【摘要】：【研究背景與目的】帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者常并發(fā)認知功能障礙。目前,對于PD認知功能障礙無有效的藥物治療。硫化氫(Hydrogen sulfide,H_2S)是一種新發(fā)現(xiàn)的氣體信號分子,具有改善認知功能障礙的作用。有氧條件下的糖酵解被稱之為Warburg效應,對學習記憶具有重要的支持和調(diào)節(jié)作用。本研究將探討H_2S能否改善PD認知功能障礙,其機制是否涉及到調(diào)控海馬Warburg效應,以期為PD認知功能障礙的防治提供新思路�！痉椒ā�1.背部皮下注射魚藤酮(rotenone,ROT)建立PD大鼠模型;2.Y迷宮(Y-maze)試驗、新穎物體識別(novel object recognition,NOR)試驗和Morris水迷宮(Morris water maze,MWM)試驗檢測大鼠學習記憶能力;3.蛋白免疫印跡法(Western blot,WB)檢測Warburg效應相關蛋白己糖激酶II(Hexokinase II,HKII)、丙酮酸激酶M2(Pyruvate kinase M2,PKM2)、乳酸脫氫酶A(Lactate dehydrogenase A,LDHA)、丙酮酸脫氫酶激酶1(Pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK-1)以及丙酮酸脫氫酶(Pyruvate dehydrogenase,PDH)的表達;4.乳酸試劑盒檢測海馬組織乳酸的生成;【結果】1.H_2S拮抗ROT誘導的PD大鼠認知功能障礙Y迷宮試驗結果顯示,NaHS(H_2S供體,30,100μmol/kg,i.p.,4 w)能明顯上調(diào)ROT誘導的PD大鼠正確交替率;NOR試驗結果顯示,NaHS(30,100μmol/kg,i.p.,4 w)明顯提高ROT誘導的PD大鼠識別指數(shù);MWM試驗結果顯示,NaHS(30,100μmol/kg,i.p.,4 w)能有效縮短ROT誘導的PD大鼠在獲得性訓練期尋找平臺的潛伏期、增加其在探查期穿過平臺區(qū)域的次數(shù)和停留在目標象限時間百分比。上述實驗結果表明,H_2S可改善ROT誘導PD大鼠認知功能障礙。2.H_2S上調(diào)ROT誘導的PD大鼠海馬Warburg效應NaHS(30,100μmol/kg,i.p.,4 w)處理明顯上調(diào)ROT誘導的PD大鼠海馬Warburg效應相關蛋白HKII、PKM2、LDHA以及PDK-1的表達,下調(diào)PDH蛋白的表達,明顯增加ROT誘導的PD大鼠海馬乳酸的含量。以上結果表明H_2S減輕ROT對海馬Warburg效應的抑制作用。3.2-脫氧葡萄糖(2-deoxyglucose,2-DG)抑制H_2S對ROT誘導的PD大鼠海馬Warburg效應的上調(diào)作用側腦室注射2-DG(3μg/w,i.c.v.,3 w)明顯取消NaHS(100μmol/kg,i.p.,4 w)對ROT誘導的PD大鼠海馬Warburg效應相關蛋白HKII、PKM2、PDK-1和LDHA表達的上調(diào)作用,以及PDH蛋白表達的下調(diào)作用。此外,2-DG(3μg/w,i.c.v.,3 w)顯著減弱NaHS(100μmol/kg,i.p.,4 w)對ROT誘導的PD大鼠海馬乳酸含量的上調(diào)作用。這些結果表明,2-DG可抑制H_2S上調(diào)ROT誘導的PD大鼠海馬Warburg效應。4.抑制海馬Warburg效應可逆轉(zhuǎn)H_2S對ROT誘導的PD大鼠認知功能障礙的改善作用Y迷宮試驗結果顯示,2-DG(3μg/w,i.c.v.,3 w)抑制NaHS(100μmol/kg,i.p.,4 w)對ROT誘導的PD大鼠正確交替率的上調(diào)作用;NOR試驗結果顯示,2-DG(3μg/w,i.c.v.,3 w)顯著性降低NaHS(100μmol/kg,i.p.,4 w)對ROT病變大鼠識別指數(shù)的上調(diào)作用;MWM試驗結果顯示,2-DG(3μg/w,i.c.v.,3 w)明顯削弱NaHS(100μmol/kg,i.p.,4 w)對ROT誘導的PD大鼠在獲得性學習第五天找到平臺潛伏期的縮短作用,并逆轉(zhuǎn)NaHS(100μmol/kg,i.p.,4 w)增加ROT誘導的PD大鼠在探查期穿過逃逸平臺的次數(shù)以及在目標象限停留時間百分比的作用。上述實驗結果表明抑制海馬Warburg效應可取消H_2S對ROT誘導的PD大鼠認知功能障礙的拮抗作用。【結論】1.H_2S可拮抗魚藤酮誘導的PD大鼠認知功能障礙;2.海馬Warburg效應可介導H_2S對魚藤酮誘導的PD大鼠認知功能障礙的拮抗作用。
【圖文】：

圖 3.1 Y-迷宮試驗檢測 H2S 對魚藤酮誘導的 PD 大鼠認知功能障礙的影響Fig 3.1. Effect of H2S on the cognitive impairment of ROT-induced PD rats in Y-maze test.After pretreated with NaHS (30 and 100 μmol/kg, i.p.) for 1 w, SD rats were injected with ROT (2mg/kg, s.c.) for 5 w and NaHS for 3 w simultaneously. All rats were subjected to Y-maze test. The

圖 3.2 NOR 試驗檢測 H2S 對魚藤酮誘導的 PD 大鼠認知功能障礙的影響Fig 3.2. Effect of H2S on the cognitive impairment of ROT-induced PD rats in NOR test.After pretreated with NaHS (30 and 100 μmol/kg, i.p.) for 1 w, SD rats were injected with ROT (2mg/kg, s.c.) for 5 w and NaHS for 3 w simultaneously. Rats were subjected to NOR test. The total
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R742.5

【參考文獻】

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本文編號：2632267