【摘要】：目的:神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)病機制尚未完全清楚,并缺乏有效的治療手段。外側韁核(LHb)是一個“反獎賞”核團,疼痛慢性化是一個獎勵缺失的過程,但LHb在神經(jīng)病理性疼痛中發(fā)揮的作用尚不清楚。本實驗旨在研究LHb谷氨酸能神經(jīng)元在神經(jīng)病理性疼痛中的作用,為LHb作為治療神經(jīng)病理性疼痛的靶點提供實驗依據(jù)。方法與結果:[1]在體神經(jīng)元放電記錄發(fā)現(xiàn),在坐骨神經(jīng)部分損傷(PSL)和眶下神經(jīng)部分損傷(p-IONX)誘導的軀體和口面部神經(jīng)病理性疼痛模型小鼠(C57BL/6J)中,LHb谷氨酸能神經(jīng)元自發(fā)放電頻率和簇狀(burst)放電比假手術組小鼠呈顯著性增加。PSL模型組小鼠的外周傷害性刺激激活的神經(jīng)元百分比明顯高于假手術組。[2]將pAAV-CaMKIIα-eArchT-eYFP病毒注入C57BL/6J小鼠LHb,用黃光特異性抑制LHb谷氨酸能神經(jīng)元,不影響假手術組小鼠的機械感受閾值,但可以顯著性增加PSL以及p-IONX小鼠雙側后爪機械痛閾值。在條件性位置偏愛實驗中,假手術組和手術組小鼠在給光側箱子的時間都增加,表現(xiàn)出對給光側的偏愛。[3]將 pAAV-CaMKIIα-hChR2(H 134R)-eYFP 病毒注入 C57BL/6J 小鼠LHb,用藍光特異性激活LHb谷氨酸能神經(jīng)元,對假手術組和PSL小鼠后爪的機械痛閾值無影響。但在條件性位置偏愛實驗中,假手術組小鼠在給光側箱子的時間減少,表現(xiàn)出對給光側箱子的厭惡,而在模型組動物沒有誘導出條件性位置偏愛。[4]將 pAAV-CaMKIIα-hM4Di-mCherry注入 C57BL/6J 小鼠右側 LHb,給予CNO(1 mg/kg)抑制LHb谷氨酸能神經(jīng)元,能抬高p-IONX小鼠口面部及左側后爪機械痛閾值。[5]在LHb內(nèi)植入電極,在PSL術后第1天到第7天給予LHb 1 Hz低頻電刺激,能顯著性地增加左側后爪機械痛閾值。結論:生理條件下,LHb谷氨酸能神經(jīng)元能感知痛覺信息的傳入,參與編碼痛覺的厭惡情緒成分,而不參與編碼感覺成分。神經(jīng)病理性疼痛時,LHb谷氨酸能神經(jīng)元活性增加,抑制其活性能減輕脊神經(jīng)損傷誘發(fā)的軀體部位和眶下神經(jīng)部分切斷誘發(fā)的口面部及擴散性神經(jīng)病理性機械痛覺超敏。研究表明,LHb在神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生中發(fā)揮重要作用,LHb可以作為治療神經(jīng)病理性疼痛的一個潛在治療靶點。
【圖文】：

光遺傳學方法，特異性激活ＬＨｂ谷氨酸能神經(jīng)元，觀察對神經(jīng)病理性疼痛的影響。逡逑我們在邋Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ邋小鼠右側邋ＬＨｂ邋注射邋ｐＡＡＶ－ＣａＭＫＩＩｏｔ－ｈＣｈＲ２（Ｈ１３４Ｒ）－ｅＹＦＰ邋病毒逡逑（圖３Ａ），使ＬＨｂ谷氨酸能神經(jīng)元表達ＣｈＲ２。單細胞神經(jīng)元放電記錄發(fā)現(xiàn)，２０逡逑Ｈｚ的藍光能夠激活ＬＨｂ的谷氨酸能神經(jīng)元（圖３Ｂ），，證明ＣｈＲ２功能性表達在逡逑ＬＨｂ的谷氨酸能神經(jīng)元上。逡逑疼痛行為學測試發(fā)現(xiàn)，與不給光照組相比，不論是手術前還是手術后，光照均逡逑不改變小鼠兩側后爪的機械痛閾值（圖３Ｃ和Ｄ）。在條件性位置偏愛實驗中，ｓｈａｍ逡逑組小鼠在給光側停留時間減少（Ｐ＜０．０５），表現(xiàn)出對給光側的厭惡，而光照不改變逡逑ＰＳＬ手術組對兩側箱子的偏愛（圖３Ｅ）。以上結果提示，選擇性激活ＬＨｂ谷氨酸逡逑能神經(jīng)元不影響小鼠的機械痛閾值，但在ｓｈａｍ組小鼠中引起厭惡情緒。逡逑１９逡逑

