背景:膠質(zhì)瘤是最常見的原發(fā)性顱內(nèi)惡性腫瘤。其中,膠質(zhì)母細胞瘤約占所有膠質(zhì)瘤的54%,約占高級別膠質(zhì)瘤的60-70%。Ⅰ-Ⅱ級的膠質(zhì)瘤患者生存時間為5-10年,間變性星形細胞瘤患者生存時間為2-3年,而膠質(zhì)母細胞瘤患者的生存時間則只有12-15個月,5年生存率更是低至3%。雖然膠質(zhì)瘤治療的方式眾多,包括常規(guī)的手術(shù)切除、放療、化療和近來年新出現(xiàn)的免疫療法、電場療法等,但是膠質(zhì)瘤的治療效果仍然不佳,過去幾十年的研究僅僅使患者的中位生存時間延長了幾個月。膠質(zhì)瘤一直是中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤研究的重點、熱點和難點。目的:通過收集膠質(zhì)瘤病人組織標本,運用Western Blot檢測TBC1D15蛋白在膠質(zhì)瘤組織標本中的表達,了解其在正常腦組織和膠質(zhì)瘤中的差異表達,進一步觀察TBC1D15蛋白對U87膠質(zhì)瘤細胞增殖和凋亡的影響以及探討潛在的作用機制。方法:1、收集青島大學附屬醫(yī)院神經(jīng)外科2018年12月-2019年4月期間手術(shù)切除的膠質(zhì)瘤組織標本24例和正常腦組織5例,通過Western Blot檢測TBC1D15的蛋白表達情況;2、干擾效率檢測:利用siRNA干擾技術(shù),敲低U87細胞系中TBC1D15的表... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

正常腦組織和膠質(zhì)瘤樣本中TBC1D15的表達情況

結(jié)果132.siRNA轉(zhuǎn)染后能夠明顯抑制TBC1D15蛋白表達為了抑制U87膠質(zhì)瘤細胞中TBC1D15蛋白的表達，我們采用siRNA干擾的方式來實現(xiàn)，分別轉(zhuǎn)染TBC1D15-siRNA和Control-siRNA48小時后，我們提取TBC1D15-siRNA組和Control-siRNA組中膠質(zhì)瘤細胞的蛋白，通過WesternBlot方法檢測轉(zhuǎn)染效率，結(jié)果顯示利用TBC1D15-siRNA能夠明顯地降低U87膠質(zhì)瘤細胞中TBC1D15的表達（圖2）。圖2.siRNA干擾效率檢測注：轉(zhuǎn)染TBC1D15-siRNA和Control-siRNA48小時后，提取細胞蛋白，WesternBlot顯示TBC1D15-siRNA能夠明顯的敲低TBC1D15的表達。

青島大學碩士學位論文143.TBC1D15表達下調(diào)抑制U87膠質(zhì)瘤細胞的增殖。為了觀察TBC1D15對U87膠質(zhì)瘤細胞增殖的影響，我們通過CCK-8實驗加以檢測。TBC1D15-siRNA和Control-siRNA轉(zhuǎn)染U87膠質(zhì)瘤細胞后，我們分別在24h、48h、72h時間點檢測TBC1D15-siRNA組和Control-siRNA組在450nm波長的吸光度。通過比較TBC1D15-siRNA組和Control-siRNA組的吸光度，我們發(fā)現(xiàn)在敲低TBC1D15后24h、48h、72h膠質(zhì)瘤細胞的增殖能力分別較對照組下降了24.7%、19.1%，16.9%。實驗結(jié)果表明證明，敲低TBC1D15后，U87膠質(zhì)瘤細胞的增殖能力明顯受到抑制（P＜0.05）(圖3)。圖3.細胞增殖檢測注：轉(zhuǎn)染TBC1D15-siRNA和Control-siRNA后，分別在24h、48h、72h用CCK8實驗檢測其在450nm的吸光度，結(jié)果表明敲低TBC1D15能夠抑制U87細胞的增殖（＊P＜0.05）。


本文編號：3098739