目的檢測(cè)用眶下神經(jīng)縮窄術(shù)建立的大鼠三叉神經(jīng)痛（TN）模型中三叉神經(jīng)節(jié)（TG）內(nèi)pSTAT3蛋白表達(dá)的變化及其定位的細(xì)胞類型。方法隨機(jī)將成年雄性SD大鼠分成兩組:眶下神經(jīng)縮窄術(shù)組（CCI-ION組）和假手術(shù)組（Sham組）,用Von Frey毛刷檢測(cè)兩組大鼠的機(jī)械敏感閾值。通過Western blot檢測(cè)術(shù)后TG內(nèi)pSTAT3蛋白表達(dá)量變化,并用免疫熒光實(shí)驗(yàn)觀察pSTAT3的熒光染色情況及其定位細(xì)胞類型。結(jié)果 CCI-ION組大鼠在術(shù)后第1～14天出現(xiàn)機(jī)械敏感閾值的顯著降低（P<0.05）。CCI-ION組內(nèi)大鼠TG的pSTAT3蛋白表達(dá)量相較于Sham組大鼠明顯升高（P<0.05）。CCI-ION組大鼠pSTAT3的熒光染色亦明顯強(qiáng)于Sham組,行免疫熒光雙染實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)pSTAT3定位于大鼠TG的小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)而非衛(wèi)星膠質(zhì)細(xì)胞或神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)。結(jié)論在TN模型大鼠的TG小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)有JAK/STAT3通路的活化。 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,55(10)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

各組大鼠觸須墊在造模后不同時(shí)間點(diǎn)機(jī)械敏感閾值的變化

Western blot結(jié)果顯示,CCI-ION組大鼠TG中pSTAT3蛋白相對(duì)表達(dá)量在術(shù)后第3、7天時(shí)較Sham組大鼠均明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=64.37,P<0.05)。見圖2。2.3 pSTAT3蛋白的免疫熒光表達(dá)及其定位

用CCI-ION術(shù)建立TN模型是由Vos et al[9]于1994年首次提出的一種經(jīng)典的造模方法,其能有效模擬出TN的自發(fā)性疼痛及痛覺過敏兩大方面,其中大鼠胡須墊區(qū)的機(jī)械閾值測(cè)定是判斷造模有無成功的標(biāo)準(zhǔn)。近年來,研究[5]顯示STAT3通路的活化參與了外周神經(jīng)損傷后脊髓內(nèi)痛覺信息的傳遞和調(diào)節(jié)。此外,在糖尿病神經(jīng)性痛及奧利沙鉑引發(fā)神經(jīng)性疼痛的大鼠模型中亦觀察到JAK/STAT3通路的活化[1,10]。神經(jīng)系統(tǒng)中膠質(zhì)細(xì)胞是除神經(jīng)元外的第二大主要成分,外周神經(jīng)系統(tǒng)(PNS)中的膠質(zhì)細(xì)胞主要由衛(wèi)星膠質(zhì)細(xì)胞、施萬細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞組成[11]。本研究中CCI-ION術(shù)后第2天的免疫熒光實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)pSTAT3定位于TG中的小膠質(zhì)細(xì)胞上,這與Dominguez et al[5]在脊神經(jīng)損傷模型中的觀察結(jié)果相似。然而,有報(bào)道[12-13]表明,除了小膠質(zhì)細(xì)胞外,上調(diào)的pSTAT3還存在于其他類型的細(xì)胞中,這種差異可能是由于行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的時(shí)間點(diǎn)不同或取材標(biāo)本不同引起。本研究由CCI-ION術(shù)建立大鼠模型,結(jié)果表明,在術(shù)后第14天的機(jī)械閾值檢測(cè)中,CCI-ION組較Sham組均明顯降低,提示TN模型建立成功。同時(shí),Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,CCI-ION后術(shù)側(cè)TG的pSTAT3蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯增加。在Dominguez et al[14]的研究中,脊髓內(nèi)pSTAT3的免疫熒光表達(dá)在術(shù)后24～48 h時(shí)最高,因此本實(shí)驗(yàn)選用術(shù)后第2天(術(shù)后48 h)作為免疫熒光的檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)。結(jié)果表明CCI-ION組的術(shù)側(cè)TG中有大量的pSTAT3熒光染色,而Sham組僅可見很少的pSTAT3熒光染色。這些發(fā)現(xiàn)可能為TN的治療及相關(guān)分子機(jī)制研究提供了新的方向。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Analgesic effect of AG490, a Janus kinase inhibitor, on oxaliplatin-induced acute neuropathic pain[J]. Shuang-Feng Li,Bi-Shan Ouyang,Xin Zhao,Ya-Ping Wang.  Neural Regeneration Research. 2018(08)



本文編號(hào)：3117115