只有微量表達,癲癇發(fā)作后海馬神經(jīng)細胞中Kir4.1的蛋白量有所增加(P0.05)。相對于SE組,給予黃芩苷干預后小鼠海馬神經(jīng)細胞中Kir4.1蛋白的表達明顯增加(P0.05);2)AQP4:對照組中AQP4蛋白有少量的表達,癲癇發(fā)作后海馬神經(jīng)細胞中AQP4蛋白量的表達顯著增加(P0.01)。與SE組相比,黃芩苷治療組海馬神經(jīng)細胞中AQP4蛋白的表達量下降明顯(P0.05)。這與免疫組化表達的變化相一致。結論:小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬神經(jīng)細胞中Kir4.1及AQP4蛋白表達均上調(diào),可能是神經(jīng)細胞中的一種反應機制,而黃芩苷可能通過增加海馬神經(jīng)細胞中Kir4.1蛋白的表達及下調(diào)AQP4蛋白的表達來保護癲癇后小鼠海馬神經(jīng)的損傷。
【關鍵詞】：黃芩苷 癲癇 海人酸 Kir4.1 AQP4 神經(jīng)保護 炎癥因子
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R742.1
【目錄】：

• 英文縮略語5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 引言10-12
• 材料和方法12-23
• 1 材料12-13
• 1.1 主要儀器12
• 1.2 主要實驗制劑及藥品12-13
• 2 方法13-23
• 2.1 動物準備及分組13
• 2.2 SE模型制作13-14
• 2.3 行為學評分14-15
• 2.4 標本制備15
• 2.5 蘇木素-伊紅染色（HE染色）15-16
• 2.6 免疫組化16-18
• 2.7 Western blot檢測小鼠海馬神經(jīng)細胞中Kir4.1、AQP4蛋白含量18-22
• 2.8 統(tǒng)計分析22-23
• 結果23-30
• 1 癲癇小鼠的行為學表現(xiàn)23
• 2 HE染色結果23-24
• 3 免疫組化結果24-27
• 3.1 黃芩苷對癲癇小鼠海馬神經(jīng)細胞中Kir4.1 表達的影想..2024-26
• 3.2 黃芩苷對癲癇小鼠海馬神經(jīng)細胞中AQP26-27
• 4表達的影想.224 Western blot蛋白免疫印跡實驗結果27-30
• 4.1 Kir4.1 蛋白的表達量27-28
• 4.2 AQP4蛋白的表達量28-30
• 討論30-32
• 結論32-33
• 參考文獻33-36
• 課題總結36-37
• 文獻綜述37-44
• 參考文獻41-44
• 致謝44

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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  本文關鍵詞：黃芩苷對小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬神經(jīng)細胞中Kir4.1、AQP4表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：315624