【摘要】：目的構(gòu)建p EGFP-N1-NUCB2重組子并比較Lipofectamine 2000和Xfect兩種轉(zhuǎn)染試劑在進(jìn)行神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí)的轉(zhuǎn)染效率。方法構(gòu)建p EGFP-N1-NUCB2重組子,然后采用堿裂解法進(jìn)行質(zhì)粒DNA的提取,PEG-Mg Cl2進(jìn)行質(zhì)粒DNA的純化,最后將純化的質(zhì)粒DNA分別用兩種不同轉(zhuǎn)染試劑分別在HEK293細(xì)胞和SH-SY5Y細(xì)胞中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。結(jié)果采用Lipofectamine 2000進(jìn)行p EGFP-N1-NUCB2重組子的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)在HEK293細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)染成功,但是在SH-SY5Y細(xì)胞中基本沒(méi)有熒光顯現(xiàn);采用Xfect進(jìn)行p EGFP-N1-NUCB2重組子的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)在SH-SY5Y細(xì)胞中雖有熒光顯現(xiàn),但是轉(zhuǎn)染效率非常低。結(jié)論 Xfect的轉(zhuǎn)染效率高于Lipofectamine 2000,p EGFP-N1-NUCB2在SH-SY5Y細(xì)胞中采用脂質(zhì)體進(jìn)行轉(zhuǎn)染很難成功。
[Abstract]:Objective to construct p EGFP-N1-NUCB2 recombinant and compare the transfection efficiency of Lipofectamine 2000 and Xfect in neural cell transfection. Methods the recombinant p EGFP-N1-NUCB2 was constructed, then the plasmid DNA was extracted by alkaline lysis, and the plasmid DNA was purified by PEG-Mg Cl2. Finally, the purified plasmid DNA was transfected into HEK293 cells and SH-SY5Y cells with two different transfection reagents. Results Lipofectamine 2000 was used to carry out the transfection of p EGFP-N1-NUCB2 recombinant. It was found that the transfection was successful in HEK293 cells, but there was no fluorescence in SH-SY5Y cells. The transfection of p EGFP-N1-NUCB2 recombinant by Xfect showed that the transfection efficiency was very low although there was fluorescence in SH-SY5Y cells. Conclusion the transfection efficiency of Xfect is higher than that of Lipofectamine 200p EGFP-N1-NUCB2 in SH-SY5Y cells.
【作者單位】： 河北北方學(xué)院法醫(yī)教研室;河北北方學(xué)院;
【基金】：河北省衛(wèi)計(jì)委基金項(xiàng)目(20170179) 河北北方學(xué)院創(chuàng)新人才培育基金項(xiàng)目(CXRC1323)
【分類號(hào)】：R741

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本文編號(hào)：2344428