目的：目前研究提示神經(jīng)元的突觸重塑與癲癇相關(guān)。而limk1是調(diào)控神經(jīng)元細(xì)胞骨架肌動蛋白重塑的核心蛋白，可影響神經(jīng)棘突與生長錐的形成，促進(jìn)軸突、樹突生長。因此我們在癲癇患者及模型中檢測limk1及其磷酸化形式（p-limk1）的表達(dá)，以探索其在癲癇發(fā)病中的作用機(jī)制。方法：在12例難治性癲癇患者及12例非癲癇病人的顳葉組織中，應(yīng)用western blot與免疫組化技術(shù)檢測limk1及p-limk1的表達(dá)差異；在正常大鼠海馬組織及氯化鋰-匹羅卡品誘發(fā)癲癇發(fā)作后6、24、72小時(shí)及7、14、30、60天的大鼠模型中，應(yīng)用western blot與免疫組化技術(shù)檢測limk1及p-limk1的表達(dá)差異。結(jié)果：在人顳葉腦組織及大鼠海馬組織中，免疫組化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)limk1與p-limk1都表達(dá)于神經(jīng)元細(xì)胞漿中。Western blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在難治性癲癇患者中，limk1表達(dá)水平低于非癲癇病人（P<0.05），而p-limk1表達(dá)水平則高于非癲癇病人（P<0.05）。Western blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)limk1的表達(dá)水平在癲癇發(fā)作后6、72小時(shí)及7、14、30、60天的大鼠海馬組織中高于正常大... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測limk1在大鼠海馬組織中的表達(dá)Fig1Immunohistochemistryshowslimk1-positiveneuronsinhippocampustissuesofrats.Inthedentategyrus(a-b),andthehippocampalCA3(a-d),CA1(e-f)oftheepilepticrat,limk1expressionwasstrongeratthetimepointof72hthanthecontrolrat,andwasinthecytoplasm

圖 2 免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測 limk1 在人顳葉皮質(zhì)組織中的表達(dá)Fig2 Immunohistochemistry shows limk1-positive neurons in the temporal lobes of humans.Limk1 expression was in the patient of control group higher than the patient with IE. Theblack arrows show positive cells. (Scale bar = 200μm)2.3 Limk1 的 western blot 結(jié)果將 western blot 實(shí)驗(yàn)中 limk1 蛋白條帶的光密度值比相應(yīng)內(nèi)參 β-actin 條帶的光密度值（以消除上樣及蛋白濃度測量誤差），所得結(jié)果為 limk1 蛋白的表達(dá)量。在癲癇大鼠模型中將正常大鼠、癲癇發(fā)作后 6、24、72h 以及 7、14、30、60d的 limk1 蛋白表達(dá)量用 one-way ANOVA 統(tǒng)計(jì)方法檢驗(yàn) limk1 蛋白在不同分組中的表達(dá)差異情況。結(jié)果為 limk1 蛋白表達(dá)水平在癲癇發(fā)作后（除過 24h）6 個(gè)時(shí)間點(diǎn)都高于正常大鼠；在癲癇發(fā)作后 6h（0.406287±0.057879）、72h（0.436577±0.109625）、

24estern blot 實(shí)驗(yàn)檢測 limk1 在人顳葉及大鼠海馬組織標(biāo)本中的表達(dá)estern blot analyzes limk1 expression in hippocampus tissues of rats and tempoans. (a)Lane one showed limk1 expression in the normal rat, lane 2-8 showsion in hippocampus tissues of rats at the time points of 6, 24, 72h and7, 14, 30, s. (b) The mean OD value of limk1 expressed in hippocampus of rats was sh, 3, 5 showed limk1 expression in temporal lobes of patients with IE, and lan limk1 expression in temporal lobes of the control group. (d)The mean ODexpressed in temporal lobes of humans was shown. Black stars stand for the sance among the control group and other groups(p<0.05).


本文編號：2985887