手術前，對照組與光照組小鼠左右側后爪的機械痛閾值無顯著差異。在術后第逡逑７、１１和１４天，光照組的機械痛閾值均顯著高于對照組（Ｐ＜０．０５，邋０．０１或０．０００１，逡逑圖６Ｃ和Ｄ）。在左側后爪，術后第７天的機械痛閾值對照組為０．２２５±０．０７２ｇ（ｎ＝ｌｌ），逡逑光照組為邋０．７５８±０．１８０ｇ邋（ｎ＝１２）；術后第邋１１邋天對照組為邋０．２０９±０．０７０ｇ邋（ｎ＝ｌｌ），光逡逑照組為邋０．６９４±０．１７２ｇ邋（ｎ＝１２）；術后第邋１４邋天對照俎為邋０．１２３土０．０４２ｇ邋（ｎ＝ｌｌ），光照逡逑組為０．７１８±０．１１０ｇ邋（ｎ＝１２）（圖６Ｃ）。在右側后爪，術后第７天的機械痛閾值對照逡逑組為邋０．２３６±０．０７０ｇ邋（ｎ＝ｌｌ），光照組為邋０．７７０±０．１４７ｇ邋（ｎ＝１２）；手術后第邋１１邋天對照逡逑組為邋０．１６５±０．０５７ｇ邋（ｎ＝ｌｌ），光照組為邋０．６７９±０．１４４ｇ邋（ｎ＝１２）；手術后第邋１４邋天對照逡逑組為０．１３８±０．０３９邋ｇ（ｎ＝ｌｌ），光照組為０．３８７±０．０６７邋ｇ（ｎ＝１２）。以上結果表明，選逡逑擇性抑制ＬＨｂ谷氨酸能神經(jīng)元能減輕ｐ－ＩＯＮＸ后同側和對側的擴散性機械痛覺超逡逑敏。逡逑２５逡逑
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R741.02

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 周瑞;;如何鑒定谷氨酸能神經(jīng)元[J];中國比較醫(yī)學雜志;2017年05期

2 王芳;張舉恩;袁媛;陳明;高子龍;詹姝璐;范承玉;孫文智;胡霽;;腹側蒼白球的谷氨酸能神經(jīng)元處理顯著性信息（英文）[J];Science Bulletin;2020年05期

3 戴維國,許忠新,宋永紅;大鼠腦缺血早期谷氨酸能神經(jīng)元的形態(tài)變化研究(英文)[J];中國臨床康復;2004年22期

4 趙世毅;王颯;董海龍;;病毒示蹤法研究小鼠丘腦中央內(nèi)側核內(nèi)谷氨酸能神經(jīng)元的傳出和傳入纖維聯(lián)系[J];神經(jīng)解剖學雜志;2019年05期

5 楊佳佳;楊卓;;從皮層開始發(fā)育到成熟其上的GABA能神經(jīng)元的比例[J];天津醫(yī)藥;2013年08期

6 郭娟;郭永馨;李慧明;王丹;李文;冉明梓;郝海智;董海龍;;抑制下丘腦外側區(qū)谷氨酸能神經(jīng)元對小鼠焦慮樣行為的影響[J];神經(jīng)解剖學雜志;2018年03期

7 唐敏峰;丁炯;張璐;李雷;韓群穎;;迷走神經(jīng)刺激激活丘腦和下丘腦室旁核的谷氨酸能神經(jīng)元的探討[J];南京醫(yī)科大學學報(自然科學版);2006年02期

8 徐蘭舉;楊卓;;大鼠大腦中動脈阻塞模型中Zn~(2+)囊泡的釋放[J];天津醫(yī)藥;2007年07期

9 趙文君;周凱翔;張晨;董玉琳;;小鼠藍斑內(nèi)去甲腎上腺能神經(jīng)元與中腦導水管周圍灰質腹外側區(qū)谷氨酸能神經(jīng)元的聯(lián)系[J];神經(jīng)解剖學雜志;2018年05期

