目的:探討miR-423-5p在人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞中的表達(dá)及其調(diào)控程序性細(xì)胞死亡蛋白5（programmed cell death protein 5,PDCD5）增強膠質(zhì)瘤細(xì)胞對替莫唑胺（temozolomide,TMZ）的耐藥性。方法:收集2017年1月至2018年12月北華大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)切除的20例腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者的瘤及瘤旁組織標(biāo)本,以及膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251、U87、SHG-44和人腦小膠質(zhì)細(xì)胞株HMC-3,用q PCR法檢測膠質(zhì)瘤組織及細(xì)胞系中miR-423-5p和PDCD5的表達(dá)水平。用合成的miR-423-5p mimics和miR-NC分別轉(zhuǎn)染U251和U87細(xì)胞,同時用不同濃度（50、100、150和200μmol/L）的TMZ處理細(xì)胞,檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞對TMZ的耐藥性,用MTT法、克隆形成實驗檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞的增殖活力,用Western blotting檢測U251、U87細(xì)胞中c-caspase 3、Bcl-2和PDCD5蛋白的表達(dá)。用雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞CmiR-423-5p與PDCD5的靶向關(guān)系。結(jié)果:miR-423-5p在腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織和膠質(zhì)瘤細(xì)... 

【文章來源】：中國腫瘤生物治療雜志. 2020,27(10)北大核心

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【部分圖文】：

miR-423-5p靶向結(jié)合PDCD5結(jié)合3’UTR(A,B）、過表達(dá)miR-423-5p抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞PDCD5 mRNA和蛋白水平的表達(dá)（C,D)

WB檢測結(jié)果（圖2C）顯示，經(jīng)培養(yǎng)48 h后，與miR-NC+TMZ比較，miR-423-5p mimics+TMZ組U251、U87細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白c-caspase 3表達(dá)水平明顯下降（t=12.46、7.995，均P<0.01）、Bcl-2蛋白表達(dá)水平明顯升高（t=7.735,P<0.01;t=3.611,P<0.05）。以上實驗結(jié)果表明，在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中過表達(dá)miR-423-5p可使細(xì)胞對TMZ的敏感性下降，提高其對TMZ的耐藥性。圖2 miR-423-5p對膠質(zhì)瘤細(xì)胞在TMZ處理下的存活（A）、克隆形成能力（B）及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)（C）的影響

圖1 miR-423-5p在腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織（A）、細(xì)胞系（B,C）中的表達(dá)及其對膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖能力（D）的影響2.3 miR-423-5p靶向抑制PDCD5 mRNA和蛋白的表達(dá)增強膠質(zhì)瘤細(xì)胞對TMZ的耐藥性

【參考文獻】：
期刊論文
[1]過表達(dá)程序性細(xì)胞死亡基因5提高腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對替莫唑胺的化療敏感性[J]. 王雷,沈維高,劉艷波,許海洋.  中國腫瘤生物治療雜志. 2019(08)
[2]鼻腔-鼻竇鱗狀細(xì)胞癌中PDCD5和Bcl-2蛋白的表達(dá)及意義[J]. 陸鴻略,王成碩,郝玲玲,尹桂茹,郝然.  臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2014(17)
[3]腎透明細(xì)胞癌PDCD5表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系[J]. 譚萬龍,熊林,鄭少斌,郁兆存,齊桓,杜躍軍,吳芃.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2006(09)



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