【摘要】：目的:研究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)對腦缺血大鼠神經(jīng)細胞凋亡及Bcl-2、Bax表達的影響。方法:采用全骨髓貼壁法體外培養(yǎng)BMSCs,傳代至第3代用于尾靜脈移植。采用線栓法誘導大鼠右側大腦中動脈阻塞模型,除假手術組外,大鼠隨機分為模型組、BMSCs(1×10~9/L)組、川芎嗪(40 mg/kg)組和聯(lián)合(川芎嗪+BMSCs)組,每組12只。缺血后第1、7和14天采用改良的神經(jīng)損傷嚴重程度評分(modified neurological severity scoring,m NSS)進行神經(jīng)功能評價。缺血后第14天,甲苯胺藍染色檢測腦梗死體積,HE染色觀察腦組織病理學變化,采用原位末端標記(TUNEL)法觀察神經(jīng)細胞凋亡數(shù),采用實時熒光定量PCR法和Western blot法檢測Bax和Bcl-2的mRNA及蛋白表達。結果:與BMSCs組和川芎嗪組比較,聯(lián)合組m NSS評分顯著減少(P0.01),梗死體積顯著減少(P0.01),缺血引起的腦缺血周邊區(qū)病理性損傷明顯減輕,TUNEL陽性細胞數(shù)顯著減少(P0.01),Bcl-2的mRNA及蛋白表達顯著增加,Bax的mRNA及蛋白表達顯著降低(P0.01)。結論:川芎嗪聯(lián)合BMSCs移植能顯著促進腦缺血后大鼠的功能恢復,減少梗死體積,減輕腦組織缺血性損傷,抑制神經(jīng)細胞凋亡,機制可能與調(diào)控Bcl-2和Bax的表達有關。
[Abstract]:Aim: to study the effects of ligustrazine (tetramethylpyrazine,TMP) combined with bone marrow mesenchymal stem cell (bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs) on neuronal apoptosis and Bcl-2,Bax expression in rats with cerebral ischemia. Methods: the whole bone marrow adherent method was used to culture BMSCs, for caudal vein transplantation. The right middle cerebral artery occlusion model was induced by thread occlusion in rats. Except sham-operation group, rats were randomly divided into three groups: model group (, BMSCs (1 脳 10 9 / L), ligustrazine (40 mg/kg) group and ligustrazine BMSCs group (12 rats in each group). The neurological function was evaluated on the 7th and 14th day after ischemia by using the modified nerve injury severity score (modified neurological severity scoring,m NSS). On the 14th day after ischemia, toluidine blue staining was used to detect the volume of cerebral infarction, HE staining was used to observe the pathological changes of brain tissue, and the number of neuronal apoptosis was observed by in situ end labeling (TUNEL) method. The expression of mRNA and protein in Bax and Bcl-2 were detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot. Results: compared with BMSCs group and ligustrazine group, In the combined group, the score of m NSS was significantly decreased (P0.01), the infarct volume was significantly decreased (P0.01), the pathological injury of ischemic peripheral area was alleviated significantly, the number of TUNEL positive cells was significantly decreased (P0.01), the expression of mRNA and protein in Bcl-2 was significantly increased, and the expression of mRNA and protein in Bax was significantly decreased (P0.01). Conclusion: ligustrazine combined with BMSCs transplantation can significantly promote functional recovery, reduce infarct volume, reduce ischemic injury of brain tissue and inhibit neuronal apoptosis in rats after cerebral ischemia. The mechanism may be related to the regulation of the expression of Bcl-2 and Bax.
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學藥學院;浙江中醫(yī)藥大學基礎醫(yī)學院;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81274113) 浙江省公益技術應用研究計劃(No.2016C33185) 浙江省教育廳科研項目(No.Z201016310)
【分類號】：R743.3

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