【摘要】：目的:觀察針刺是否影響帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠miRNA-124表達(dá)水平;探討針刺是否通過調(diào)控miRNA-124表達(dá),抑制帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體α-synuclein蛋白聚集,從而改善帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠癥狀;探討針刺是否通過調(diào)控miRNA-124表達(dá),影響p-CREB、BDNF蛋白表達(dá)水平,通過miRNA-124/CREB/BDNF信號(hào)通路參與帕金森病發(fā)病機(jī)制。方法:建立轉(zhuǎn)SNCA*A53T基因帕金森病C57BL/6J小鼠模型,分為陰性對(duì)照組,模型組,針刺組,拮抗劑組四組,針刺組在模型組的基礎(chǔ)上予以針刺處理,拮抗劑組在模型組基礎(chǔ)上同時(shí)予以針刺及miRNA拮抗劑處理。運(yùn)用電針技術(shù),采用連續(xù)波,頻率2Hz,強(qiáng)度1m A,持續(xù)30分鐘,每天一次,治療2周。針刺穴位選“陽陵泉”、“太沖”二穴。采用懸掛、游泳等方法觀察針刺治療前后不同實(shí)驗(yàn)組小鼠行為學(xué)改變。采用RT-q PCR技術(shù)檢測(cè)各組小鼠紋狀體中miRNA-124表達(dá)情況。采用Western blot技術(shù)檢測(cè)各組小鼠紋狀體中α-synuclein、p-CREB、BDNF蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:(1)懸掛及游泳實(shí)驗(yàn)評(píng)分:針刺干預(yù)前,陰性對(duì)照組顯著高于模型組、針刺組及拮抗劑組(P㩳0.05),模型組、針刺組及拮抗劑組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。針刺干預(yù)后,針刺組及拮抗劑組較針刺干預(yù)前明顯改善(P㩳0.05),針刺組與拮抗劑組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。(2)各組小鼠紋狀體中miRNA-124表達(dá)情況:與陰性對(duì)照組相比,模型組小鼠紋狀體中miRNA-124表達(dá)量顯著下調(diào)(P㩳0.05)。與模型組比較,針刺組小鼠紋狀體中miRNA-124表達(dá)增加(P㩳0.05),該表達(dá)增加作用可被miRNA-124拮抗劑阻斷。(3)各組小鼠紋狀體中α-synuclein表達(dá)情況:與陰性對(duì)照組相比,模型組小鼠紋狀體中α-synuclein表達(dá)明顯增加(P㩳0.05);與模型組相比,針刺組及拮抗劑組小鼠紋狀體中α-synuclein表達(dá)下調(diào)(P㩳0.05),但針刺組較拮抗劑組表達(dá)下調(diào)更顯著(P㩳0.05)。(4)各組小鼠紋狀體中p-CREB、BDNF表達(dá)情況:與陰性對(duì)照組相比,模型組小鼠紋狀體中p-CREB、BDNF均表達(dá)下調(diào)(P㩳0.05);與模型組相比,針刺組小鼠紋狀體中p-CREB、BDNF表達(dá)增加,(P㩳0.05),拮抗劑組小鼠紋狀體中p-CREB、BDNF表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:(1)針刺可能通過上調(diào)miRNA-124表達(dá),減少帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體中α-synuclein蛋白的聚集,從而改善帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠行為,但其作用機(jī)制可能是多重性的。(2)針刺可以上調(diào)p-CREB、BDNF蛋白的表達(dá)水平,miRNA-124/CREB/BDNF信號(hào)通路可能參與帕金森病發(fā)病機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R742.5
【圖文】：

3.2 帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)情況為探討 miRNA-124 在帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠模型大腦紋狀體中表達(dá)情況及不同干預(yù)措施處理后小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)有無差異，我們采用 RT-qPCR 技術(shù)進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)，以 U6 為內(nèi)參基因，采用 2-ΔΔCt計(jì)算各組小鼠紋狀體中 miRNA-124的相對(duì)表達(dá)量，同時(shí)將陰性對(duì)照組 miRNA-124 表達(dá)量校正為 1。對(duì)多個(gè)獨(dú)立樣本各均數(shù)之間的比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA）,結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與陰性對(duì)照組相比，模型組小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)量（0.35±0.07）顯著下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P㩳0.05 ）；與模型組比較，針刺組小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)增加（0.82±0.13），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P㩳0.05 ）,該表達(dá)增加作用可被 miRNA-124 拮抗劑阻斷（0.47±0.09）。（詳見表 3.2、圖 3.5）

3.2 帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)情況為探討 miRNA-124 在帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠模型大腦紋狀體中表達(dá)情況及不同干預(yù)措施處理后小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)有無差異，我們采用 RT-qPCR 技術(shù)進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)，以 U6 為內(nèi)參基因，采用 2-ΔΔCt計(jì)算各組小鼠紋狀體中 miRNA-124的相對(duì)表達(dá)量，同時(shí)將陰性對(duì)照組 miRNA-124 表達(dá)量校正為 1。對(duì)多個(gè)獨(dú)立樣本各均數(shù)之間的比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA）,結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與陰性對(duì)照組相比，模型組小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)量（0.35±0.07）顯著下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P㩳0.05 ）；與模型組比較，針刺組小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)增加（0.82±0.13），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P㩳0.05 ）,該表達(dá)增加作用可被 miRNA-124 拮抗劑阻斷（0.47±0.09）。（詳見表 3.2、圖 3.5）

3.2 帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)情況為探討 miRNA-124 在帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠模型大腦紋狀體中表達(dá)情況及不同干預(yù)措施處理后小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)有無差異，我們采用 RT-qPCR 技術(shù)進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)，以 U6 為內(nèi)參基因，采用 2-ΔΔCt計(jì)算各組小鼠紋狀體中 miRNA-124的相對(duì)表達(dá)量，同時(shí)將陰性對(duì)照組 miRNA-124 表達(dá)量校正為 1。對(duì)多個(gè)獨(dú)立樣本各均數(shù)之間的比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA）,結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與陰性對(duì)照組相比，模型組小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)量（0.35±0.07）顯著下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P㩳0.05 ）；與模型組比較，針刺組小鼠紋狀體中 miRNA-124 表達(dá)增加（0.82±0.13），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P㩳0.05 ）,該表達(dá)增加作用可被 miRNA-124 拮抗劑阻斷（0.47±0.09）。（詳見表 3.2、圖 3.5）

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳清;趙楊;;炎性反應(yīng)與帕金森病的研究進(jìn)展[J];中國神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志;2015年06期

2 鄭仕平;韓為;儲(chǔ)浩然;王穎;張玲;朱玲玲;張國慶;崔倩倩;;通督調(diào)神針灸預(yù)處理對(duì)腦缺血再灌注大鼠相關(guān)微小RNA調(diào)控機(jī)制的研究[J];針刺研究;2015年02期

3 Q們

本文編號(hào)：2752202