研究目的:胸腺瘤是最常見的前縱隔腫瘤,常合并重癥肌無力（MG）等多種自身免疫性疾病,但胸腺瘤引起MG的發(fā)病機(jī)制尚不完全清晰。目前的研究認(rèn)為,Th17細(xì)胞及Treg細(xì)胞在誘導(dǎo)中樞及外周免疫耐受中起著重要的作用,Th17與Treg表達(dá)失衡也是近年來包括MG在內(nèi)的很多自身免疫性疾病的研究熱點。所以本研究擬通過對合并或不合并MG的胸腺瘤患者外周血及胸腺瘤組織的實驗,證明合并MG的胸腺瘤患者外周血及胸腺瘤組織中存在Th17/Treg比例失衡,同時外周血中存在IL-6/TGF-β比例升高,胸腺瘤組織中存在RORγt mRNA和蛋白的表達(dá)升高,Foxp3 mRNA和蛋白的表達(dá)降低,通過體外實驗證明胸腺瘤細(xì)胞系可以改變健康人淋巴細(xì)胞中Th17、Treg亞群比例,其機(jī)制是胸腺瘤細(xì)胞系可以分泌大量的IL-6、抑制TGF-β。希望我們的研究能夠進(jìn)一步確立胸腺瘤中Th17/Treg表達(dá)失衡與重癥肌無力的發(fā)病關(guān)系及可能的機(jī)制。研究方法:（1）單純胸腺瘤、胸腺瘤合并MG患者各30例,分析臨床資料及免疫檢測指標(biāo),手術(shù)前抽取外周血15ml,Ficoll密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞,經(jīng)刺激、破膜后,流式細(xì)胞儀檢測... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋方法

天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文 一、外周血中 Th17、Treg 細(xì)胞的表達(dá)血的 Treg 細(xì)胞的比例明顯低于 B2 和 B3 型胸腺瘤患者，其余各型胸腺瘤間差異均無明顯統(tǒng)計學(xué)意義。將 MG 組患者按照眼肌型重癥肌無力（OMG）及全身型重癥肌無力（GMG）分組，比較 Th17 細(xì)胞和 Treg 細(xì)胞的差異，結(jié)果表明，GMG患者中 Th17 細(xì)胞的比例較 OMG 患者明顯升高（3.48±2.04 VS 1.35±0.93），而Treg 細(xì)胞在兩組中無明顯差異（表 1.4，圖 1.5，1.6）。1.2.3 外周血中 IL-6 和 TGF-β表達(dá)水平IL-6 在 Tm 組和 MG 組中的表達(dá)水平分別為 20.32 ± 7.40 pg/ml 和 101.10 ±20.3 pg/m，MG 組明顯高于 Tm 組，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.01）；TGF-β在 Tm 組和 MG 組中的表達(dá)水平分別為 238.39 ±84.61 pg/ml 和 448.67 ±249.21pg/m，其差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.07）（圖 1.7）。 Tm 組及 MG 組 IL-6/TGF-β比例分別為 0.10±0.025 和 0.23 ±0.050，MG 組明顯高于 Tm 組，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）（圖 1.8）。

圖 1.3 Tm 組與 MG 組 Treg 細(xì)胞流式細(xì)胞散點圖C：Tm 組患者 Treg 細(xì)胞流式細(xì)胞散點圖；D：MG 組患者 Treg 細(xì)胞流式細(xì)胞散點圖。C、D 圖中，在從左到右的三個圖中，第一幅圖篩選出總淋巴細(xì)胞，即 CD3+T淋巴細(xì)胞；第二幅圖設(shè)門，篩選出輔助 T 細(xì)胞，即 CD3+CD4+ T 淋巴細(xì)胞；第三幅圖篩選出 Treg 細(xì)胞（Q2 象限），即 CD3+CD4+CD25+Foxp3+ T 淋巴細(xì)胞。表 1.4 Th17 和 Treg 細(xì)胞在胸腺瘤不同 WHO 分型及 MG 不同分型中的比例WHO 分型 Th17 細(xì)胞比例（%） P 值 Treg 細(xì)胞比例（%） P 值A(chǔ) 3.42±2.290.323.60±1.76*#0.90AB 3.53±2.23 4.27±1.60B1 4.18±3.26 3.92±1.46B2 1.90±1.01 5.48±2.65*B3 2.23±1.67 5.62±3.43#MG 分型OMG（13 例） 1.35±0.934.69±2.96

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]干細(xì)胞共培養(yǎng)技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 詹秀琴,姜澤群.  中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報. 2014(08)
[2]人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞與肝細(xì)胞共培養(yǎng)可分化為肝樣細(xì)胞[J]. 李華,文峰,漆仲春,周進(jìn)軍,朱亞杰,程朋,魏東,蘇曉妹,譚勇,彭晶晶,羅巧麗,李東,張濤.  中國組織工程研究. 2013(32)



本文編號：2969008