【摘要】：目的探討亞甲基藍(lán)對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注引起血腦屏障破壞的保護(hù)作用。方法雄性Sprague-Dawley大鼠18只隨機(jī)分為假手術(shù)組(n=6)、模型組(n=6)和亞甲基藍(lán)組(n=6)。用線栓法制備大鼠左側(cè)大腦中動(dòng)脈栓塞1 h再灌注模型。亞甲基藍(lán)組于再灌注即刻及再灌注2 h分別靜脈給予亞甲基藍(lán)3 mg/kg、1.5 mg/kg;模型組給予相同體積的生理鹽水;假手術(shù)組手術(shù)操作與模型組相同,不插入線栓,不靜脈注射藥物。再灌注47 h后HE染色觀察大鼠腦缺血周邊皮層組織學(xué)結(jié)構(gòu),白蛋白免疫組化染色法檢測(cè)血腦屏障通透性的變化,免疫組化染色法和免疫熒光雙標(biāo)染色法檢測(cè)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)和水通道蛋白-4(AQP-4)的表達(dá)。結(jié)果 HE染色顯示,模型組缺血周邊大腦皮層的細(xì)胞和血管形態(tài)不完整,而亞甲基藍(lán)組病理變化減輕;模型組白蛋白、GFAP和AQP-4表達(dá)均明顯高于假手術(shù)組(P0.01),亞甲基藍(lán)組白蛋白、GFAP、AQP-4表達(dá)均低于模型組(P0.05)。免疫熒光雙標(biāo)染色顯示,AQP-4與GFAP在星形膠質(zhì)細(xì)胞上共定位。結(jié)論亞甲基藍(lán)可能是通過(guò)減輕膠質(zhì)細(xì)胞增生及下調(diào)AQP-4表達(dá)來(lái)改善局灶性腦缺血再灌注損傷引起的血腦屏障破壞。
[Abstract]:Objective to investigate the protective effect of methylene blue on blood-brain barrier damage induced by focal cerebral ischemia reperfusion in rats. Methods Eighteen male Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups: sham operation group (n = 6), model group (n = 6) and methylene blue group (n = 6). The left middle cerebral artery (MCAE) reperfusion model was established by thread embolization for 1 h. Methylene blue 3 mg/kg,1.5 mg/kg; model group was given the same volume of normal saline respectively immediately after reperfusion and 2 hours after reperfusion. The sham-operation group had the same operation procedure as the model group, without insertion of thread embolus and intravenous injection of drugs. The histological structure of cerebral ischemic cortex was observed by HE staining and the changes of blood-brain barrier permeability were detected by albumin immunohistochemical staining after 47 h reperfusion. The expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP) and aquaporin-4 (AQP-4) were detected by immunohistochemistry and double immunofluorescence staining. Results HE staining showed that the morphology of cells and blood vessels in the cerebral cortex around ischemia in the model group was incomplete, while the pathological changes in the methylene blue group were alleviated. The expression of albumin, GFAP and AQP-4 in model group was significantly higher than that in sham operation group (P0.01), and the expression of albumin and GFAP,AQP-4 in methylene blue group was lower than that in model group (P0.05). Double immunofluorescence staining showed that AQP-4 and GFAP were co-located on astrocytes. Conclusion methylene blue may ameliorate the blood-brain barrier damage induced by focal cerebral ischemia-reperfusion injury by reducing glial cell proliferation and down-regulation of AQP-4 expression.
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)北京市神經(jīng)外科研究所病理生理室 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院;北德克薩斯大學(xué)醫(yī)學(xué)中心神經(jīng)與藥理系;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81271286,No.81228009)
【分類號(hào)】：R743.3

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本文編號(hào)：2296436