miR-183通過LRIG1調(diào)控EGFR/AKT通路在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤放療耐受中的作用及機制研究
發(fā)布時間：2021-01-26 07:23
研究背景與目的:膠質(zhì)瘤是最常見的腫瘤相關(guān)性死亡的原因。基于放射治療的療法似乎有效,然而多種膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞產(chǎn)生的放療耐受卻能逆轉(zhuǎn)此種療效。因此,應(yīng)用潛在的放療耐受機制對于膠質(zhì)瘤的治療十分重要。本研究通過構(gòu)建放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251R,檢測miR-183與LRIG1在腦膠質(zhì)瘤組織及細(xì)胞中的表達(dá)及其相關(guān)性,進(jìn)一步探討miR-183介導(dǎo)EGFR/AKT通路在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤放療耐受中的作用及機制,以期為膠質(zhì)瘤放射治療提供新的思路。方法:不同劑量X線照射干預(yù)后構(gòu)建膠質(zhì)瘤放療耐受細(xì)胞系U251R。分別用CCK-8和Annexin V/PI測膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞活力及凋亡情況。采用Real-time PCR和western blot檢測相關(guān)基因及蛋白的表達(dá)。熒光素酶實驗檢測miR-183與LRIG1之間的關(guān)系。通過構(gòu)建膠質(zhì)瘤異種移植裸鼠模型,驗證miR-183與放療耐受在體內(nèi)的作用機制。結(jié)果:與放療敏感的膠質(zhì)瘤組織相比,放療耐受組織中miR-183表達(dá)顯著增加,而LRIG1 m RNA的表達(dá)降低。LRIG1在放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251R低于正常膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251中的表達(dá)水平。U251R中過表達(dá)的m...
【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：52 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
實時熒光定量-PCR檢測放療敏感組織和耐受組織中miR-183和LRIG1的表達(dá)水平
圖 2 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 U251、U251R 細(xì)胞凋亡和細(xì)胞活力檢測3.1.3 qRT-PCR 和 Western blot 檢測 U251、U251R 中 miR-183 和 LRIG1表達(dá)水平對 U251、U251R 細(xì)胞進(jìn)行實時熒光定量 PCR 檢測 miR-183 和 LRIG1 mRNA表達(dá)水平，Western blot 檢測 LRIG1 表達(dá)水平，結(jié)果顯示，通過 qRT-PCR 檢測miR-183 在放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251R 表達(dá)水平高于正常膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251（P < 0.05），通過 qRT-PCR 和 Western blot 檢測 LRIG1 在放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251R 低于正常膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251 中的表達(dá)水平（P < 0.05），見圖 3。
圖 2 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 U251、U251R 細(xì)胞凋亡和細(xì)胞活力檢測3.1.3 qRT-PCR 和 Western blot 檢測 U251、U251R 中 miR-183 和 LRIG1表達(dá)水平對 U251、U251R 細(xì)胞進(jìn)行實時熒光定量 PCR 檢測 miR-183 和 LRIG1 mRNA表達(dá)水平，Western blot 檢測 LRIG1 表達(dá)水平，結(jié)果顯示，通過 qRT-PCR 檢測miR-183 在放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251R 表達(dá)水平高于正常膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251（P < 0.05），通過 qRT-PCR 和 Western blot 檢測 LRIG1 在放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251R 低于正常膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251 中的表達(dá)水平（P < 0.05），見圖 3。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肝癌血清中miRNA-183的表達(dá)及臨床意義[J]. 張自立,石文霞,李霖,孟祥朝,高英堂,杜智. 天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2017(06)
[2]結(jié)腸癌患者血清中microRNA-183及胸苷激酶1的表達(dá)及意義[J]. 王金亮,孟祥朝,張自立,李琦. 天津醫(yī)藥. 2017(01)
[3]肝癌細(xì)胞miR-183表達(dá)及上下游調(diào)控機制探討[J]. 王欣欣,崔海鵬,董建一,李慧玲,陳軍,王福金,王愛國,王靖宇. 中華腫瘤防治雜志. 2016(16)
[4]非小細(xì)胞肺癌患者血漿miR-10b、miR-122、miR-16和miR-183水平及其與總生存期的關(guān)系[J]. 王富民,張寰,曲金力,錢碧云. 山東醫(yī)藥. 2016(08)
[5]MiR-183抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤放射抵抗等惡性行為[J]. 曾憲一,陳嘉榮,任陳,杜莎莎,謝國柱,鄭榕,袁亞維. 實用醫(yī)學(xué)雜志. 2015(24)
本文編號：3000712
【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：52 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
實時熒光定量-PCR檢測放療敏感組織和耐受組織中miR-183和LRIG1的表達(dá)水平
圖 2 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 U251、U251R 細(xì)胞凋亡和細(xì)胞活力檢測3.1.3 qRT-PCR 和 Western blot 檢測 U251、U251R 中 miR-183 和 LRIG1表達(dá)水平對 U251、U251R 細(xì)胞進(jìn)行實時熒光定量 PCR 檢測 miR-183 和 LRIG1 mRNA表達(dá)水平，Western blot 檢測 LRIG1 表達(dá)水平，結(jié)果顯示，通過 qRT-PCR 檢測miR-183 在放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251R 表達(dá)水平高于正常膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251（P < 0.05），通過 qRT-PCR 和 Western blot 檢測 LRIG1 在放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251R 低于正常膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251 中的表達(dá)水平（P < 0.05），見圖 3。
圖 2 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 U251、U251R 細(xì)胞凋亡和細(xì)胞活力檢測3.1.3 qRT-PCR 和 Western blot 檢測 U251、U251R 中 miR-183 和 LRIG1表達(dá)水平對 U251、U251R 細(xì)胞進(jìn)行實時熒光定量 PCR 檢測 miR-183 和 LRIG1 mRNA表達(dá)水平，Western blot 檢測 LRIG1 表達(dá)水平，結(jié)果顯示，通過 qRT-PCR 檢測miR-183 在放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251R 表達(dá)水平高于正常膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251（P < 0.05），通過 qRT-PCR 和 Western blot 檢測 LRIG1 在放療耐受膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251R 低于正常膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U251 中的表達(dá)水平（P < 0.05），見圖 3。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肝癌血清中miRNA-183的表達(dá)及臨床意義[J]. 張自立,石文霞,李霖,孟祥朝,高英堂,杜智. 天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2017(06)
[2]結(jié)腸癌患者血清中microRNA-183及胸苷激酶1的表達(dá)及意義[J]. 王金亮,孟祥朝,張自立,李琦. 天津醫(yī)藥. 2017(01)
[3]肝癌細(xì)胞miR-183表達(dá)及上下游調(diào)控機制探討[J]. 王欣欣,崔海鵬,董建一,李慧玲,陳軍,王福金,王愛國,王靖宇. 中華腫瘤防治雜志. 2016(16)
[4]非小細(xì)胞肺癌患者血漿miR-10b、miR-122、miR-16和miR-183水平及其與總生存期的關(guān)系[J]. 王富民,張寰,曲金力,錢碧云. 山東醫(yī)藥. 2016(08)
[5]MiR-183抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤放射抵抗等惡性行為[J]. 曾憲一,陳嘉榮,任陳,杜莎莎,謝國柱,鄭榕,袁亞維. 實用醫(yī)學(xué)雜志. 2015(24)
本文編號：3000712
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