背景:血管生成（Angiogenesis）,即新血管的形成,在缺氧等刺激下被激活,通過重建局部血流改善氧和營養(yǎng)物質(zhì)的供應(yīng)。有研究表明,腦出血后增強(qiáng)血管生成可以有效的減輕腦損傷。缺氧誘導(dǎo)因子2α（Hypoxia-inducible factor 2α,HIF-2α）是維持氧穩(wěn)態(tài)的主要轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,對于組織細(xì)胞適應(yīng)缺氧損傷至關(guān)重要。近年來發(fā)現(xiàn)HIF-2α在機(jī)體多種組織器官的血管生成調(diào)控中發(fā)揮重要作用,然而HIF-2α在腦出血損傷后的作用還未見報道。目的:探究HIF-2α能否通過促進(jìn)血管生成減輕腦出血損傷并明確HIF-2α在腦出血后對于血管生成的調(diào)控是否由VEGF/Notch1信號通路介導(dǎo)。方法:（1）將大鼠自體股動脈血50μL注入右側(cè)紋狀體建立腦出血（Intracerabral Hemorrhage,ICH）模型。通過右側(cè)側(cè)腦室慢病毒注射過表達(dá)或敲低hif-2α基因;通過腹腔注射VEGFR2和Notch1抑制劑分別阻斷VEGF和Notch1信號。（2）將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)（Sham）組,腦出血手術(shù)建模12h、24h、48h、3d、7d和14d組,通過免疫印跡篩選HIF-2α在腦出血后最佳表... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

HIF-2α在不同時間點(diǎn)表達(dá)的免疫印跡結(jié)果

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文3.2 HIF-2α 促進(jìn) ICH 后血管生成。與 Sham 組相比，ICH 組 VEGF 和 CD31 表達(dá)顯著上調(diào)，并且 HIF-2α 的過表達(dá)進(jìn)一步上調(diào)了 VEGF 和 CD31 表達(dá)水平。而 HIF-2α 的敲低顯著降低了 VEGF 和CD31 的表達(dá)。為了進(jìn)一步證實(shí)上述作用，我們通過免疫熒光檢測了 CD31 的表達(dá)。與 Sham 組相比，ICH 損傷后 CD31 表達(dá)顯著增加。與 ICH 相比，HIF-2α 過表達(dá)使得 CD31 上調(diào)更加顯著。與 Western Blot 結(jié)果一致，HIF-2α 敲低顯著降低 CD31的表達(dá)。（圖 3）

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文3.3 新生血管改善局部腦血流灌注并減少神經(jīng)元損傷。MRI 結(jié)果顯示，與 ICH 組和載體組相比，Oe-HIF-2α 組病灶周圍的腦血流灌注顯著升高，HIF-2α 敲低組則顯著降低。H＆E 結(jié)果顯示，ICH 組中和空載體組明顯可見的細(xì)胞核固縮和細(xì)胞質(zhì)紊亂松散的排列，Oe-HIF-2α 組核固縮的程度和數(shù)量明顯少于 ICH 和空載體組。在 sh-HIF-2α 組中，出現(xiàn)大面積的無序細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，嚴(yán)重的神經(jīng)元固縮和缺失。 Nissl 染色得到與 H＆E 染色相似的結(jié)果。（圖 4）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Endothelial progenitor cells as a therapeutic option in intracerebral hemorrhage[J]. Juan Pías-Peleteiro,Francisco Campos,José Castillo,Tomás Sobrino.  Neural Regeneration Research. 2017(04)



本文編號：3121482