目的探討p300/CBP相關(guān)因子（PCAF）對大鼠血管平滑肌細(xì)胞（VSMCs）增殖的作用及機(jī)制。方法組織塊貼壁法獲取大鼠原代VSMCs,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒轉(zhuǎn)染VSMCs抑制PCAF表達(dá)。選擇1μg/mL的脂多糖（LPS）作為VSMCs增殖誘導(dǎo)劑。將實(shí)驗(yàn)分為6組:對照組（A組）、對照組+1μg/mL脂多糖刺激組（B組）、Ad-GFP腺病毒轉(zhuǎn)染組（C組）、Ad-GFP腺病毒轉(zhuǎn)染+1μg/mL脂多糖刺激組（D組）、Ad-PCAF RNAi腺病毒轉(zhuǎn)染組（E組）、Ad-PCAF RNAi腺病毒轉(zhuǎn)染+1μg/mL脂多糖刺激組（F組）,使用CCK-8和流式細(xì)胞周期檢測細(xì)胞增殖情況,各組中PCAF表達(dá)采用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測,蛋白免疫印跡法檢測各組絲裂原活化蛋白激酶p38（p38 MAPK）、磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38（p-p38 MAPK）、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（AKT）、磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（p-AKT）表達(dá)水平。結(jié)果 1μg/mL脂多糖明顯促進(jìn)VSMCs增殖;同時,下調(diào)PCAF表達(dá)后,VSMCs增殖活性明顯降低（P<0.05）。流式細(xì)胞周期檢測結(jié)果顯... 

【文章來源】：中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2020,18(17)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

大鼠VSMCs及Ad-PCAF RNAi重組腺病毒轉(zhuǎn)染VSMCs效率的鑒定

當(dāng)脂多糖使用濃度為1 μg/mL時VSMCs增殖能力明顯提高,但隨著脂多糖濃度的進(jìn)一步增加其增殖能力增速減慢,故在本實(shí)驗(yàn)中選擇脂多糖濃度為1 μg/mL。詳見圖2。2.3 各組PCAF mRNA表達(dá)及VSMCs增殖活性比較

與A組比較,C組細(xì)胞周期分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與C組比較,D組細(xì)胞經(jīng)脂多糖刺激后S期(藍(lán)色斜線區(qū)域)細(xì)胞明顯減少,而G2期(黃色區(qū)域)細(xì)胞占比明顯增多(P<0.05),提示脂多糖刺激后細(xì)胞由S期(藍(lán)色斜線區(qū)域)進(jìn)入G2期(黃色區(qū)域),細(xì)胞周期進(jìn)展加快,細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)。然而與D組比較,F組下調(diào)PCAF后,S期(藍(lán)色斜線區(qū)域)細(xì)胞明顯增多,G2期(黃色區(qū)域)細(xì)胞占比明顯減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),細(xì)胞周期S期到G2期阻滯,細(xì)胞增殖能力減弱。詳見圖3。2.5 下調(diào)PCAF抑制p-p38 MAPK及p-AKT表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]斑蝥素對血小板衍生生長因子BB誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)制研究[J]. 邱立強(qiáng),徐昌武,李雯靜,江洪,吳剛,羅強(qiáng),夏豪.  中華老年心腦血管病雜志. 2019(01)
[2]賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶2B與動脈粥樣硬化關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 邱立強(qiáng),徐昌武,夏豪.  中華老年心腦血管病雜志. 2018(05)



本文編號：3056814