【摘要】：目的探索依達拉奉對腦缺血再灌注大鼠腦紅蛋白(Ngb)和14-3-3γ蛋白的影響。方法采用大腦中動脈閉塞法建立大鼠腦缺血再灌注模型,將48只雄性SD大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組和依達拉奉預(yù)處理組;采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清Ngb和14-3-3γ水平,采用蛋白免疫印跡、免疫組化檢測腦組織中Ngb和14-3-3γ表達。結(jié)果模型組大腦和血清的Ngb和14-3-3γ水平均高于假手術(shù)組(P0.05),依達拉奉預(yù)處理組大腦和血清的Ngb和14-3-3γ水平均高于模型組(P0.05)。結(jié)論依達拉奉能通過上調(diào)腦缺血再灌注大鼠血清和腦組織中Ngb和14-3-3γ水平發(fā)揮腦保護作用。
【圖文】：

素方差分析;兩組間差異比較當方差齊時采用SNK檢驗，方差不齊時采用Games-Howell檢驗。2結(jié)果2.1HE染色結(jié)果假手術(shù)組腦組織HE染色未見病理性改變。模型組的梗死灶內(nèi)可見大量細胞壞死，組織溶解后留下空洞，梗死灶周圍均可見細胞數(shù)明顯減少、細胞腫脹，部分細胞的細胞核固縮、深染或溶解。依達拉奉預(yù)處理組梗死灶周圍的病理性損傷比模型組明顯減輕。見圖1。2.2血清Ngb和14-3-3γ的濃度模型組血清Ngb和14-3-3γ的濃度均高于假手術(shù)組(P＜0.05)，而依達拉奉預(yù)處理組血清Ngb和14-3-3γ濃度均高于模型組(P＜0.05)。見表1。圖13組腦組織HE染色結(jié)果(×200)表13組血清Ngb和14-3-3γ的濃度(x±s，n=10，ng/ml)組別Ngb14-3-3γ假手術(shù)組41.23±7.940.27±0.05模型組66.94±11.201)0.57±0.101)依達拉奉預(yù)處理組113.84±56.701)2)0.95±0.391)2)與假手術(shù)組比較:1)P＜0.05;與模型組比較:2)P＜0.05;下表同2.3大腦Ngb和14-3-3γ的免疫組化表達模型組大腦梗死灶附近的Ngb和14-3-3γ水平均高于假手術(shù)組(P＜0.05)。相對于模型組，依達拉奉預(yù)處理組大腦的Ngb和14-3-3γ水平均明顯升高(P＜0.05)。見表2，圖2，圖3。2.4大腦Ngb和14-3-3γ的蛋白表達模型組患側(cè)大腦的Ngb和14-3-3γ蛋白表達均高于假手術(shù)組(P＜0.05)。依達拉奉預(yù)處理組大腦的Ngb和14-3-3γ蛋白表達相對模型組均明顯·2350·中國老年學(xué)雜志2017年5月第37卷

升高(P＜0.05)。見圖4，表3。表23組大腦Ngb和14-3-3γ的免疫組化表達(x±s，n=10)組別Ngb14-3-3γ假手術(shù)組0.110±0.0150.095±0.025模型組0.159±0.0241)0.143±0.0311)依達拉奉預(yù)處理組0.189±0.0831)2)0.177±0.0661)2)圖23組腦組織Ngb免疫組化(DAB，×200)圖33組腦組織14-3-3γ免疫組化(DAB，×200)圖4各組大腦Ngb和14-3-3γ的Western印跡圖表33組大腦Ngb和14-3-3γ的蛋白表達(x±s，n=6)組別Ngb14-3-3γ假手術(shù)組0.46±0.110.35±0.16模型組0.68±0.181)0.57±0.211)依達拉奉預(yù)處理組0.94±0.231)2)0.86±0.241)2)3討論缺血性腦血管病病理生理機制復(fù)雜，其中腦缺血后再灌注損傷危害極大，腦缺血恢復(fù)血液再灌注后，其病理損傷反而進一步加重，而神經(jīng)保護性蛋白能通過抑制凋亡等作用，，從而防止或減輕缺血再灌注引起的腦損害，減少腦組織死亡和促進組織修復(fù)〔4〕。本研究結(jié)果說明依達拉奉對腦缺血再灌注大鼠具有神經(jīng)保護作用，進一步研究發(fā)現(xiàn)，依達拉奉能促進腦缺血再灌注大鼠腦組織Ngb和14-3-3γ的生成。14-3-3γ蛋白主要表達在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星型膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元中，研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死患者梗死灶的14-3-3γ蛋白表達明顯升高，提示14-3-3γ蛋白在腦梗死灶發(fā)揮著重要作用〔5〕。在體外缺血模型中，14-3-3γ蛋白能抑制缺氧缺糖條件下神經(jīng)元或星型膠質(zhì)細胞的病理損傷及死亡〔6，7〕，本研究發(fā)現(xiàn)，依達拉奉能提高腦缺血灶的14-3-3γ蛋白表達，說明其腦保護作用機制之一是上調(diào)14-3-3γ的表達。Ngb是主要存在于神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的一種攜氧球蛋白，類似于血紅蛋白、肌紅蛋白等，可以和氧氣、二氧化碳等多種氣體配體結(jié)合，但Ngb比血紅蛋白對氧具有更高的親和力〔8〕。通過人腦組織的免疫組化研究?
【作者單位】： 廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81460192) 廣西自然科學(xué)基金項目(2011GXNSFA018185)
【分類號】：R743

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本文編號：2543172