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MPP+通過mTOR信號通路下調(diào)PC12細胞的自噬活性

發(fā)布時間:2021-02-11 09:17
  目的:1.觀察不同濃度及不同時間點的MPP+對PC12細胞的存活率的影響,確定PD(Parkinson’s disease)細胞模型的合適濃度及時間范圍;2.觀察MPP+對PC12細胞的存活率、LDH漏出率及自噬-溶酶體途徑相關(guān)蛋白LC3-II、Beclin1的表達水平的影響,并觀察雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)的拮抗作用;3.觀察MPP+對自噬上游調(diào)控蛋白mTOR(哺乳動物雷帕霉素靶蛋白)及其信號通路相關(guān)蛋白的表達水平影響,并觀察RAPA的作用。方法:根據(jù)不同濃度及作用不同時間MPP+對PC12細胞活性的影響,選擇合適的MPP+處理濃度及時間,利用PC12細胞經(jīng)過MPP+處理制作帕金森模型,再給予RAPA進行干預(yù):MTT法檢測細胞存活率,LDH試劑盒檢測上清液中的LDH活性,Western blot技術(shù)分析LC3-II、Beclin1、mTOR、Raptor、Rictor、p-p70s6k、p-4E-BP1蛋白表達水平的變化,探討MPP+調(diào)節(jié)PC12細胞自噬活性的機制。結(jié)果:1. PC12細胞相對存活率隨MPP+濃度梯度呈降低趨勢,MPP+濃度在0.25~3.0mM范圍內(nèi)細... 

【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【圖文】:

MPP+通過mTOR信號通路下調(diào)PC12細胞的自噬活性


不同濃度的MPP+對PC12細胞存活率的影響

MPP+通過mTOR信號通路下調(diào)PC12細胞的自噬活性


不同時間點的MPP+對PC12細胞存活率的影響

MPP+通過mTOR信號通路下調(diào)PC12細胞的自噬活性


MPP+對LC3蛋白表達水平的影響

【參考文獻】:
期刊論文
[1]mTOR在記憶功能中的作用[J]. 隨力,任杰.  中國藥理學(xué)通報. 2011(06)
[2]MPTP/MPP+誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡的機制研究[J]. 張玉花,蔡蕊,劉江華,朱春雨,解洪榮.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2011(05)
[3]MPTP/MPP+誘導(dǎo)的帕金森病實驗?zāi)P偷难芯窟M展[J]. 解洪榮,張玉花,李雪松,王立崚,胡林森.  醫(yī)學(xué)綜述. 2011(05)
[4]mTOR信號通路及其與阿爾茨海默病的關(guān)系[J]. 汝文娟,唐少君,鐘翎.  中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2010(08)
[5]mTOR信號通路與學(xué)習(xí)記憶[J]. 張筍,王維平.  醫(yī)學(xué)綜述. 2010(13)
[6]自噬的分子機制與病理生理意義[J]. 葉青,鄭民華.  國際病理科學(xué)與臨床雜志. 2007(04)



本文編號:3028884

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