【摘要】：目的觀察高血糖對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注時(shí)小膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響。方法健康雄性SD大鼠80只,隨機(jī)分為正常血糖假手術(shù)組(NG sham組,n=5)、高血糖假手術(shù)組(HG sham組,n=5)、正常血糖腦缺血再灌注組(NG手術(shù)組,n=35)和高血糖腦缺血再灌注組(HG手術(shù)組,n=35)。采用鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射法制作SD大鼠1型糖尿病模型,大腦中動(dòng)脈阻塞法(MCAO)建立大鼠腦缺血再灌注模型,應(yīng)用小膠質(zhì)細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白Iba-1免疫組化標(biāo)記小膠質(zhì)細(xì)胞,觀察NG組和HG組大腦中動(dòng)脈阻塞30min,再灌注0.5、3、6h以及1、3、7、14d大鼠(每時(shí)間點(diǎn)5只)室周帶和尾狀核區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞的變化;采用Iba-1和核增殖抗原(PCNA)免疫熒光雙標(biāo)法檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞的增殖變化。結(jié)果腦缺血再灌注后,可見(jiàn)大鼠腦組織明顯水腫,呈網(wǎng)格狀,HE染色變淡,神經(jīng)元腫脹,胞質(zhì)空泡狀,胞核固縮,并可見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn),HE染色結(jié)果顯示HG手術(shù)組與NG手術(shù)組比較腦損傷更為明顯。腦缺血再灌注后第3天,免疫組化染色可見(jiàn)梗死周邊區(qū)、梨狀皮質(zhì)和軀體感覺(jué)皮質(zhì)的小膠質(zhì)細(xì)胞明顯活化,于第7天達(dá)到峰值,且其活化狀態(tài)可以持續(xù)到再灌注第14天。免疫熒光雙標(biāo)染色結(jié)果顯示腦缺血再灌注后小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增加與其增殖有關(guān),其增殖程度同樣是在缺血再灌注后第3天增加,第7天時(shí)達(dá)高峰。與NG手術(shù)組比較,HG手術(shù)組小膠質(zhì)細(xì)胞的活化及增殖較弱(P0.05),但均明顯高于各自的假手術(shù)組(P0.05)。結(jié)論高血糖導(dǎo)致的缺血后腦組織小膠質(zhì)細(xì)胞活化、增殖抑制可能參與了高血糖加重缺血性腦損傷的過(guò)程。
[Abstract]:Objective to observe the effect of hyperglycemia on the activation of microglia during focal cerebral ischemia reperfusion in rats. Methods 80 healthy male SD rats were randomly divided into normal blood glucose sham-operation group (NG sham group, n = 5), hyperglycemia sham operation group (HG sham group, n = 5), normal blood glucose cerebral ischemia reperfusion group (NG operation group), hyperglycemia sham operation group (HG sham group, n = 5), and normal blood glucose cerebral ischemia reperfusion group (NG operation group). NM35) and hyperglycemic cerebral ischemia-reperfusion group (HG operation group, nong35). The model of type 1 diabetes in SD rats was established by intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ) and middle cerebral artery occlusion (MCAO). Microglial cells were labeled with microglia specific marker protein Iba-1. The middle cerebral artery occlusion was observed for 30 min in NG group and HG group. Changes of microglia in periventricular zone and caudate nucleus of rats (5 rats per time point) at 7d 14; Iba-1 and (PCNA) were used to detect the proliferation of microglia. Results after cerebral ischemia-reperfusion, the brain tissue of rats showed obvious edema, reticular shape, light staining of HE, swelling of neurons, vacuolation of cytoplasm, pyknosis of nucleus and infiltration of inflammatory cells. HE staining showed that brain injury was more obvious in HG group than in NG group. On the 3rd day after cerebral ischemia-reperfusion, the microglia in the infarct area, piriform cortex and somatosensory cortex were obviously activated, and reached the peak on the 7th day, and the activation state could continue until the 14th day of reperfusion. The results of double immunofluorescence staining showed that the increase of the number of microglia after cerebral ischemia-reperfusion was related to the proliferation of microglia. The proliferative degree of microglia increased on the 3rd day after ischemia-reperfusion and reached its peak on the 7th day. The activation and proliferation of microglia in HG group were weaker than those in NG group (P0.05), but they were significantly higher than those in sham-operated group (P0.05). Conclusion the activation of microglia and the inhibition of proliferation may be involved in the process of hyperglycemia exacerbating ischemic brain injury.
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系;寧夏醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)司法鑒定中心;
【基金】：寧夏醫(yī)科大學(xué)校級(jí)課題(XY2017002);寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)西部一流學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目~~
【分類(lèi)號(hào)】：R587.2;R741

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本文編號(hào)：2421220