為了探尋Notch信號(hào)通路與AKT信號(hào)通路在腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中作用機(jī)理，以及Notch信號(hào)通路與AKT信號(hào)通路之間的相互作用關(guān)系，探討抑制Notch信號(hào)和AKT信號(hào)的分子靶向治療對(duì)治療腦膠質(zhì)瘤的可能性，實(shí)驗(yàn)中使用Notch信號(hào)通路抑制劑MRK003和AKT信號(hào)通路抑制劑MK-2206兩種藥物，并且利用實(shí)時(shí)定量PCR（QRT-PCR）和免疫蛋白印跡（Western blotting）法檢測(cè)Notch和AKT在腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中mRNA表達(dá)及蛋白表達(dá)情況；用細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、遷移實(shí)驗(yàn)及侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)抑制Notch和AKT對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長及侵潤活動(dòng)的作用；并且分別用各自抑制劑單獨(dú)用藥與聯(lián)合用藥的方法，觀察不同用藥之間的差異性。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)在單獨(dú)用藥實(shí)驗(yàn)中，MRK003和MK-2206能有效地抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長、遷移和侵襲活動(dòng)；QRT-PCR實(shí)驗(yàn)中MRK003能減弱Notch信號(hào)下游基因Hes1的mRNA表達(dá)，在免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)中MK-2206則能減弱磷酸化AKT蛋白的表達(dá)；與此同時(shí)Notch抑制劑MRK003也能影響磷酸化AKT蛋白的表達(dá)。在聯(lián)合用藥實(shí)驗(yàn)中，Notch信號(hào)抑制劑MRK003和MK-2... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

RNAi機(jī)制示意圖

圖2.2 Notch受體及其配體示意圖ure 2.2 Scheme of Notch repeats and their ligands激活機(jī)制Notch信號(hào)通路的激活需要經(jīng)過三步酶切過程結(jié)合是 Notch 信號(hào)激活的必要條件，兩者結(jié)合的 furin 蛋白酶（furin-like convertase）酶切，點(diǎn)，酶切形成的 NEC和 NTM通過一種 Ca2+依賴式的成熟 Notch 受體，并轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞膜。②ADAM（a disintegrin and metallop rotease） 因 子 -α- 轉(zhuǎn) 換 酶 （ TNF-α-converting enzy

圖2.3 Notch信號(hào)通路激活途徑Figure2.3 Activation of Notch signaling pathway2.2.3 Notch 信號(hào)通路與神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤Notch信號(hào)通路與腫瘤的相關(guān)性最先在由點(diǎn)突變或染色體易位引起的T細(xì)胞白血病中確立[95]。隨著研究的深入, 研究者們發(fā)現(xiàn)Notch信號(hào)通路的活性變化與很多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展也有密切的關(guān)系，在很多腫瘤都發(fā)現(xiàn)Notch信號(hào)的異�；罨�，比如血液系統(tǒng)腫瘤、小細(xì)胞肺癌、造血系統(tǒng)腫瘤、宮頸癌、頭頸腫瘤、肝癌、胰腺癌、腎癌、乳腺癌、皮膚癌等[96]。Notch在腫瘤中有不同的作用，首先，Notch在生物進(jìn)化中高度保守，并且存在于多數(shù)組織細(xì)胞中，不同的刺激信號(hào)可以激活Notch通路，這種共享性是Notch通路功能復(fù)雜的原因之一。Notch通路的成員是固定的，但是亞型的配體和靶基

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3030779