發(fā)布時間：2020-12-13 13:11

　　第一部分CAPS調(diào)控膠質(zhì)瘤干細(xì)胞自我更新的作用及分子機(jī)制研究背景:膠質(zhì)瘤（glioma）是最常見的顱內(nèi)惡性腫瘤,其病人約占所有惡性腦腫瘤病人的80%。雖然目前針對膠質(zhì)瘤的治療手段在不斷進(jìn)步,但患者的最終轉(zhuǎn)歸仍不理想,究其原因是對膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的細(xì)胞和分子機(jī)制的認(rèn)識尚不深入。腫瘤干細(xì)胞是一群具有自我更新能力并能分化形成異質(zhì)性腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞。目前研究認(rèn)為,腫瘤干細(xì)胞是始動腫瘤發(fā)生,促進(jìn)腫瘤演進(jìn),導(dǎo)致腫瘤治療抵抗及惡性轉(zhuǎn)歸的基礎(chǔ)。因此,靶向腫瘤干細(xì)胞的研究有可能成為未來預(yù)防和治療腫瘤的關(guān)鍵所在。我們前期的工作表明,鈣磷蛋白（calcyphosine,CAPS）在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（gliomastem cells,GSCs）中的表達(dá)顯著高于貼壁細(xì)胞。CAPS蛋白是包含有4個EF-hand模序的鈣離子結(jié)合蛋白,該蛋白是PIP3信號通路（鈣離子激活相關(guān)的通路）與cAMP通路的交點,這2條通路是調(diào)控細(xì)胞增殖與分化最主要的通路。然而目前CAPS蛋白在腫瘤細(xì)胞中的作用,尤其是在干細(xì)胞中的作用尚不明確。因此,本課題旨在闡明CAPS在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)及其臨床意義,并探討其對膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（glioma stem... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖0爭a山“V

?ＷＨＯ?ｇｒａｄｅ?Ｍｌ?ＩＩＩ?ＩＶ?ＷＨＯ?ｇｒａｄｅ?ＩＩ?ＩＩＩ?ＩＶ??圖１－１?Ｃ４尸■ＳｍＲＮＡ在膠質(zhì)瘤及正常腦組織中的表達(dá)??Ａ－Ｃ．?ＴＣＧＡ、ＲＥＭＢＲＡＮＤＴ和ＣＧＧＡ數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)表明，。ＩＰＳｍＲＮＡ在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)??均顯著高于正常腦組織；??Ｄ－Ｆ．ＴＣＧＡ、ＲＥＭＢＲＡＮＤＴ和ＣＧＧＡ數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)表明，Ｃ４Ｐ５ｍＲＮＡ的表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤級??別呈正相關(guān)。＊，尸＜０．０５；?＊＊，?／＞＜０．０１；?＊＊＊，?／？＜０．００１〇??２．２．３?Ｃ＾／＾ｍＲＮＡ的表達(dá)與膠質(zhì)瘤患者預(yù)后的關(guān)系??根據(jù)Ｃ４／＾ｍＲＮＡ的表達(dá)水平，將膠質(zhì)瘤標(biāo)本劃分為高表達(dá)組（Ｃ４／＾ｈｉｇｈ）??和Ｃ４ＰＳ低表達(dá)組（Ｃ兒ＰＳ｜ＱＷ），并比較兩組患者間預(yù)后的差別。ＴＣＧＡ、ＲＥＭＢＲＡＮＤＴ??和ＣＧＧＡ數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)均表明，Ｃ４／＾ｈｌｇｈ組患者的預(yù)后明顯較Ｃ４／＾°ｗ組的患者差??（／Ｋ０．００１）（圖１－２Ａ－Ｃ）。在ＴＣＧＡ數(shù)據(jù)庫中分析患者的無瘤生存期，我們還發(fā)現(xiàn)??Ｃ＾Ｓｈｌｇｈ組膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)的幾率明顯高于Ｃ４／＾°ｗ組膠質(zhì)瘤患者（／７＝０．０１９）（圖??１－２Ｄ）。相應(yīng)的

ＧＳＣｓ的方法，為后續(xù)研究奠定了堅實的基礎(chǔ)［４３Ｌ本實驗通過該方法分離／富集了人膠??質(zhì)瘤細(xì)胞株Ｕ２５１及Ｕ８７，膠質(zhì)瘤原代細(xì)胞ＧＢＭ－１中的ＧＳＣｓ，成功富集ＣＤ１３３陽性??的膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（圖２－１）。??Ａ?＾ｈＨｏｅｃｈｓ＾＾?＾ＩＶＩｅｒａ＾＾＾??眉■■國??欄■■■??圖２－１無血清成球培養(yǎng)法富集ＣＤ１３３陽性的腫瘤干細(xì)胞??Ａ．?ＧＢＭ－１細(xì)胞通過無血清成球培養(yǎng)法獲得腫瘤干細(xì)胞球的光學(xué)顯微鏡下及ＣＤ１３３免疫熒光染色圖片；??Ｂ．?Ｕ２５１細(xì)胞通過無血清成球培養(yǎng)法獲得腫瘤干細(xì)胞球的光學(xué)顯微鏡下及ＣＤ１３３免疫熒光染色圖片；??Ｃ．?Ｕ８７細(xì)胞通過無血清成球培養(yǎng)法獲得腫瘤干細(xì)胞球的光學(xué)顯微鏡下及ＣＤ１３３免疫熒光染色圖片。??在成功富集Ｕ２５１、Ｕ８７和ＧＢＭ－１中的ＧＳＣｓ后，我們利用實時熒光定量ＰＣＲ及??ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ法檢測比較了單層貼壁細(xì)胞和成球細(xì)胞中ＣＡＰＳ的表達(dá)差異。同時我??３６??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國2010年惡性腫瘤發(fā)病與死亡[J]. 陳萬青,張思維,曾紅梅,鄭榮壽,鄒小農(nóng),趙平,吳良有,李光琳,赫捷.  中國腫瘤. 2014(01)
[2]Id2 regulates the proliferation of squamous cell carcinoma in vitro via the NF-κB/Cyclin D1 pathway[J]. Yuki Hamajima,Frank G. Ondrey.  癌癥. 2012(09)
[3]日本血吸蟲鈣磷蛋白基因的克隆、表達(dá)及其進(jìn)化分析[J]. 鞠川,彭建新,徐斌,王瑋,馮正,胡薇.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2006(05)

博士論文
[1]日本血吸蟲性別差異表達(dá)基因的篩選及新基因的克隆分析[D]. 夏艷勛.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號：2914591