目的探討RNAi技術(shù)體外抑制MuRF1或FOXO3a基因表達(dá)的效果，為RNAi介導(dǎo)的失神經(jīng)骨骼肌萎縮基因治療奠定基礎(chǔ)。方法訂購(gòu)MuRF-1和FOXO3a兩基因的siRNA重組質(zhì)粒，培養(yǎng)大鼠成肌細(xì)胞系L6，將MuRF1和（或）FOXO3asiRNA重組質(zhì)粒在Lipofectamine2000介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染，熒光倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，于轉(zhuǎn)染后48h與72h，采用實(shí)時(shí)定量PCR和Westernblot檢測(cè)siRNA重組質(zhì)粒對(duì)MuRF1和FOXO3a的mRNA和蛋白質(zhì)水平的抑制效果。結(jié)果1.轉(zhuǎn)染后24h，熒光倒置顯微鏡下觀察到細(xì)胞中有綠色熒光表達(dá)，表明成功將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到大鼠成肌細(xì)胞系L6中。2.實(shí)時(shí)定量PCR分析結(jié)果顯示：MuRF1與FOXO3a各自的siRNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后48h，二者干擾序列在mRNA水平分別明顯抑制了MuRF1和FOXO3a的表達(dá)，抑制率達(dá)67％和54％，與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,聯(lián)合MuRF1與FOXO3a兩基因siRNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后48h，干擾序列在mRNA水平亦明顯抑制了MuRF1及FOXO3a的表達(dá)，抑制率達(dá)61％及58％，與對(duì)照組相... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文縮略詞
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]失神經(jīng)骨骼肌萎縮中泛素蛋白連接酶Murf1和核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB表達(dá)與被動(dòng)運(yùn)動(dòng)干預(yù)[J]. 韓利軍,梁炳生,王樂,張磊.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(24)
[2]失神經(jīng)骨骼肌萎縮與氯沙坦通過核因子κ B/MuRF1通路的延緩作用[J]. 王樂,梁炳生,李文斌,張磊,韓利軍,吳啟平.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(15)
[3]核轉(zhuǎn)錄因子-κB與肌環(huán)狀指蛋白1在失神經(jīng)肌萎縮中的表達(dá)及意義[J]. 李文斌,梁炳生,梁緒.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2010 (04)
[4]失神經(jīng)骨骼肌萎縮防治研究進(jìn)展[J]. 李永平,梁炳生.  國(guó)際骨科學(xué)雜志. 2006(06)



本文編號(hào)：3057871