【摘要】：MCPH1也稱為BRIT1,編碼Microcephalin蛋白。MCPH1基因突變可導(dǎo)致一種稱作原發(fā)性小頭畸形的常染色體隱性遺傳疾病產(chǎn)生。MCPH1可以抑制端粒末端轉(zhuǎn)移酶的表達,是一個潛在的腫瘤抑制基因。MCPH1在維持基因組穩(wěn)定性中也具有重要的作用,MCPH1與細胞周期調(diào)控過程、DNA損傷應(yīng)答、細胞凋亡過程以及腫瘤發(fā)生、發(fā)展等多種細胞活動相關(guān)。本研究利用原位雜交技術(shù)分別檢測了各小鼠模型子宮中Mcph1 mRNA的表達情況,小鼠模型包括早期妊娠模型、假孕模型、人工誘導(dǎo)蛻膜化模型和延遲著床及激活模型,根據(jù)實驗結(jié)果可以總結(jié)：在早期妊娠的小鼠子宮中,Mcph1 mRNA在妊娠第1天表達較弱,且信號僅出現(xiàn)在子宮腔上皮；在妊娠第2、4天的子宮腔上皮和腺上皮中均有Mcph1 mRNA表達；而妊娠第3天僅在腔上皮觀察到信號的表達,第2-4天的Mcph1 mRNA信號強度相比第1天均有所增強,但2-4天這三天的信號強度幾乎保持同水平；在小鼠妊娠第5天,Mcph1 mRNA信號除在腔上皮表達外,也在初級蛻膜區(qū)區(qū)域出現(xiàn),信號強度較強；在妊娠第6天到妊娠第8天,信號的表達仍主要集中于初級蛻膜區(qū),并從第7天開始逐漸擴散至蛻膜區(qū),妊娠第8天時基本覆蓋整個子宮組織。在假孕模型的小鼠子宮中,Mcph1 mRNA信號在假孕第1-4天的表達情況與妊娠第1-4天基本形同,除第1,3天僅出現(xiàn)在在腔上皮外,在第2,4,5天既出現(xiàn)在腔上皮也出現(xiàn)在腺上皮,且Mcph1 mRNA信號強度基本沒有變化。在人工誘導(dǎo)蛻膜化的子宮組織中,可在蛻膜區(qū)域中檢測到一定強度的信號的表達,與第8天的表達情況相似；在人工蛻膜化對照組中在子宮腔上皮和腺上皮中檢測到信號。在延遲著床及激活模型的小鼠子宮中,除在激活著床的子宮腔上皮和腺上皮中可觀察到信號外,在其初級蛻膜化區(qū)域中也檢測到了信號的表達,表達情況與妊娠第5天較相似,而在延遲著床子宮中,僅在腔上皮和腺上皮中觀察到信號。另外還使用實時定量PCR的方法檢測了早期妊娠小鼠模型子宮中Mcph1 mRNA表達情況,結(jié)果顯示：以妊娠第1天的表達量作為對照,在妊娠1-3天內(nèi),Mcph1 mRNA表達逐漸增強,在第3天相對表達量達到最高,而在第4天相對表達量減少,在第5天Mcph1 mRNA相對表達量升高,但相對表達量仍低于第3天,在妊娠第5-8天,相對表達量呈現(xiàn)逐漸降低。上述研究表明,Mcph1 mRNA的表在胚胎著床期間發(fā)生明顯的時間空間變化,暗示了Mcph1在該過程中可能發(fā)揮一定作用。
[Abstract]:MCPH1 also known as BRIT1, encodes Microcephalin protein. MCPH1 mutations can lead to an autosomal recessive genetic disease called primary microcephaly. MCPH1 inhibits the expression of telomere terminal transferases. MCPH1 also plays an important role in maintaining genomic stability. MCPH1 is associated with cell cycle regulation, DNA damage response, apoptosis, tumorigenesis and development. In this study, in situ hybridization was used to detect the expression of Mcph1 mRNA in the uterus of various mouse models, including early pregnancy model, pseudo pregnancy model, artificial induced decidualization model and delayed implantation and activation model. According to the experimental results, the expression of Mcph1 mRNA was weak on the first day of pregnancy, and the signal only appeared in the uterine cavity epithelium. Mcph1 mRNA was expressed in uterine cavity epithelium and glandular epithelium on the 2nd day of pregnancy. On the third day of gestation, the signal expression was observed only in the luminal epithelium. The signal intensity of Mcph1 mRNA on day 2-4 was increased compared with that on day 1, but the signal intensity was almost the same on the 3rd day of gestation compared with that on day 1. On the 5th day of gestation, Mcph1 mRNA signal was expressed not only in the luminal epithelium, but also in the primary decidua region. From the 6th day of gestation to the 8th day of pregnancy, the signal expression was mainly concentrated in the primary decidua area, and gradually spread to the decidua area from the 7th day, and the whole uterine tissue was basically covered on the 8th day of gestation. The expression of Mcph1 mRNA signal on day 1-4 of pseudopregnancy was similar to that on day 1-4 of pregnancy. Except for day 1 and day 3, it appeared only in luminal epithelium, and on day 2, it appeared in both luminal epithelium and glandular epithelium. And the Mcph1 mRNA signal intensity has not changed. In the artificial decidualized uterine tissue, a certain intensity of signal expression could be detected in the decidua region, similar to the expression on the 8th day, and in the uterine cavity epithelium and glandular epithelium in the artificial decidualized control group. In the mouse uterus with delayed implantation and activation model, the signal was observed not only in the uterine cavity epithelium and glandular epithelium, but also in the primary decidualization region, which was similar to that on the 5th day of pregnancy. In delayed implantation, signals were observed only in luminal and glandular epithelium. In addition, real-time quantitative PCR was used to detect the expression of Mcph1 mRNA in the uterus of mouse model of early pregnancy. The results showed that the expression of Mcph1 mRNA was gradually increased during the 1-3 days of gestation, compared with that of the first day of pregnancy. The relative expression reached the highest level on the 3rd day, decreased on the 4th day, and increased on the 5th day, but the relative expression level was still lower than that on the 3rd day, and decreased gradually on the 5-8 day of gestation. These results suggest that Mcph1 mRNA's surface changes in time and space during embryo implantation, suggesting that Mcph1 may play a role in this process.
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R742

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本文編號：2320170