發(fā)布時(shí)間：2020-07-13 14:33

【摘要】：目的:神經(jīng)母細(xì)胞瘤(neuroblastoma,NB)具有早期易轉(zhuǎn)移的特性,是影響兒童早期腎上腺髓質(zhì)及椎旁交感神經(jīng)節(jié)正常發(fā)展的胚胎性惡性腫瘤。根據(jù)以往的綜述及研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)人類神經(jīng)母細(xì)胞瘤的部分分子生物學(xué)特性,主要覆蓋了異常的基因組研究和轉(zhuǎn)錄組水平研究。神經(jīng)母細(xì)胞瘤幾乎可以發(fā)生在交感神經(jīng)系統(tǒng)的任何地方,從近期公布的國(guó)際大型患者隊(duì)列研究的數(shù)據(jù)表明,神經(jīng)母細(xì)胞瘤常發(fā)生在腎上腺(47%)、腹腔/腹膜后區(qū)域(24%)、頸部(3%)、胸部(15%)、骨盆(3%)和其他地區(qū)(8%)。人參皂苷Rh2(ginsenoside Rh2)作為人參中的關(guān)鍵活性成分,近年來(lái)已引起廣泛重視,現(xiàn)已研究發(fā)現(xiàn)其在人類多種腫瘤中均具有較強(qiáng)的抑制腫瘤活性。目前國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rh2在多種腫瘤細(xì)胞中抑制腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、侵襲并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡以及其在腫瘤微環(huán)境中的作用。人參皂苷Rh2在神經(jīng)母細(xì)胞瘤的應(yīng)用尚未見報(bào)道。因此本文研究人參皂苷Rh2(ginsenoside Rh2)對(duì)神經(jīng)母細(xì)胞瘤的增殖、凋亡、遷移及侵襲的影響。研究方法:用(0、5、10、20、40、80μg/ml)濃度人參皂苷Rh2來(lái)干預(yù)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系SH-SY5Y。細(xì)胞增殖測(cè)試實(shí)驗(yàn)采用Cell counting kit-8(CCK-8)法檢測(cè)人參皂苷Rh2作用神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y增殖的影響;細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)采用劃痕試驗(yàn)檢測(cè)、Transwell小室模型檢測(cè)人參皂苷Rh2處理神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y侵襲能力;蛋白質(zhì)印跡法(Western-bolt,WB)試驗(yàn)檢測(cè)神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)、Bax、Bcl-2、β-catenin蛋白的表達(dá)。結(jié)果:人參皂苷Rh2可以時(shí)間-濃度依賴性地抑制神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞系增殖。在CCK-8結(jié)果中,24小時(shí)表現(xiàn)為輕微細(xì)胞毒性,48小時(shí)表現(xiàn)為顯著毒性;人參皂苷Rh2可以抑制神經(jīng)母細(xì)胞瘤遷移及侵襲;蛋白質(zhì)印跡法顯示人參皂苷Rh2降低遷移相關(guān)蛋白MMP2的表達(dá),上調(diào)了促凋亡蛋白Bax的表達(dá)水平同時(shí)也降低了抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)。人參皂苷Rh2處理的神經(jīng)母細(xì)胞瘤內(nèi)β-catenin水平降低。結(jié)論:1.人參皂苷Rh2可以在體外抑制神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y的增殖,誘導(dǎo)其凋亡抑制其遷移及侵襲;2.人參皂苷Rh2下調(diào)MMP2蛋白抑制腫瘤細(xì)胞遷移及侵襲,通過(guò)wnt通路中β-catenin蛋白抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R739.4
【圖文】：

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3 結(jié)果 Rh2 體外抑制神經(jīng)母細(xì)胞瘤 SH-SY5Y 增殖：圖 1 所示，人參皂苷 Rh2 可以時(shí)間-濃度依賴性地抑Y 細(xì)胞體外增殖，在 CCK-8 實(shí)驗(yàn)中，我們選擇 24、48 對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤 SH-SY5Y 細(xì)胞的時(shí)間點(diǎn)，在 24 小時(shí)母細(xì)胞瘤 SH-SY5Y 細(xì)胞的 IC50為 504.4μg，表現(xiàn)為輕皂苷 Rh2 對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤 SH-SY5Y 細(xì)胞的 IC50為 3

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3.2 人參皂苷 Rh2 體外抑制神經(jīng)母細(xì)胞瘤 SH-SY5Y 遷移結(jié)果顯示：人參皂苷 Rh2 可以時(shí)間-濃度依賴性地抑制人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y 細(xì)胞的體外遷移。遷移比率以[（初始距離-24 小時(shí)后距離）/初始距離]*100%表示，對(duì)照組為 83.54%、實(shí)驗(yàn)組分別為 79.47%、74.91%、61.58%、42.97%、30.44%。圖2顯示，人參皂苷Rh2具有抑制人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞體外遷移的能力。

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3.3 人參皂苷 Rh2 體外抑制神經(jīng)母細(xì)胞瘤 SH-SY5Y 侵襲結(jié)果顯示：在 Transwell 小室侵襲模型試驗(yàn)中，人參皂苷 Rh2 抑制人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 SH-SY5Y 的體外侵襲能力。侵襲能力的判斷以穿過(guò) Transwell 下室表面細(xì)胞數(shù)目表示，侵襲率為（實(shí)驗(yàn)組下室表面細(xì)胞/對(duì)照組下室表面細(xì)胞）*100%，實(shí)驗(yàn)組分別為 97.32%、82.22%、72.47%、61.95%、33.84%。圖 3 顯示在人參皂苷 Rh2干預(yù)后侵襲數(shù)目的變化。

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本文編號(hào)：2753586