半乳凝素-9對膠質(zhì)瘤細胞增殖和遷移能力的影響及其機制研究
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【摘要】:背景:半乳凝素-9 (galectin-9),是一種起源于T淋巴細胞的具有嗜酸性粒細胞趨化作用的因子,最早在活化的T淋巴細胞中發(fā)現(xiàn),隨后在多種正常人體組織中發(fā)現(xiàn)galectin-9的存在,具有多種生物學功能如細胞聚集、粘附、增殖、凋亡及炎性調(diào)節(jié),并且首次在霍奇金淋巴瘤組織中發(fā)現(xiàn)其存在,至今已在多種腫瘤組織如乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等發(fā)現(xiàn)galectin-9的表達并在多種不同方面影響腫瘤生物學行為。Galecin-9在膠質(zhì)瘤中的是否存在及其作用報道少見,我們研究其在膠質(zhì)瘤中可能的作用。目的:研究外源性半乳凝素-9(galectin-9)對膠質(zhì)瘤細胞系U251增殖和遷移能力的影響,在galectin-9作用同時觀察乳糖的加入對該作用的影響,并探討其作用機制。方法:利用實時定量PCR方法檢測膠質(zhì)瘤細胞系中g(shù)alectin-9的表達情況;選取代表性細胞系U251進行下一步實驗,在U251細胞培養(yǎng)基中加入不同濃度(1、4、8、16ug/ml)外源性galectin-9蛋白處理一定時間(12、24、36h)后,使用細胞計數(shù)試劑盒CCK-8檢測膠質(zhì)瘤細胞增殖能力的變化,使用transwell實驗檢測膠質(zhì)瘤細胞遷移能力的變化;另外在galectin-9處理細胞的同時加入其競爭性抑制劑乳糖,再使用同樣方法檢測增殖和遷移能力,觀察乳糖能否影響galectin-9對膠質(zhì)瘤細胞系的作用。結(jié)果:PCR結(jié)果顯示4種膠質(zhì)瘤細胞系均極低水平表達galectin-9,其中U251細胞系幾乎不表達galectin-9。在增殖試驗中,被高濃度galectin-9 (8、16ug/ml)處理組的細胞增殖率較空白對照組明顯降低(P0.001);U251細胞在同一濃度galectin-9處理時,隨著時間延長,不同時間點的細胞增殖率逐漸降低(P0.01);在相同濃度galectin-9處理的基礎(chǔ)上,添加乳糖組細胞增殖率相對于未加乳糖組增高(P0.05)。在遷移試驗中,外源性galectin-9刺激U251細胞一定時間后,統(tǒng)計穿至膜下的細胞數(shù)較對照組明顯減少(P0.01),在galectin-9處理的同時,添加乳糖組穿至膜下的細胞數(shù)較未加乳糖組增多(P0.05)。結(jié)論:外源性半乳凝素-9可明顯抑制膠質(zhì)瘤細胞的增殖,并且具有濃度和時間依賴性,同時能夠有效抑制膠質(zhì)瘤細胞遷移能力。Galectin-9對膠質(zhì)瘤的作用是依賴于乳糖識別區(qū)域起作用的,該作用可被抑制劑乳糖抵消。綜合galectin-9對膠質(zhì)瘤細胞系的生物學行為的影響,為治療膠質(zhì)瘤提供了新的方向。
【關(guān)鍵詞】:半乳凝素-9 膠質(zhì)瘤 增殖 遷移
【學位授予單位】:山東大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R739.41
【目錄】:
- 中文摘要6-8
- ABSTRACT8-10
- 符號說明10-11
- 前言11-13
- 材料與方法13-20
- 結(jié)果20-29
- 討論29-35
- 結(jié)論35-36
- 參考文獻36-40
- 綜述40-51
- 參考文獻47-51
- 致謝51-52
- 攻讀學位期間發(fā)表的論文52-53
- 附件53
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,本文編號:279114
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