10 李鳴佳;;鋅與NMDA受體NR2A亞基的結合可以緩解疼痛[J];中國疼痛醫(yī)學雜志;2012年04期

相關會議論文 前6條

1 許奇;王典茹;董輝;陳理;曲衛(wèi)敏;黃志力;;臂旁核谷氨酸能神經(jīng)元通過底丘腦旁核和基底前腦調(diào)節(jié)大鼠覺醒行為[A];第七屆中國睡眠醫(yī)學論壇會議指南[C];2017年

2 李熳;朱賀;孟汪洋;劉露;向宏春;李洪萍;林立雪;胡雪菲;張虹;陳超;;vlPAG中GABA能和谷氨酸能神經(jīng)元參與大麻素CB1受體介導的電針鎮(zhèn)痛[A];新時代 新思維 新跨越 新發(fā)展——2019中國針灸學會年會暨40周年回顧論文集[C];2019年

3 田均;楊俊華;楊鴻斌;嚴雅萍;張寶榮;;興奮STn投射至GPe的谷氨酸能神經(jīng)元軸突末梢對小鼠運動行為的影響[A];2014年浙江省神經(jīng)病學學術年會論文匯編[C];2014年

4 田均;張寶榮;;興奮STn投射至GPe的谷氨酸能神經(jīng)元軸突末梢對小鼠運動行為的影響[A];中華醫(yī)學會第十七次全國神經(jīng)病學學術會議論文匯編（上）[C];2014年

5 徐兆發(fā);賈克;徐斌;賀安寧;李晶;鄧宇;張芳林;;地卓西平、牛磺酸和右美沙芬對錳致大鼠神經(jīng)毒性的影響[A];中國毒理學會第五次全國學術大會論文集[C];2009年

6 宋娟;高曉平;;丁香酚吸嗅對VD模型大鼠學習記憶功能改善和海馬區(qū)谷氨酸能神經(jīng)元的影響[A];中國康復醫(yī)學會腦血管病專業(yè)委員會換屆暨第十五次全國腦血管病康復學術年會、湖南省康復醫(yī)學會神經(jīng)康復專業(yè)委員會2012學術年會論文集[C];2012年

相關博士學位論文 前4條

1 程金波;運用光遺傳學技術探討下丘腦室旁核谷氨酸能神經(jīng)元對血壓調(diào)節(jié)作用的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2012年

2 周怡亭;光遺傳學特異性激活皮層谷氨酸能神經(jīng)元促進慢性缺血后白質修復作用的研究[D];浙江大學;2018年

3 葛順楠;兩型囊泡膜谷氨酸轉運體VGLUT在口面部感覺傳導路中的表達及其功能研究[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

4 徐愛萍;抑郁癥前額葉皮層神經(jīng)元結構和功能不協(xié)調(diào)的病理機制研究[D];中國科學技術大學;2016年

相關碩士學位論文 前10條

1 吳雨星;抑制外側韁核谷氨酸能神經(jīng)元減輕神經(jīng)病理性機械痛覺超敏[D];浙江大學;2019年

2 張文瑾;海馬CA1區(qū)谷氨酸能神經(jīng)元對齒狀回神經(jīng)干細胞的調(diào)控作用[D];鄭州大學;2018年

3 康賽;hiPSC來源神經(jīng)誘導模型的建立及其神經(jīng)生物學參數(shù)分析[D];暨南大學;2018年

4 沈亦雯;胚胎干細胞誘導分化為大腦皮質谷氨酸能神經(jīng)元的實驗研究[D];復旦大學;2014年

5 陳宋安;多學科方法鑒定海兔神經(jīng)環(huán)路中谷氨酸能神經(jīng)元及其功能[D];南京大學;2016年

6 王廣燕;糖皮質激素對杏仁核GABA能和谷氨酸能神經(jīng)元功能的影響及其機制研究[D];青島大學;2017年

7 趙欣;皮層谷氨酸能和GABA能神經(jīng)元可塑性與學習效率相關[D];蚌埠醫(yī)學院;2017年

8 劉玉龍;神經(jīng)可塑性機制與學習記憶能力跨代遺傳的相關性研究[D];蚌埠醫(yī)學院;2017年

9 劉雅慧;小鼠嗅皮層不同類神經(jīng)元功能可塑性在聯(lián)合式學習記憶中的作用[D];蚌埠醫(yī)學院;2014年

10 姚偉;興奮和抑制性神經(jīng)元的協(xié)調(diào)可塑性與學習記憶能力跨代的研究[D];蚌埠醫(yī)學院;2016年

本文編號：2652811