惡性星型膠質(zhì)瘤如多形性膠質(zhì)母細胞瘤（glioblastoma multiform, GBM）是最常見和致死性的顱內(nèi)腫瘤。盡管基礎(chǔ)和臨床研究積累了一些成果,但目前對其預(yù)防和治療依然具有巨大的挑戰(zhàn)。因此,探明惡性星型膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展的規(guī)律依然是臨床和基礎(chǔ)研究的重要任務(wù)。前期的研究表明FoxM1在腦膠質(zhì)瘤中高表達,且與膠質(zhì)瘤的級別呈正相關(guān),與惡性增殖、促血管形成、侵襲等腦膠質(zhì)瘤的惡性行為有關(guān)。最近,我們又發(fā)現(xiàn)FoxM1能介導(dǎo)β-catenin的核轉(zhuǎn)位和促進Wnt信號途徑下游基因的表達,而維持腦膠質(zhì)瘤干細胞的自我更新和增強其成瘤性。然而,FoxM1的穩(wěn)定性及其增強Wnt/β-catenin信號通路的分子機制尚不清楚。本研究目的：（1）明確Wnt信號通路調(diào)控FoxM1穩(wěn)定性的機制;（2）揭示FoxM1增強β-catenin/TCF-4轉(zhuǎn)錄活性的機制。研究內(nèi)容和方法：（1）免疫印跡技術(shù)分析Wnt3a及其信號通路抑制劑DKK1對FoxM1穩(wěn)定性的影響;（2）免疫印跡技術(shù)分析GSK-3p表達水平及其活性對FoxM1穩(wěn)定性的影響;（3）免疫共沉淀技術(shù)分析GSK-3β與FoxM1的相互作用;體外激酶實驗分... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 FoxM1的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 FoxM1在個體發(fā)育中的作用
        1.1.2 FoxM1與腦腫瘤的發(fā)生、發(fā)展
        1.1.3 FoxM1在其他腫瘤中的作用
    1.2 Wnt/β-catenin信號通路研究現(xiàn)狀
        1.2.1 Wnt/β-catenin信號通路是胚胎發(fā)育過程中一個重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
        1.2.2 膠質(zhì)瘤中Wnt/β-catenin信號通路的作用
    1.3 Wnt/β-catenin通路抑制因子ICAT
    1.4 研究目的和立項依據(jù)
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 立項依據(jù)
    1.5 研究內(nèi)容和技術(shù)路線
        1.5.1 研究內(nèi)容
        1.5.2 技術(shù)路線
第二章 Wnt信號通路調(diào)控FoxM1的穩(wěn)定性
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 實驗結(jié)果
        2.2.1 Wnt3a調(diào)節(jié)FoxM1的穩(wěn)定性
        2.2.2 DKK1對FoxM1穩(wěn)定性的影響
        2.2.3 GSK-3β對FoxM1穩(wěn)定性的影響
        2.2.4 FoxM1直接與GSK-3β相互作用
        2.2.5 GSK-3β磷酸化FoxM1的位點及降解途徑
        2.2.6 CK1δ協(xié)同GSK-3β磷酸化FoxM1
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
        2.4.1 Wnt信號途徑維持了FoxM1在腦膠質(zhì)瘤細胞內(nèi)蛋白質(zhì)水平
        2.4.2 GSK-3β通過磷酸化FoxM1上S474位點促進FoxM1經(jīng)由泛素-蛋白酶體途徑降解
        2.4.3 FoxM1上S478位點是S474磷酸化的引發(fā)位點,CK1δ磷酸化增強S478可以增強S474磷酸化
        2.4.4 APC、Axin-1、FoxM1、GSK-3β和CK1δ能形成降解復(fù)合物
第三章 FoxM1與ICAT競爭性地與β-catenin結(jié)合促進TCF-4的轉(zhuǎn)錄活性
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 Wnt3a促進了FoxM1的核轉(zhuǎn)位
        3.2.2 FoxM1與 ICAT競爭性地結(jié)合β-catenin
        3.2.3 FoxM1競爭性地減少了ICAT對β-catenin/TCF-4結(jié)合axin2啟動子
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
        3.4.1 Wnt信號途徑促進了FoxM1的核轉(zhuǎn)位
        3.4.2 FoxM1與ICAT競爭性地與β-catenin結(jié)合,增強TCF-4的轉(zhuǎn)求活性
        3.4.3 FoxM1與ICAT競爭性地與β-catenin結(jié)合,影響了TCF-4結(jié)合Axin2的能力
        3.4.4 FoxM1與ICAT的相互作用影響了Wnt下游基因的cyclinD1和Axin-2的表達
第四章 FoxM1穩(wěn)定性是驅(qū)動細胞周期轉(zhuǎn)換的重要因素
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 儀器
        4.1.3 主要試劑和試劑盒
    4.2 方法
        4.2.1 細胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
        4.2.2 雙熒光素酶報告基因試驗
        4.2.3 MTT試驗
        4.2.4 細胞周期同步化和流式細胞儀檢測
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 FoxM1的升高促進腦膠質(zhì)瘤細胞的G2/M的進程
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 主要結(jié)論和展望
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
在讀期間已發(fā)表論文



本文編號：3089269