CD4 + CD25 + Treg在大鼠EAE免疫耐受機制中作用的研究
發(fā)布時間:2021-01-17 22:35
目的:本研究觀察經(jīng)鼻腔連續(xù)多次給予大鼠小劑量髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein, MBP)多肽段MBP68-86,對實驗性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)發(fā)生發(fā)展的影響,通過檢測脾臟CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞(Regulatory T cell,Treg)在CD4+T細胞中的比例、螺旋轉(zhuǎn)錄因子Foxp3mRNA表達水平、細胞因子白介素(IL)-17A、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β1含量,探討Treg在MBP68-86經(jīng)鼻黏膜誘導的大鼠EAE免疫耐受機制中的作用。為探索多發(fā)性硬化(Multiple sclerosis, MS)新的治療方法提供有意義的基礎實驗依據(jù)。方法:將30只6-8周齡雌性Wistar大鼠隨機分為3組,設耐受組、免疫對照組、空白對照組,每組10只。耐受組大鼠經(jīng)鼻腔給予0.5mg/ml濃度的MBP688660ul,免疫對照組予等量的PBS,每日1次,連續(xù)10天,空白對照組未予任何處理,末次給予MBP68-86后第2天,兩組大鼠均足墊注射200μgM...
【文章來源】:中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
符號說明
1 前言
2 材料與方法
2.1 實驗材料和儀器
2.1.1 實驗動物的喂養(yǎng)
2.1.2 免疫原制作
2.1.3 儀器
2.1.4 主要試劑與藥品
2.2 實驗方法
2.2.1 制作免疫抗原
2.2.2 MBP68-86免疫耐受模型的誘導
2.2.3 免疫刺激
2.2.4 動物模型評價
2.2.5 組織取材與病變觀察
2.2.6 脾淋巴細胞懸液制備
+CD25+Tregs水平"> 2.2.7 流式細胞儀檢測脾淋巴細胞中CD4+CD25+Tregs水平
2.2.8 脾細胞懸液中Treg標志物Foxp3mRNA水平檢測
2.2.9 ELISA法檢測三組大鼠脾淋巴細胞上清液TGF-β1、IL-17A水平
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 癥狀觀察及神經(jīng)功能評分
3.2 病理學改變
3.3 CD4+CD25+Treg/CD4+T比例
3.4 Foxp3 mRNA表達量
3.5 IL-17A、TGF-β1 含量
4 討論
4.1 黏膜耐受模型評價
4.2 調(diào)節(jié)性T細胞數(shù)量及功能變化
4.3 調(diào)節(jié)性T細胞臨床應用前景
4.4 不足與展望
5 結(jié)論
參考文獻
附圖
綜述
參考文獻
在讀期間發(fā)表論文
致謝
本文編號:2983717
【文章來源】:中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
符號說明
1 前言
2 材料與方法
2.1 實驗材料和儀器
2.1.1 實驗動物的喂養(yǎng)
2.1.2 免疫原制作
2.1.3 儀器
2.1.4 主要試劑與藥品
2.2 實驗方法
2.2.1 制作免疫抗原
2.2.2 MBP68-86免疫耐受模型的誘導
2.2.3 免疫刺激
2.2.4 動物模型評價
2.2.5 組織取材與病變觀察
2.2.6 脾淋巴細胞懸液制備
+CD25+Tregs水平"> 2.2.7 流式細胞儀檢測脾淋巴細胞中CD4+CD25+Tregs水平
2.2.8 脾細胞懸液中Treg標志物Foxp3mRNA水平檢測
2.2.9 ELISA法檢測三組大鼠脾淋巴細胞上清液TGF-β1、IL-17A水平
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 癥狀觀察及神經(jīng)功能評分
3.2 病理學改變
3.3 CD4+CD25+Treg/CD4+T比例
3.4 Foxp3 mRNA表達量
3.5 IL-17A、TGF-β1 含量
4 討論
4.1 黏膜耐受模型評價
4.2 調(diào)節(jié)性T細胞數(shù)量及功能變化
4.3 調(diào)節(jié)性T細胞臨床應用前景
4.4 不足與展望
5 結(jié)論
參考文獻
附圖
綜述
參考文獻
在讀期間發(fā)表論文
致謝
本文編號:2983717
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