目的:腦膠質(zhì)瘤是成人最常見的原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤之一。分子靶向的研究成為目前腦膠質(zhì)瘤治療學(xué)研究的熱點之一。本研究旨在研究微小RNA miR-150和RNA結(jié)合蛋白DAZAP1能否調(diào)控膠質(zhì)瘤細胞的惡性生物學(xué)行為,進一步深入的分析其可能的分子機制,即mi R-150通過下調(diào)FOXB1抑制MMP-9和XIAP的表達,抑制膠質(zhì)瘤細胞的惡性生物學(xué)行為;DAZAP1通過穩(wěn)定長鏈非編碼RNA00598（Linc00598）的表達下調(diào)FOXE1的表達,抑制膠質(zhì)瘤細胞的惡行生物學(xué)行為。本研究旨在為膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展提供新的依據(jù),同時為膠質(zhì)瘤的分子靶向治療提供新靶標。研究方法:首先培養(yǎng)人的膠質(zhì)瘤細胞U87、U251,人正常星型膠質(zhì)細胞。應(yīng)用Real-time PCR檢測miR-150、FOXB1、DAZAP1、Linc00598、FOXE1,應(yīng)用Western blot檢測FOXB1、DAZAP1、FOXE1在正常腦組織、膠質(zhì)瘤組織、人正常星型膠質(zhì)細胞中的表達水平。應(yīng)用CCK-8檢測細胞增殖能力的改變。采用Transwell法檢測細胞遷移和侵襲能力的改變。應(yīng)用流式細胞儀和PI-FITC雙染色檢測細胞凋亡能力。應(yīng)用... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 ：MiR-150負性調(diào)控FOXB1影響腦膠質(zhì)瘤細胞惡性生物學(xué)行為的分子機制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實驗材料
            2.1.1 實驗動物
            2.1.2 實驗用腦組織及細胞株
            2.1.3 主要試劑
            2.1.4 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.2 細胞轉(zhuǎn)染
            2.2.3 雙熒光素酶報告基因檢測
            2.2.4 CCK-8檢測細胞活力
            2.2.5 細胞Transwell遷移和侵襲實驗
            2.2.6 細胞凋亡實驗
            2.2.7 Real-timePCR
            2.2.8 WesternBlot方法檢測FOXB1、XIAP、MMP-9蛋白的表達變化
            2.2.9 裸鼠移植瘤模型
        2.3 實驗統(tǒng)計方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 MiR-150的內(nèi)源性表達以及對膠質(zhì)瘤細胞惡性生物學(xué)行為的影響
        3.2 FOXB1是miR-150的靶基因
        3.3 miR-150通過負性調(diào)控FOXB1影響膠質(zhì)瘤細胞生物學(xué)行為
        3.4 過表達miR-150和FOXB1調(diào)控MMP9和XIAP的表達
        3.5 FOXB1與XIAP和MMP-9的啟動子區(qū)結(jié)合
        3.6 過表達miR-150和沉默F(xiàn)OXB1抑制裸鼠移植瘤生長
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 ：DAZAP1/Linc00598/FOXE1通路調(diào)控膠質(zhì)瘤細胞的惡性生物學(xué)行為的分子機制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 實驗動物
            2.1.2 細胞株
            2.1.3 主要試劑
            2.1.4 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.2 細胞增殖實驗
            2.2.3 細胞遷移實驗
            2.2.4 細胞轉(zhuǎn)染
            2.2.5 細胞凋亡實驗
            2.2.6 雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測
            2.2.7 Westernblot
            2.2.8 Real-timePCR
            2.2.9 RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀法（RIP）實驗
            2.2.10 半衰期實驗
            2.2.11 實驗統(tǒng)計方法
    3 實驗結(jié)果
        3.1 DAZAP1在膠質(zhì)瘤細胞中發(fā)揮抑癌基因作用
        3.2 Linc00598在膠質(zhì)瘤組織中低表達,起抑癌基因作用
        3.3 過表達DAZAP1增加Linc00598的穩(wěn)定性,抑制膠質(zhì)瘤細胞惡性生物學(xué)行為
        3.4 Linc00598通過負性調(diào)控FOXE1,進而影響膠質(zhì)瘤細胞的生物學(xué)行為
        3.5 FOXE1促進MARK4的表達,促進膠質(zhì)瘤細胞的惡性生物學(xué)行為
        3.6 Linc00598靶向結(jié)合FOXE1,進而影響膠質(zhì)瘤惡性生物學(xué)行為
        3.7 過表達DAZAP1和Linc00598以及聯(lián)合應(yīng)用沉默F(xiàn)OXE1顯著抑制裸鼠移植瘤生長，延長其生存期
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡介



本文編號：3146748