目的：研究多巴胺（Dopamine, DA）對多巴胺細(xì)胞的損傷影響和醌氧化還原酶（Quinone oxidoreductase, NQO1）對多巴胺細(xì)胞損傷的保護(hù)作用,進(jìn)一步尋求帕金森病發(fā)病機(jī)理與相關(guān)的防治措施。方法：通過改變培養(yǎng)條件和添加細(xì)胞因子構(gòu)建多巴胺細(xì)胞模型；運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法和免疫熒光方法檢測神經(jīng)元和多巴胺神經(jīng)細(xì)胞的特異性蛋白微管結(jié)合蛋白（Microtubule-associated protein2, MAP2）和酪氨酸羥化酶（Tyrosine hydroxylase, TH）;運(yùn)用單核細(xì)胞直接細(xì)胞毒性測定（mono-nuclear cell direct cytotoxicity assay, MTT）方法檢測多巴胺對細(xì)胞活性的影響；運(yùn)用蛋白質(zhì)印跡（Western Blot）方法檢測細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)變化情況,并通過醌蛋白檢測方法（氯化硝基四氮唑藍(lán)NBT/甘氨酸法）檢測不同條件下細(xì)胞內(nèi)的醌化蛋白含量變化；運(yùn)用腺病毒載體構(gòu)建高表達(dá)NQO1的原代細(xì)胞。運(yùn)用SF誘導(dǎo)整體動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)高表達(dá)NQO1并通過腦片免疫組織化學(xué)和、Vestern Blot方法檢測NQO1的表達(dá)量變化。結(jié)... 

【文章來源】：華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 細(xì)胞模型的建立
    1 材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 SHSY5Y細(xì)胞系模型的建立
        2.2 原代細(xì)胞模型的建立
    3 討論
第二章 DA對細(xì)胞的損傷作用
    1 材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 DA對SH-SY5Y細(xì)胞和誘導(dǎo)后細(xì)胞的毒性影響
        2.2 DA對原代細(xì)胞的損傷
    3 討論
第三章 NQO1對原代神經(jīng)細(xì)胞DA毒性的保護(hù)
    1 材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 SF預(yù)處理后原代TH神經(jīng)細(xì)胞對于DA損傷后的數(shù)量變化
        2.2 NQO1蛋白表達(dá)量變化的Western Blot檢測
        2.3 細(xì)胞內(nèi)醌蛋白檢測
        2.4 免疫熒光檢測NQO1-腺病毒感染后NQO1表達(dá)效果
        2.5 WB檢測腺病毒感染細(xì)胞系后的表達(dá)情況
        2.6 感染NQO1-腺病毒對DA損傷后TH陽性細(xì)胞數(shù)量的影響
        2.7 原代細(xì)胞中NQO1的表達(dá)
        2.8 SF誘導(dǎo)后原代細(xì)胞中NQO1的表達(dá)
        2.9 腺病毒表達(dá)后NQO1的陽性細(xì)胞以及在細(xì)胞中的定位
    3 討論
第四章 SF在動物水平上的作用
    1 材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 SF誘導(dǎo)大鼠腦內(nèi)NQO1蛋白表達(dá)情況
    3 討論
綜述 線粒體損傷和氧化應(yīng)激
    線粒體呼吸鏈和氧化有關(guān)的問題
    在老年大腦和神經(jīng)變性疾病中線粒體DNA變化和氧化應(yīng)激
    在小鼠體內(nèi)線粒體DNA缺失導(dǎo)致老化和氧化應(yīng)激
    活性氧對線粒體DNA突變的影響
    復(fù)合體Ⅰ,氧化應(yīng)激和帕金森病
    復(fù)合物Ⅰ缺失對在帕金森病中氧化應(yīng)激和神經(jīng)變性的影響
    復(fù)合物Ⅰ缺失在帕金森病的起源
    結(jié)論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]6-OHDA制作帕金森病大鼠模型及評估[J]. 張偉,楊輝.  四川醫(yī)學(xué). 2007(08)
[2]帕金森病發(fā)病機(jī)制的研究[J]. 郝斌,周曉平.  中國藥物與臨床. 2004(07)
[3]NQO1與腫瘤[J]. 代恩勇.  國外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊. 2003(03)
[4]NQO1酶及其被氧環(huán)境誘導(dǎo)表達(dá)的研究進(jìn)展[J]. 夏小俊,金中初.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2002(03)
[5]多巴胺抑制PC12細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡作用的研究[J]. 李立宏,高國棟,張寶國,王學(xué)廉,李向忠.  中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 2001(01)



本文編號：2971420