中樞炎癥是多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)（Central nervous system,CNS）疾病共同的病理生理通路,可導致突觸損傷、神經(jīng)元結構功能喪失和CNS疾病惡化。腦內(nèi)膠質細胞的過度激活、促炎因子的過度釋放以及血腦屏障（Blood brain barrier,BBB）的損傷是中樞炎癥的重要特征。盡管中樞炎癥相關性疾病具有完全不同的臨床表現(xiàn),但是機體蛋白質穩(wěn)態(tài)的喪失是其共有的分子病理改變。內(nèi)質網(wǎng)（Endoplasmic reticulum,ER）是細胞合成、折疊、加工蛋白質的主要場所。一些生理或病理因素均會干擾內(nèi)質網(wǎng)正常蛋白折疊過程,導致未折疊蛋白或者錯誤折疊蛋白在ER內(nèi)聚集,稱為內(nèi)質網(wǎng)應激（Endoplasmic reticulum stress,ERS）,繼而啟動未折疊蛋白反應（Unfolded protein response,UPR）。既往認為ERS是導致CNS病變的因素之一,但是近期有學者提出了“輕度ERS”的概念,即非損傷性、溫和的ERS。輕度ERS未激活UPR下游促凋亡蛋白,只引起UPR上游信號通路分子的活化,因而具有迥然不同的病理生理效應。已有研究報道輕度ERS在腦缺血、帕金森... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學江蘇省

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

（A）實驗一流程：給予各組大鼠不同濃度TM或者10%DMSO，24小時后處死大鼠，取腦組織

⑤E組（TM+4-PBA+LPS組）：側腦室給予TM（1.5 μg/μL，2μL）后立即腹腔注射100mg/kg 4-PBA，1小時后腹腔注射500 μg/kg LPS。LPS注射后24小時，處死大鼠，取腦組織，分組和實驗流程詳見實驗流程圖2。為了節(jié)約大鼠數(shù)量，實驗一和實驗二共用同一組正常組大鼠。

1、低劑量 TM 可以誘導大鼠海馬區(qū)產(chǎn)生非損傷性的輕度 ERS1.1、低劑量 TM 僅激活 UPR 上游信號通路蛋白，不引起下游凋亡蛋白的升高TM 是一種經(jīng)典的 ERS 激活劑[19]。在本實驗中，側腦室分別注射 0.3、3 和30 μg TM 來觀察不同劑量的 TM 對大鼠海馬區(qū) UPR 的激活情況。已知 IRE1α介導的信號通路是 UPR 中最保守的信號通路。與 BiP 解離后，IRE1α自身磷酸化會激活其內(nèi)切核糖核酸酶活性。磷酸化的 IRE1α可切除非剪接型 X 盒結合蛋白 （Unspliced x-box binding protein 1，XBP1u）上 26 個核苷酸，移動 mRNA 的編碼閱讀框，使之轉化為剪接型 XBP1（XBP1s）。XBP1s 是一種穩(wěn)定而活躍的轉錄因子，它的下游基因與蛋白質折疊、內(nèi)質網(wǎng)相關降解系統(tǒng)、蛋白質翻譯、脂質合成等生物學過程有關[8]。為了觀察側腦室注射 TM 后 IRE1α通路的激活情況我們采用 Western Blotting 方法檢測 XBP1s、XBP1u 和 p-IRE1α的表達。如圖 所示，注射 0.3、3 和 30 μg TM 后，p-IRE1α和 XBP1s 的表達量與正常組相比明顯上升，XBP1u 表達量明顯降低。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Is autophagy an elective strategy to protect neurons from dysregulated cholesterol metabolism?[J]. Elisa Piscianz,Liza Vecchi Brumatti,Alberto Tommasini,Annalisa Marcuzzi.  Neural Regeneration Research. 2019(04)



本文編號：2999625