【摘要】：目的:探討miRNA-181a對(duì)l-甲基-4-苯基吡啶離子(1-methyl-4-phenyl-pyridinium,MPP+)誘導(dǎo)的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)多巴胺能神經(jīng)元損傷的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法 :采用胎齡12.5 d的C57BL/6小鼠胚胎中腦進(jìn)行多巴胺能神經(jīng)元原代培養(yǎng),依據(jù)不同處理方法分為4組:(1)空白對(duì)照(Control)組;(2)PD模型(MPP+)組;(3)陰性對(duì)照(miRNA-NC+MPP+)組;(4)miRNA-181a+MPP+組。酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxlase,TH)可以選擇性標(biāo)記多巴胺能神經(jīng)元,因此采用熒光顯微鏡對(duì)各組TH染色陽性神經(jīng)元數(shù)目、初級(jí)突觸分枝及最長突觸長度進(jìn)行觀察,分析各組之間的差異。結(jié)果:Control組多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞體積較大,呈圓形或三角形,胞體發(fā)出1個(gè)、2個(gè)或多個(gè)長的分枝以及軸突發(fā)出的次級(jí)突起,胞體和軸突表面光滑,形態(tài)完整,神經(jīng)元分枝之間相互交織呈網(wǎng)絡(luò),聯(lián)系密切。miRNA-NC+MPP+組經(jīng)MPP+作用后多巴胺能神經(jīng)元的數(shù)量減少,絕大多數(shù)表現(xiàn)為胞體存在,分枝數(shù)目及最長突觸長度明顯減少,網(wǎng)狀交織稀少,表面不光滑,有的呈串珠樣腫脹或軸突中斷、丟失,僅存胞體,少數(shù)也表現(xiàn)為胞體空虛、丟失,僅存突起。miRNA-181a+MPP+組較miRNA-NC+MPP+組多巴胺能神經(jīng)元數(shù)目有所增加,胞體形態(tài)較好,分枝數(shù)目與最長突觸長度較miRNA-NC+MPP+組有所改善,且表面較光滑,神經(jīng)元死亡程度較低。結(jié)論:miRNA-181a對(duì)MPP+所致多巴胺能神經(jīng)元損傷起到神經(jīng)保護(hù)作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of miRNA-181a on dopaminergic neuron damage induced by 1-methyl-4-phenyl-pyridine (MPP) in Parkinson's disease (Parkinson's disease,PD). Methods: the primary culture of dopaminergic neurons was carried out in the midbrain of C57BL/6 mice at the gestational age of 12.5 days. According to the different processing methods, they were divided into four groups: (1) blank control (Control) group, (2) PD model (MPP) group. (3) negative control group (miRNA-NC MPP) and (4) miRNA-181a MPP group. Tyrosine hydroxylase (tyrosine hydroxlase,TH) could selectively label dopaminergic neurons, so the number of TH staining positive neurons, the branches of primary synapses and the longest synaptic length were observed by fluorescence microscopy. The differences between groups were analyzed. Results: the dopaminergic neurons in Control group were larger in size, round or triangular, with one or more long branches and secondary processes of axons. The surface of the cells and axons was smooth and complete. In miRNA-NC MPP group, the number of dopaminergic neurons decreased after MPP treatment, most of them showed the presence of cell bodies, and the number of branches and the length of longest synapses decreased obviously. The reticular intertexture is rare, the surface is not smooth, some show bead like swelling or axon break, lose, only exist the cell body, a few also show the cell body emptiness, lose, The number of dopaminergic neurons in miRNA-181a MPP group was higher than that in miRNA-NC MPP group, the morphology of cell body was better, the number of branches and the longest synaptic length were improved, and the surface was smooth, and the degree of neuron death was lower in miRNA-181a MPP group than in miRNA-NC MPP group. Conclusion: miRNA-181a plays a neuroprotective role in MPP induced dopaminergic neuron injury.
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院老年神經(jīng)科;無錫錫山人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;南京醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院干細(xì)胞與神經(jīng)再生研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81100835)
【分類號(hào)】：R742.5

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本文編號(hào)：2396683