發(fā)布時(shí)間：2021-03-12 05:18

　　目的探討線粒體分裂抑制劑（Mdivi-1）處理對(duì)原代培養(yǎng)的皮層神經(jīng)元缺血再灌注損傷的作用及其機(jī)制研究。方法在原代培養(yǎng)的小鼠皮層神經(jīng)元上建立氧糖剝奪/復(fù)氧復(fù)糖（OGD/R）模型模擬體內(nèi)缺血再灌注損傷,根據(jù)再灌注時(shí)間長(zhǎng)短檢測(cè)自噬的發(fā)生情況,并進(jìn)一步選取自噬發(fā)生最明顯的時(shí)間點(diǎn)。然后分別采用自噬抑制劑-3-MA、自噬激動(dòng)劑-雷帕霉素（rapamycin）、Mdivi-1以及聯(lián)合rapamycin和Mdivi-1進(jìn)行干預(yù),分別從mRNA以及蛋白水平檢測(cè)自噬相關(guān)分子的改變,并同時(shí)檢測(cè)神經(jīng)元損傷情況。結(jié)果 OGD/R處理后,神經(jīng)元自噬隨再灌注時(shí)間增長(zhǎng)而上調(diào),在OGD 2 h/R 24 h時(shí),Beclin 1以及微管相關(guān)輕鏈蛋白3 II/I（LC3 II/I）比值均達(dá)峰值（P<0.001,P<0.01）。細(xì)胞活力結(jié)果顯示,rapamycin可減輕OGD/R損傷（P<0.01）,Mdivi-1則會(huì)加重OGD/R損傷（P<0.05）,但rapamycin可通過(guò)增加自噬來(lái)減輕Mdivi-1造成的損傷（P<0.05）。蛋白檢測(cè)結(jié)果顯示,OGD/R處理后,Mdivi-1可明顯降低神... 

【文章來(lái)源】：中華神經(jīng)外科疾病研究雜志. 2016,15(02)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
    一、主要試劑及抗體
    二、小鼠原代皮層神經(jīng)元培養(yǎng)
    三、OGD/R模型的制備
    四、細(xì)胞活力檢測(cè)（ cell counting kit-8,CCK-8）
    五、實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)
    六、蛋白質(zhì)免疫印跡檢測(cè)（ Western blot）
    七、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    一、在原代培養(yǎng)的小鼠皮層神經(jīng)元中,OGD/R處理后自噬發(fā)生上調(diào)
    二、線粒體分裂抑制劑通過(guò)抑制自噬發(fā)生,進(jìn)而加重OGD/R損傷
討論



本文編號(hào)：3077752