中樞炎癥是多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)（Central nervous system,CNS）疾病共同的病理生理通路,可導(dǎo)致突觸損傷、神經(jīng)元結(jié)構(gòu)功能喪失和CNS疾病惡化。腦內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞的過度激活、促炎因子的過度釋放以及血腦屏障（Blood brain barrier,BBB）的損傷是中樞炎癥的重要特征。盡管中樞炎癥相關(guān)性疾病具有完全不同的臨床表現(xiàn),但是機(jī)體蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)的喪失是其共有的分子病理改變。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（Endoplasmic reticulum,ER）是細(xì)胞合成、折疊、加工蛋白質(zhì)的主要場所。一些生理或病理因素均會干擾內(nèi)質(zhì)網(wǎng)正常蛋白折疊過程,導(dǎo)致未折疊蛋白或者錯誤折疊蛋白在ER內(nèi)聚集,稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（Endoplasmic reticulum stress,ERS）,繼而啟動未折疊蛋白反應(yīng)（Unfolded protein response,UPR）。既往認(rèn)為ERS是導(dǎo)致CNS病變的因素之一,但是近期有學(xué)者提出了“輕度ERS”的概念,即非損傷性、溫和的ERS。輕度ERS未激活UPR下游促凋亡蛋白,只引起UPR上游信號通路分子的活化,因而具有迥然不同的病理生理效應(yīng)。已有研究報道輕度ERS在腦缺血、帕金森... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：131 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

（A）實(shí)驗(yàn)一流程：給予各組大鼠不同濃度TM或者10%DMSO，24小時后處死大鼠，取腦組織

⑤E組（TM+4-PBA+LPS組）：側(cè)腦室給予TM（1.5 μg/μL，2μL）后立即腹腔注射100mg/kg 4-PBA，1小時后腹腔注射500 μg/kg LPS。LPS注射后24小時，處死大鼠，取腦組織，分組和實(shí)驗(yàn)流程詳見實(shí)驗(yàn)流程圖2。為了節(jié)約大鼠數(shù)量，實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二共用同一組正常組大鼠。

1、低劑量 TM 可以誘導(dǎo)大鼠海馬區(qū)產(chǎn)生非損傷性的輕度 ERS1.1、低劑量 TM 僅激活 UPR 上游信號通路蛋白，不引起下游凋亡蛋白的升高TM 是一種經(jīng)典的 ERS 激活劑[19]。在本實(shí)驗(yàn)中，側(cè)腦室分別注射 0.3、3 和30 μg TM 來觀察不同劑量的 TM 對大鼠海馬區(qū) UPR 的激活情況。已知 IRE1α介導(dǎo)的信號通路是 UPR 中最保守的信號通路。與 BiP 解離后，IRE1α自身磷酸化會激活其內(nèi)切核糖核酸酶活性。磷酸化的 IRE1α可切除非剪接型 X 盒結(jié)合蛋白 （Unspliced x-box binding protein 1，XBP1u）上 26 個核苷酸，移動 mRNA 的編碼閱讀框，使之轉(zhuǎn)化為剪接型 XBP1（XBP1s）。XBP1s 是一種穩(wěn)定而活躍的轉(zhuǎn)錄因子，它的下游基因與蛋白質(zhì)折疊、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)降解系統(tǒng)、蛋白質(zhì)翻譯、脂質(zhì)合成等生物學(xué)過程有關(guān)[8]。為了觀察側(cè)腦室注射 TM 后 IRE1α通路的激活情況我們采用 Western Blotting 方法檢測 XBP1s、XBP1u 和 p-IRE1α的表達(dá)。如圖 所示，注射 0.3、3 和 30 μg TM 后，p-IRE1α和 XBP1s 的表達(dá)量與正常組相比明顯上升，XBP1u 表達(dá)量明顯降低。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Is autophagy an elective strategy to protect neurons from dysregulated cholesterol metabolism?[J]. Elisa Piscianz,Liza Vecchi Brumatti,Alberto Tommasini,Annalisa Marcuzzi.  Neural Regeneration Research. 2019(04)



本文編號：2999625