發(fā)布時(shí)間：2021-01-01 02:43

　　鳥苷酸結(jié)合蛋白家族（GBPs）是一類由干擾素-γ（IFN-γ）誘導(dǎo)的蛋白,目前國(guó)內(nèi)外尚無GBP3在腫瘤方面的相關(guān)研究報(bào)道。本論文首先對(duì)GBP3在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)進(jìn)行了分析和檢測(cè),接著研究了GBP3對(duì)膠質(zhì)瘤生物學(xué)功能的影響以及p62-ERK1/2通路在GBP3促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖中的作用,最后通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證了過表達(dá)GBP3促進(jìn)膠質(zhì)瘤增殖的作用,并對(duì)GBP3表達(dá)水平與患者生存期的關(guān)系進(jìn)行了分析。目的:（1）研究GBP3在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況及其生物學(xué)功能;（2）對(duì)GBP3通過p62-ERK1/2通路調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的分子機(jī)制進(jìn)行研究;（3）研究GBP3與膠質(zhì)瘤細(xì)胞成瘤能力及患者預(yù)后的關(guān)系。方法:（1）對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)信息進(jìn)行篩選,對(duì)比膠質(zhì)瘤和正常腦組織中GBP3表達(dá)情況;（2）收集正常腦組織、膠質(zhì)瘤標(biāo)本、星形膠質(zhì)細(xì)胞和膠質(zhì)瘤細(xì)胞系樣品,q PCR法和Western blot法分別檢測(cè)GBP3 m RNA和蛋白水平表達(dá);（3）構(gòu)建GBP3過表達(dá)和敲低表達(dá)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞株,并用Western blot法驗(yàn)證GBP3表達(dá)情況;（4）通過CCK-8實(shí)驗(yàn)和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)敲低和過表達(dá)GBP3對(duì)細(xì)胞增殖能力... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：89 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

GBP3與EGFmRNA表達(dá)呈正相關(guān)，GBP3可由EGF誘導(dǎo)表達(dá)上調(diào)

（C-D）GBP1 和 EGF 在膠質(zhì)瘤和 GBM 中 mRNA 表達(dá)相關(guān)性，數(shù)據(jù)來embrandt 和 TCGA 數(shù)據(jù)庫(kù)。（ E ）用含濃度為 100 ng/L EGF 的培養(yǎng)基培178-wtEGFR 和 U373-wtEGFR 膠質(zhì)瘤細(xì)胞，通過 qPCR 法檢測(cè) GBP3 mRNA 表達(dá)照組加相同體積 PBS。（Pearson r<0.2 時(shí)無相關(guān)性，0.2-0.4 低度相關(guān)，0.4-0.6 中關(guān)，0.6-0.8 強(qiáng)相關(guān)，>0.8 代表極強(qiáng)相關(guān)。）2. 數(shù)據(jù)庫(kù)結(jié)果提示 GBP3 在膠質(zhì)瘤中 mRNA 高表達(dá)首先，我們分析了 Rembrandt 和 TCGA 兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)。Rembrandt 數(shù)據(jù)庫(kù)將膠質(zhì)為星形細(xì)胞瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤三種類型。其中，（圖 2A）顯示細(xì)胞瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（GBM）中的 GBP3 表達(dá)在 mRNA 水平上和正常腦組normal）相比升高且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01, P<0.001）。而 TCGA 數(shù)據(jù)庫(kù)則根據(jù)表達(dá)不同將 GBM 分為 classical, mesenchymal, neural 和 proneural 四種類型，它們BP3 表達(dá)都高于正常腦組織，（圖 2B）提示 mesenchymal, neural 的 GBP3 表達(dá)較腦組織表達(dá)升高具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01, P< 0.01）。

GBP3 在膠質(zhì)瘤中的生物學(xué)功能及其機(jī)制研究 第一部分 GBP3 在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及生物學(xué)功檢測(cè)到GBP3。同樣，我們對(duì)收集的三例正常腦組織和28例膠質(zhì)瘤樣本中GBP3 mRN表達(dá)水平進(jìn)行了檢測(cè)。如（圖 3B），雖然檢測(cè)結(jié)果未有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（可能因樣本量較少且個(gè)別樣本表達(dá)差異較大引起），但是可以發(fā)現(xiàn) GBP3 在膠質(zhì)瘤中表達(dá)約為正常腦組織的兩倍。（圖 3C）結(jié)果提示在收集的膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中，有 55.6%（5/9 個(gè)）高表達(dá) GBP3 蛋白，人腦正常星形膠質(zhì)細(xì)胞 GBP3 表達(dá)較低。


本文編號(hào)：2950801