【摘要】：目的:研究miR-139-3p在大鼠神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生發(fā)展中的作用及其作用機(jī)制。方法:將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham)、坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷模型組(chronic constriction injury group,CCI)、2 mg/kg miR-139-3p模擬物(mimic)鞘內(nèi)注射組、4 mg/kg miR-139-3p mimic鞘內(nèi)注射組。術(shù)后的第14 d,Real-time PCR法檢測(cè)大鼠背根神經(jīng)節(jié)(DRG)中miR-139-3p及TRPV1的表達(dá)。于注射前及注射后的第1、3、7、14 d,利用von Frey檢測(cè)大鼠機(jī)械性痛閾及熱輻射法檢測(cè)大鼠熱痛閾值。Western Blot法檢測(cè)DRG中TRPV1的表達(dá);ELISA法檢測(cè)脊髓L4-L5組織中TNF-α及IL-1β的含量;雙熒光素酶報(bào)告基因法檢測(cè)miR-139-3p與TRPV1的靶向關(guān)系。結(jié)果:(1)與sham組相比較,miR-139-3p在CCI大鼠DRG中的表達(dá)顯著下降,而TRPV1的表達(dá)顯著上升(P0.05)。(2)與sham組相比較,CCI組中大鼠機(jī)械刺激縮足反射閾值及熱刺激縮足反射潛伏期顯著下降(P0.05);而與CCI組相比較,鞘內(nèi)注射miR-139-3p mimic可顯著促進(jìn)大鼠機(jī)械刺激縮足反射閾值及熱刺激縮足反射潛伏期的上升,抑制TRPV1的表達(dá)(P0.05)。(3)與sham組相比較,CCI組大鼠TNF-α及IL-1β含量顯著上升(P0.05);而與CCI組相比較,鞘內(nèi)注射miR-139-3p mimic可顯著抑制TNF-α及IL-1β的產(chǎn)生(P0.05)。(4)miR-139-3p mimic轉(zhuǎn)染可顯著降低熒光素酶報(bào)告基因的熒光強(qiáng)度。結(jié)論:miR-139-3p通過靶向下調(diào)TRPV1的表達(dá)緩解大鼠神經(jīng)病理性疼痛。
[Abstract]:Aim: to study the role and mechanism of miR-139-3p in the occurrence and development of neuropathic pain in rats. Methods: rats were randomly divided into sham operation group (chronic constriction injury group,CCI), (sham), chronic sciatic nerve compression injury model group (chronic constriction injury group,CCI), 2 mg/kg miR-139-3p analogue (mimic) intrathecal injection group, and 4 mg/kg miR-139-3p mimic intrathecal injection group. On the 14th day after operation, the expression of miR-139-3p and TRPV1 in (DRG) of rat dorsal root ganglion was detected by real time PCR. Before injection and 1,3,7,14 days after injection, the mechanical pain threshold and thermal pain threshold were detected by von Frey, TRPV1 expression in DRG, TNF- 偽 and IL-1 尾 in spinal cord L4-L5 tissue were detected by Western Blot and ELISA method, respectively, and the levels of TNF- 偽 and IL-1 尾 in spinal cord L4-L5 were measured by Western Blot and thermal radiation respectively at the 1st, 3rd, 7th and 14th day after injection. Double luciferase reporter gene method was used to detect the target relationship between miR-139-3p and TRPV1. Results: (1) compared with sham group, the expression of miR-139-3p in DRG of CCI rats decreased significantly, while the expression of TRPV1 increased significantly (P0.05). (2) compared with sham group. In CCI group, the threshold of foot contraction reflex induced by mechanical stimulation and the latency of foot contraction reflex induced by thermal stimulation were significantly decreased (P0.05). Compared with CCI group, intrathecal injection of miR-139-3p mimic significantly increased the threshold of foot contraction reflex induced by mechanical stimulation and the latency of foot contraction reflex induced by thermal stimulation, and inhibited the expression of TRPV1 (P0.05). (3) compared with sham group. The contents of TNF- 偽 and IL-1 尾 in CCI group were significantly higher than those in control group (P0.05). Compared with CCI group, intrathecal injection of miR-139-3p mimic significantly inhibited the production of TNF- 偽 and IL-1 尾 (P0.05). (4). MiR-139-3p mimic transfection significantly decreased the fluorescence intensity of luciferase reporter gene. Conclusion: miR-139-3p can alleviate neuropathic pain in rats by targeting down-regulating the expression of TRPV1.
【作者單位】： 廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院麻醉科;
【分類號(hào)】：R741

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本文編號(hào)：2447356