發(fā)布時間：2018-11-20 08:37

【摘要】：目的構(gòu)建p EGFP-N1-NUCB2重組子并比較Lipofectamine 2000和Xfect兩種轉(zhuǎn)染試劑在進行神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染時的轉(zhuǎn)染效率。方法構(gòu)建p EGFP-N1-NUCB2重組子,然后采用堿裂解法進行質(zhì)粒DNA的提取,PEG-Mg Cl2進行質(zhì)粒DNA的純化,最后將純化的質(zhì)粒DNA分別用兩種不同轉(zhuǎn)染試劑分別在HEK293細(xì)胞和SH-SY5Y細(xì)胞中進行轉(zhuǎn)染。結(jié)果采用Lipofectamine 2000進行p EGFP-N1-NUCB2重組子的轉(zhuǎn)染實驗,發(fā)現(xiàn)在HEK293細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)染成功,但是在SH-SY5Y細(xì)胞中基本沒有熒光顯現(xiàn);采用Xfect進行p EGFP-N1-NUCB2重組子的轉(zhuǎn)染實驗,發(fā)現(xiàn)在SH-SY5Y細(xì)胞中雖有熒光顯現(xiàn),但是轉(zhuǎn)染效率非常低。結(jié)論 Xfect的轉(zhuǎn)染效率高于Lipofectamine 2000,p EGFP-N1-NUCB2在SH-SY5Y細(xì)胞中采用脂質(zhì)體進行轉(zhuǎn)染很難成功。
[Abstract]:Objective to construct p EGFP-N1-NUCB2 recombinant and compare the transfection efficiency of Lipofectamine 2000 and Xfect in neural cell transfection. Methods the recombinant p EGFP-N1-NUCB2 was constructed, then the plasmid DNA was extracted by alkaline lysis, and the plasmid DNA was purified by PEG-Mg Cl2. Finally, the purified plasmid DNA was transfected into HEK293 cells and SH-SY5Y cells with two different transfection reagents. Results Lipofectamine 2000 was used to carry out the transfection of p EGFP-N1-NUCB2 recombinant. It was found that the transfection was successful in HEK293 cells, but there was no fluorescence in SH-SY5Y cells. The transfection of p EGFP-N1-NUCB2 recombinant by Xfect showed that the transfection efficiency was very low although there was fluorescence in SH-SY5Y cells. Conclusion the transfection efficiency of Xfect is higher than that of Lipofectamine 200p EGFP-N1-NUCB2 in SH-SY5Y cells.
【作者單位】： 河北北方學(xué)院法醫(yī)教研室;河北北方學(xué)院;
【基金】：河北省衛(wèi)計委基金項目(20170179) 河北北方學(xué)院創(chuàng)新人才培育基金項目(CXRC1323)
【分類號】：R741

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 李同歡;李振宏;杜淑珍;束曉梅;;Adv-CT1轉(zhuǎn)染對神經(jīng)元的作用[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2010年05期

2 張宇新,趙煥英,蘇月,蘇玉金,趙春禮,徐群淵,楊慧;α-synuclein-pEGFP真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在SH-SY5Y細(xì)胞中的表達(dá)[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2003年02期

3 錢進軍;王穎;趙康仁;吳頡言;張渭芳;王清芳;馬瑞;;低濃度利福平對魚藤酮介導(dǎo)的帕金森病細(xì)胞模型SH-SY5Y細(xì)胞的保護作用[J];江蘇醫(yī)藥;2011年16期

4 吳永青,劉彥文,邱鵬新,張清秀,葛堅;基因bcl-2對神經(jīng)元生物活性的保護作用(英文)[J];中國臨床康復(fù);2003年22期

5 田明秀;常明;朱本清;解洪榮;王丹平;張春光;胡林森;;多巴胺誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞帕金森病模型中GRP78的表達(dá)[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年01期

6 徐八一;何衛(wèi)紅;何平;夏濤;陳學(xué)敏;王愛國;;PBDE-47對人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞致突變作用[J];癌變.畸變.突變;2007年06期

相關(guān)會議論文 前3條

1 姜慧軼;胡林森;;蛋白酶體抑制劑處理的未分化及分化SH-SY5Y細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 李勤;索麗松;謝海燕;張耀陽;鄧玉林;;免疫熒光法檢測DAT在SH-SY5Y細(xì)胞中的分布[A];第六屆全國光生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2004年

3 楊威;麻琦;唐力;鄧玉林;;SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)羥自由基水平的HPLC-ECD測定方法研究[A];第十五次全國色譜學(xué)術(shù)報告會文集（下冊）[C];2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 曾韜;HDAC6在異常聚集tau蛋白的降解過程中的作用及機制研究[D];華中師范大學(xué);2015年

2 張寧;尿酸調(diào)節(jié)Nrf2信號通路減輕6-OHDA對SH-SY5Y細(xì)胞損傷的實驗研究[D];蘇州大學(xué);2014年

3 周立冬;2，3-吲哚醌多靶點誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞SH-SY5Y凋亡機制的研究[D];青島大學(xué);2009年

，

本文編號：2344428