目的研究miR-186通過負(fù)調(diào)控Smad6對人膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響。方法 qRTPCR檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞及膠質(zhì)瘤細(xì)胞中miR-186和Smad6的表達(dá),Western blot檢測Smad6蛋白的表達(dá)水平;細(xì)胞分四組:空白對照組（U251）、模擬物組（miR-186 mimics）、質(zhì)粒組（pc-Smad6）、共轉(zhuǎn)染組（miR-186 mimics+pcSmad6）。Western blot檢測各組細(xì)胞Smad6、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白E-cadherin和Vimentin的表達(dá)水平;劃痕實(shí)驗(yàn)檢測各組細(xì)胞的遷移情況。結(jié)果與正常星形膠質(zhì)細(xì)胞比,人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251中miR-186表達(dá)明顯降低,而Smad6表達(dá)明顯升高（P <0.05）。較對照組,Smad6蛋白在miR-186 mimics組細(xì)胞中的表達(dá)顯著下降,而在pcSmad6組細(xì)胞中的表達(dá)則明顯增加（P<0.05）; miR-186 mimics組細(xì)胞遷移能力顯著降低,而pc-Smad6組明顯增強(qiáng)（P<0.05）; miR-186 mimics組E-cadherin蛋白的表達(dá)顯著升高,而Vimentin... 

【文章來源】：中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2020,30(09)北大核心

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【部分圖文】：

RT-q PCR和Western blot檢測細(xì)胞中miR-186和Smad6的表達(dá)

膠質(zhì)瘤是起源于神經(jīng)外胚層的腫瘤，浸潤性生長、失控性增殖，惡性程度高，治療難度大、易復(fù)發(fā)，其機(jī)制尚不明確[5-6]。故從分子水平尋求治療靶點(diǎn)是目前膠質(zhì)瘤研究的重要方向之一。miRNA可通過調(diào)控某些重要基因的表達(dá)而影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程[7]。圖3 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測各組細(xì)胞的遷移情況

圖2 RT-q PCR和Western blot檢測各組細(xì)胞中Smad6的表達(dá)研究發(fā)現(xiàn)miR-186在多種腫瘤中表達(dá)異常，某些報(bào)道表明該基因在個(gè)別腫瘤中高表達(dá)，發(fā)揮促癌基因的功能[8-9]。但更多的研究報(bào)道顯示miR-186在較多腫瘤中發(fā)揮的為抑癌基因的作用，其中miR-186在胃癌中低表達(dá)，與該腫瘤的進(jìn)展與轉(zhuǎn)移有關(guān)[10]。miR-186在膽管癌和乳腺癌中低表達(dá)，可通過靶向調(diào)節(jié)Twist1的表達(dá)影響癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化[11-12]。Niinuma等[13]的研究表明miR-186的表達(dá)下調(diào)與胃腸道間質(zhì)瘤的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)有關(guān)。Ruan等[14]研究表明miR-186在肺癌中發(fā)揮抑癌作用，通過靶向SIRT6抑制肺癌進(jìn)展。另有研究表明該基因在膠質(zhì)瘤中也是低表達(dá)，發(fā)揮抑癌功能，但是具體的機(jī)制并不明確[15]。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MiR-145在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J]. 魏順英,王春梅,王烈宏.  實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2013(22)



本文編號：2961870