【摘要】：目的探討經(jīng)典型瞬時(shí)受體電位通道3(transient receptor potential canonical channel 3,TRPC3)是否參與α-突觸核蛋白(α-synuclein,α-syn)引起的線粒體損傷。方法在α-syn過表達(dá)原代培養(yǎng)神經(jīng)元、α-syn轉(zhuǎn)基因及敲除小鼠模型,利用免疫印跡和免疫熒光技術(shù)檢測TRPC3和α-syn在線粒體內(nèi)的定位和表達(dá);在原代培養(yǎng)神經(jīng)元,運(yùn)用MTT和乳酸脫氫酶法檢測細(xì)胞活力和受損情況,JC-1法檢測線粒體膜電勢,觀察敲減TRPC3對α-syn過表達(dá)引起的線粒體損傷和細(xì)胞損傷的影響。結(jié)果 TRPC3和α-syn共同表達(dá)于線粒體,過表達(dá)α-syn增加TRPC3在線粒體的分布,敲除α-syn則下調(diào)TRPC3在線粒體的分布。敲減TRPC3明顯減輕過表達(dá)α-syn引起的線粒體膜電勢下降和細(xì)胞毒性。結(jié)論 TRPC3可能參與過表達(dá)α-syn引起的線粒體損傷。
[Abstract]:Objective to investigate whether the typical transient receptor potential channel 3 (transient receptor potential canonical channel 3, TRPC3) is involved in the damage of mitochondria induced by 偽-synuclein, 偽-syn (偽-synaptic nucleoprotein), which is involved in the damage of mitochondria induced by 偽-synaptic nucleoprotein (偽-synaptic nuclear protein). Methods Primary cultured neurons were overexpressed in 偽-syn. 偽-syn transgenic and knockout mouse models were used to detect the localization and expression of TRPC3 and 偽-syn in mitochondria by immunoblotting and immunofluorescence. In the primary cultured neurons, the cell activity and damage were detected by MTT and lactic dehydrogenase method, and the mitochondrial membrane potential was detected by JC-1 assay. The effects of knockdown TRPC3 on the damage of mitochondria and cell injury induced by 偽-syn overexpression were observed. Results TRPC3 and 偽-syn were co-expressed in mitochondria. Overexpression of 偽-syn increased the distribution of TRPC3 in mitochondria, while knockout of 偽-syn down-regulated the distribution of TRPC3 in mitochondria. Knockout of TRPC3 significantly alleviated the decrease of mitochondrial membrane potential and cytotoxicity induced by overexpression of 偽-syn. Conclusion TRPC3 may be involved in the injury of mitochondria induced by overexpression of 偽-syn.
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)生物學(xué)系北京腦重大疾病研究院帕金森病研究所教育部神經(jīng)變性病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家重點(diǎn)研究發(fā)展計(jì)劃(2016YFC1306002) 國家自然科學(xué)基金(81371398,81371200) 北京市自然科學(xué)基金(7131001) 北京市創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)提升計(jì)劃(IDHT20140514) 北京市教育委員會科技發(fā)展計(jì)劃一般項(xiàng)目(KM201710025001)~~
【分類號】：R-332;R742.5

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本文編號：2509469