【摘要】：目的： 觀察大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血（Subarachnoid hemorrhage,SAH）模型的腦血管形態(tài)學(xué)變化及血管壁蛋白激酶C（Protein kinase C,PKC）的表達(dá)情況，探討丹紅注射液對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣(Cerebralvasospasm,CVS)的防治作用及機(jī)制。 方法： 將56只SD大鼠隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組（n=8），生理鹽水組（n=16），SAH組（n=16）及SAH后丹紅注射液治療組（治療組，n=16）。正常對(duì)照組不予任何處理，7天后處死；生理鹽水組以枕大池注入生理鹽水后分別于3、7天處死（各8只）；SAH組及SAH后丹紅注射液治療組均采用自體股動(dòng)脈血枕大池二次注射法建模，建模后SAH組亦于3、7天處死（各8只）；治療組于每日腹腔注射丹紅注射液后分別于3、7天處死（各8只）。建模后分別按各時(shí)間點(diǎn)取出動(dòng)物基底動(dòng)脈腦橋段，切片后觀察血管壁的厚度及血管壁的形態(tài)變化，采用免疫組化法測(cè)定血管壁PKC的表達(dá)情況，結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1.HE染色：正常對(duì)照組和生理鹽水組基底動(dòng)脈管壁平滑,內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,內(nèi)彈力板未見皺褶或斷裂。SAH組術(shù)后第3、7天均有基底動(dòng)脈管腔縮小，血管壁增厚且結(jié)構(gòu)紊亂；內(nèi)膜出現(xiàn)皺褶或斷裂,厚薄不均，內(nèi)皮細(xì)胞變形、腫脹；中、外膜變厚，平滑肌細(xì)胞肥大，出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，，以第7天時(shí)更嚴(yán)重。治療組各時(shí)間點(diǎn)基底動(dòng)脈管腔縮小、血管壁增厚、內(nèi)膜皺褶及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病理變化均較SAH組有所減輕。 基底動(dòng)脈內(nèi)徑與管壁厚度：正常組與生理鹽水組比較基底動(dòng)脈內(nèi)徑與管壁厚度無明顯變化（P0.05）；SAH組和治療組的基底動(dòng)脈內(nèi)徑較正常組均有縮小,管壁厚度較正常組均有增加。SAH組與治療組均出現(xiàn)基底動(dòng)脈內(nèi)徑縮小、管壁厚度增加，SAH組第7天比第3天更明顯，而治療組第3天比第7天稍明顯。在各時(shí)間點(diǎn)，SAH組與生理鹽水組比較，基底動(dòng)脈內(nèi)徑及管壁厚度有顯著差異（P0.05）；治療組與SAH組比較，基底動(dòng)脈內(nèi)徑較大，管壁較薄，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 2.免疫組化：在正常組和生理鹽水組探測(cè)到很弱的PKC免疫陽性反應(yīng)；在SAH組和治療組均可見PKC的免疫陽性反應(yīng)可以在血管內(nèi)膜，平滑肌層內(nèi)觀察到，呈棕黃或棕褐色，定位于細(xì)胞胞漿內(nèi)和胞膜上。PKC的免疫陽性反應(yīng)在SAH組第7天時(shí)最為顯著，第3天時(shí)次之；正常組和生理鹽水組PKC表達(dá)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，治療組PKC表達(dá)各時(shí)間點(diǎn)較SAH組明顯減弱，且均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： 1.蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣時(shí)基底動(dòng)脈PKC的活性表達(dá)有明顯的升高，其程度與腦血管痙攣形態(tài)學(xué)改變的程度一致，表明PKC的活性增加在腦血管持續(xù)痙攣中有著重要作用。 2.丹紅注射液可能是通過抑制PKC的活性來緩解蛛網(wǎng)膜下腔出血后的腦血管痙攣。
[Abstract]:Objective: to observe the changes of cerebral vascular morphology and the expression of vascular wall protein kinase (C (Protein kinase) in rats with subarachnoid hemorrhage (Subarachnoid hemorrhage,SAH). To investigate the preventive effect and mechanism of Danhong injection on cerebral vasospasm (Cerebralvasospasm,CVS) after subarachnoid hemorrhage. Methods: Fifty-six SD rats were randomly divided into 4 groups: normal control group (n = 8), normal saline group (n = 16) and danghong injection group (n = 16). The normal control group was killed after 7 days without any treatment, and in the saline group, 8 rats in each group were killed on the 7th day after injection of normal saline into the cistern of the occipital cistern. The SAH group and the SAH hindanghong injection treatment group were treated with the second injection of autologous femoral arterial blood occipital cistern, and the SAH group was killed on the 7th day after modeling (8 rats each). In the treatment group, danghong injection was injected intraperitoneally every day. After modeling, the animal basilar artery brain bridge segment was taken out according to each time point, the thickness of vascular wall and the morphological changes of vascular wall were observed after slicing, and the expression of PKC in vascular wall was determined by immunohistochemical method. The results were statistically analyzed. Results: 1.HE staining: the basilar artery wall was smooth, the endothelial cell structure was intact, and the inner elastic plate was not creased or broken in the normal control group and normal saline group. The basilar artery lumen was reduced in the SAH group on the 7th day after operation. The wall of blood vessel was thickened and the structure was disordered. The intima was creased or broken, uneven in thickness, deformed and swollen in endothelial cells, thickening of the outer membrane, hypertrophy of smooth muscle cells, inflammatory cell infiltration, and more serious on the 7th day. The pathological changes of basilar artery lumen, wall thickening, intimal crease and inflammatory cell infiltration at each time point in the treatment group were reduced compared with those in the SAH group. The diameter and thickness of basilar artery: there was no significant change in diameter and wall thickness of basilar artery between normal group and normal saline group (P0.05). The diameter of basilar artery in SAH group and treatment group was smaller than that in normal group, and the thickness of basilar artery was increased in SAH group and treatment group, and the thickness of basilar artery was increased in SAH group and treatment group. The thickness of basilar artery in SAH group was more obvious on the 7th day than on the third day. In the treatment group, the 3rd day was a little more obvious than the 7th day. At each time point, SAH group and normal saline group, basilar artery diameter and wall thickness were significantly different (P0.05); treatment group and SAH group, basilar artery diameter was larger, wall thin, the difference was statistically significant (P0.05). 2. Immunohistochemistry: weak PKC immunoreactivity was detected in normal group and normal saline group. The immunoreactivity of PKC was observed in the intima and smooth muscle layer of the blood vessels in both SAH and treatment groups. It was located in the cytoplasm and on the membrane of the cells. The immunoreactivity of PKC was the most significant in the SAH group on the 7th day. The third day was the second; There was no significant difference in PKC expression between normal group and normal saline group (P0.05). The expression of PKC in treatment group was significantly lower than that in SAH group (P0.05). Conclusion: 1. The expression of PKC activity in basilar artery was significantly increased during cerebral vasospasm after subarachnoid hemorrhage, which was consistent with the morphological changes of cerebral vasospasm. It indicated that the increase of PKC activity played an important role in cerebral vasospasm. 2. Danhong injection may relieve cerebral vasospasm after subarachnoid hemorrhage by inhibiting the activity of PKC.
【學(xué)位授予單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R743.35

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本文編號(hào)：2388205