【摘要】：目的：研究小腦延髓池注入凝血酶(Thrombin, TM)對大鼠腦血管的損害作用及與基底動脈痙攣的關系；并探討腦脊液中TM對大鼠蛛網膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage, SAH)模型及非SAH模型腦血管的損害是否存在差異。 方法：(1)采用通過小腦延髓池注入TM的方法將一定劑量的外源性TM注入大鼠蛛網膜下腔,采用“小腦延髓池二次注血法”制作大鼠SAH模型,大鼠(全血+TM)模型的制作方法是在第一次注血時將中等劑量(3U)的TM通過小腦延髓池注射而形成。(2)實驗動物分組：采用隨機數字表法將健康清潔級大鼠分為A1(對照)組、A2(單純TM)組和A3(全血+TM)組三個組。①在A1(對照)組中的實驗動物均行假手術,通過大鼠小腦延髓池注入相應劑量的生理鹽水形成假手術對照組；②在A2(單純TM)組中通過小腦延髓池向大鼠蛛網膜下腔單純注入凝血酶3U；③在A3組中的實驗動物為SAH模型,并在第一次注血時向蛛網膜下腔注入凝血酶3U。(3)手術成功后,根據實驗設計在術后第3天進行灌注處死大鼠,取腦基底動脈標本行病理組織學檢查,并運用計算機專業(yè)數碼圖像分析軟件Image-Pro Plus (IPP)6.0測量各組大鼠腦基底動脈內腔橫截面積,以小腦上動脈下0.2mm處為斷端,小腦前下動脈起點上下斷端以及基底動脈與椎動脈交點處上斷端4點取材血管橫截面制作病理切片；再者,各組標本行免疫組化后檢測基底動脈壁蛋白酶激活受體-1(Proteinase-activated Receptor-1, PAR-1)和腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α, TNF-α)的表達水平,以PAR-1和TNF-α平均光密度值為半定量指標做統計學分析。 結果：①單純注射凝血酶(TM)組(A2)與對照組(A1)比較,大鼠基底動脈內腔橫截面積較小,差異性顯著(P0.05),基底動脈PAR-1和TNF-α的平均光密度值較A1組高,有顯著性差異(P0.05)；②同等劑量TM,在SAH模型(A3組)中,基底動脈內腔橫截面積較非SAH模型(A2組)小,有顯著性差異(P0.05),但基底動脈TNF-α平均光密度值卻較A2組低,有顯著性差異(P0.05),基底動脈PAR-1平均光密度值無顯著性差異(P=0.420.05)。 結論：①TM注入大鼠蛛網膜下腔后基底動脈內腔橫截面積縮小,免疫組化檢測顯示基底動脈壁凝血酶受體PAR-1和炎性因子TNF-α的表達水平增高,提示腦脊液中存在TM有致CVS和腦血管損害作用；②SAH模型與非SAH模型比較,相同劑量TM注入蛛網膜下腔后,基底動脈內腔橫截面積、PAR-1表達水平和TNF-α的表達水平差異性不全顯著,提示無論是否存在SAH, TM均可導致腦血管痙攣發(fā)生。 目的：研究大鼠SAH模型腦脊液中TM存在于蛛網膜下腔的時間與其對腦血管的損害程度的相關性；探討大鼠SAH模型腦脊液中TM與腦血管痙攣(Cerebral vasospasm, CVS)程度之間的量效關系。 方法：(1)采用“小腦延髓池二次注血法”制作大鼠SAH模型,并在第一次注血時將不同研究劑量的TM注入大鼠蛛網膜下腔,形成(全血+TM)模型。(2)實驗動物分組：采用隨機數字法將符合實驗要求的大鼠分為B1組(3天)和B2組(7天)兩個實驗組。所有實驗動物按照方法(1)制作SAH模型, B1組和B2組分別各設四個小組：①全血,②全血+TM(1U),③全血+TM(3U),④全血+TM(5U)。(3)手術成功后,根據實驗設計分別在第3天或第7天灌注處死大鼠,取腦基底動脈標本行病理組織學檢查,運用計算機專業(yè)數碼圖像分析軟件Image-Pro Plus (IPP)6.0測量各組大鼠腦基底動脈內腔橫截面積；然后各組標本進行免疫組化檢測大鼠腦基底動脈壁PAR-1和TNF-α的平均光密度值。 結果：(1)全血+TM(3U)3d組(B1.③)和全血+TM(3U)7d組(B2.③)比較,7d組(B2.③)基底動脈橫截面積較小,差異有統計學意義(P=0.0030.05), B2.③組的PAR-1和TNF-α平均光密度值增高,差異有統計學意義(P=0.0430.05,P=0.0040.05);(2)全血+TM3d組(B1)組內四組間比較：隨TM濃度增高,基底動脈橫截面積逐漸縮小、PAR-1和TNF-α平均光密度值逐漸增高,總體組間差異具有統計學意義(P0.05),進一步行兩兩比較,上述三個指標的差異均具有統計學意義(P0.05);(3)全血+TM7d組(B2)組內四組間比較：四組間在基底動脈內腔橫截面積、PAR-1平均光密度值及TNF-α平均光密度值三個指標上的比較不全相同,有顯著性差異(P0.05),進一步行兩兩比較,組間差異均具有統計學意義(P0.05)。 結論：①在大鼠SAH模型中,隨著TM存在于蛛網膜下腔的時間延長,CVS程度呈加重趨勢；②在大鼠SAH模型中,存在于腦脊液中的TM劑量越大,CVS程度越重,兩者呈正相關。
【圖文】：

手術24小時后，大鼠神經功能障礙情況會有所改善，枝循環(huán)較豐富有關["]。織形態(tài)學變化型腦標本肉眼可見，，大量血凝塊彌漫性分布于蛛網膜s環(huán)周圍及環(huán)池為主。各組實驗動物于設定時間點以固定組織，取材腦及基底動脈組織石

本文編號：2574561