目的研究多梳蛋白2（PCL2）基因與膠質(zhì)瘤增殖、凋亡等特性的關(guān)系,探討PCL2在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用和可能機(jī)制。方法1.利用癌癥基因組圖譜（TCGA）數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)多種腫瘤中PCL2的表達(dá)情況,收集臨床膠質(zhì)瘤（WHOⅠ——Ⅳ級(jí)）病例117例,免疫組化染色檢測(cè)PCL2表達(dá)和定位。2.構(gòu)建過(guò)表達(dá)PCL2基因和干擾PCL2基因的腺病毒載體,分別轉(zhuǎn)染進(jìn)入人膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞系和U251細(xì)胞系,Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PCL2蛋白表達(dá)水平;3.倒置顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染PCL2后的形態(tài)變化;CCK8實(shí)驗(yàn)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線、EdU增殖檢測(cè)法確定細(xì)胞增殖能力、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞集落形成能力、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的周期和凋亡;用Western blot方法檢測(cè)過(guò)表達(dá)PCL2和干擾PCL2條件下的PRC2復(fù)合物核心蛋白EZH2、SUZ12和EED的表達(dá)情況以及H3K27me3、H3K9me2、H3K4me2甲基化水平。4.使用EZH2的抑制劑——s-腺苷-同型半胱氨酸水解酶抑制劑（DZNep）干預(yù)過(guò)表達(dá)PCL2基因的U87細(xì)胞,檢測(cè)瘤細(xì)胞增殖、集落形成能力以及PRC2核心蛋白EZH2、SUZ12... 

【文章來(lái)源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
前言
第一部分 PCL2在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第二部分 過(guò)表達(dá)PCL2 和干擾PCL2 腺病毒載體的構(gòu)建
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第三部分 PCL2 促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖,改變細(xì)胞周期
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第四部分 PCL2 促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖與凋亡的機(jī)制
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
多梳抑制復(fù)合物2在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中作用的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
個(gè)人簡(jiǎn)介
開題、中期及學(xué)位答辯委員組成



本文編號(hào)：3025068