發(fā)布時間：2019-04-26 04:51

【摘要】：目的本實驗建立在大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型基礎(chǔ)上,研究NF-κB和TLR4在無創(chuàng)性遠端肢體缺血后處理腦保護機制中的作用。 方法健康雄性SD大鼠,體重250-300g,隨機分為3組(each n=15):假手術(shù)組(Sham組)、缺血再灌注組(I/R組)和無創(chuàng)遠端缺血后處理組(NRIPoC組)。I/R組參照Longa制作MCAO模型方法制備局灶性腦缺血再灌注損傷模型,阻斷大鼠右側(cè)大腦中動脈90min后施行再灌注。Sham組除不插入栓線外,其他手術(shù)操作步驟同I/R組。NRIPoC組建立局灶性腦缺血再灌注損傷模型方法同I/R組,在大腦中動脈再灌注后立即行右側(cè)下肢加壓缺血5min/再灌注5min共3次循環(huán)后持續(xù)恢復右下肢血流。I/R組和NRIPoC組于大腦中動脈再灌注后24h, Sham組于手術(shù)完成后24h分別對各組大鼠進行神經(jīng)功能障礙評分,評分后處死大鼠,進行TTC染色測定腦梗死容積；HE染色觀察缺血半影區(qū)腦組織細胞形態(tài)及神經(jīng)細胞存活情況。免疫組化和Western blot法測定NF-κB、TLR4的表達。 結(jié)果1.大鼠腦缺血再灌注24h后, NRIPoC組腦梗死容積比I/R組腦梗死容積顯著減小(P0.05)。2.HE染色顯示I/R組和NRIPoC組腦缺血中心區(qū)均出現(xiàn)細胞壞死,腦缺血半影區(qū)神經(jīng)細胞數(shù)目減少,體積減小,核固縮,染色質(zhì)濃縮、邊聚。而NRIPoC組細胞損傷程度較I/R組減輕。3.缺血半影區(qū)NF-κB和TLR4表達：與Sham組相比,I/R組和NRIPoC組缺血半影區(qū)NF-κB和TLR4表達免疫組化法及Western blot法均顯著升高(P0.05),但NRIPoC組NF-κB和TLR4表達較I/R組表達降低(P0.05)。4.腦缺血再灌注24h后,NRIPoC組神經(jīng)功能障礙評分中位數(shù)較I/R組下降,但I/R組和NRIPoC組神經(jīng)功能障礙評分差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結(jié)論無創(chuàng)性遠端肢體缺血后處理的腦保護機制可能與NF-κB和TLR4表達降低,腦內(nèi)炎癥反應減輕有關(guān)。
[Abstract]:Aim to investigate the role of NF- kappa B and TLR4 in the non-invasive ischemic postconditioning of distal limbs on the basis of focal cerebral ischemia-reperfusion injury model in rats. Methods healthy male SD rats weighing 250 to 300 g were randomly divided into 3 groups: sham operation group (Sham group); The model of focal cerebral ischemia-reperfusion injury was established in group I / R (I / R group) and non-invasive group (NRIPoC group). The model of focal cerebral ischemia-reperfusion injury was made by reference to Longa in group I / R (group I / R) and non-invasive group (group I / R). After occlusion of the right middle cerebral artery (90min) in rats, reperfusion was performed. In Sham group, the procedure of operation was the same as that of I R group except that no embolus was inserted. The model of focal cerebral ischemia reperfusion injury was established in NRIPoC group, and the model of focal cerebral ischemia reperfusion injury in Sham group was the same as that in I R group. After middle cerebral artery reperfusion, the right lower limb pressure ischemia 5min/ reperfusion 5min was performed for 3 times, and the blood flow of the right lower limb was continuously restored after reperfusion. The blood flow of the right lower extremities was continuously restored in the I R group and the NRIPoC group at 24 h after the middle cerebral artery reperfusion. The rats in Sham group were evaluated with neurological dysfunction at 24 h after operation, and the rats were killed after the operation. The cerebral infarction volume was measured by TTC staining. HE staining was used to observe the cell morphology and neuronal survival in ischemic penumbra. The expression of NF- 魏 B and TLR4 was detected by immunohistochemistry and Western blot method. Outcome 1. After 24 hours of cerebral ischemia reperfusion, the infarct volume of NRIPoC group was significantly lower than that of I / R group (P0.05). The results of 2.HE staining showed that both I / R group and NRIPoC group had cell necrosis in the ischemic center area, and the cerebral infarction volume was significantly lower than that of I / R group (P < 0.05). In penumbra of cerebral ischemia, the number and volume of nerve cells decreased, nuclear condensation, chromatin concentration and edge aggregation. The degree of cell damage in NRIPoC group was less severe than that in I R group. 3. The expression of NF- 魏 B and TLR4 in ischemic penumbra: compared with Sham group, the expression of NF- 魏 B and TLR4 in I / R group and NRIPoC group was significantly higher than that in NRIPoC group (P 0.05), and the expression of NF- 魏 B and TLR4 in ischemic penumbra was significantly higher than that in NRIPoC group (P0.05). But the expression of NF- 魏 B and TLR4 in NRIPoC group was lower than that in I R group (P0.05). 24 hours after cerebral ischemia-reperfusion, the median neurological dysfunction score of NRIPoC group was lower than that of I / R group, but there was no significant difference between I / R group and NRIPoC group (P0.05). Conclusion the mechanism of brain protection after non-invasive distal limb ischemia may be related to the decreased expression of NF- 魏 B and TLR4 and the reduction of inflammatory response in the brain.
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R743

【共引文獻】

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