目的：本研究觀察經(jīng)鼻腔連續(xù)多次給予大鼠小劑量髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein, MBP）多肽段MBP68-86,對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）發(fā)生發(fā)展的影響,通過檢測(cè)脾臟CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Regulatory T cell,Treg）在CD4+T細(xì)胞中的比例、螺旋轉(zhuǎn)錄因子Foxp3mRNA表達(dá)水平、細(xì)胞因子白介素（IL）-17A、轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-β1含量,探討Treg在MBP68-86經(jīng)鼻黏膜誘導(dǎo)的大鼠EAE免疫耐受機(jī)制中的作用。為探索多發(fā)性硬化（Multiple sclerosis, MS）新的治療方法提供有意義的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：將30只6-8周齡雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為3組,設(shè)耐受組、免疫對(duì)照組、空白對(duì)照組,每組10只。耐受組大鼠經(jīng)鼻腔給予0.5mg/ml濃度的MBP68₈660ul,免疫對(duì)照組予等量的PBS,每日1次,連續(xù)10天,空白對(duì)照組未予任何處理,末次給予MBP68-86后第2天,兩組大鼠均足墊注射200μgM... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
符號(hào)說明
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的喂養(yǎng)
        2.1.2 免疫原制作
        2.1.3 儀器
        2.1.4 主要試劑與藥品
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 制作免疫抗原
        2.2.2 MBP68-86免疫耐受模型的誘導(dǎo)
        2.2.3 免疫刺激
        2.2.4 動(dòng)物模型評(píng)價(jià)
        2.2.5 組織取材與病變觀察
        2.2.6 脾淋巴細(xì)胞懸液制備
+CD25⁺Tregs水平">        2.2.7 流式細(xì)胞儀檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞中CD4⁺CD25⁺Tregs水平
        2.2.8 脾細(xì)胞懸液中Treg標(biāo)志物Foxp3mRNA水平檢測(cè)
        2.2.9 ELISA法檢測(cè)三組大鼠脾淋巴細(xì)胞上清液TGF-β1、IL-17A水平
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 癥狀觀察及神經(jīng)功能評(píng)分
    3.2 病理學(xué)改變
    3.3 CD4+CD25+Treg/CD4+T比例
    3.4 Foxp3 mRNA表達(dá)量
    3.5 IL-17A、TGF-β1 含量
4 討論
    4.1 黏膜耐受模型評(píng)價(jià)
    4.2 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量及功能變化
    4.3 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞臨床應(yīng)用前景
    4.4 不足與展望
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表論文
致謝



本文編號(hào)：2983717