【摘要】：目的探究DNA甲基結(jié)合蛋白(MeCP)2調(diào)節(jié)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(OPCs)終末分化的作用及機(jī)制。方法 (1)采用Western印跡方法觀察MeCP2沉默對(duì)OPCs分化成熟的影響;(2)運(yùn)用甲基特異性聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)(BSP)和定量實(shí)時(shí)PCR(qRT-PCR)探究少突終末標(biāo)志物內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子Sry相關(guān)Box17因子(SOX)10、DNA甲基結(jié)合蛋白(MBP)、髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)、髓鞘脂蛋白(PLP)甲基化和表達(dá)變化。結(jié)果與正常細(xì)胞相比,在MeCP2沉默的OPCs中,與OPCs分化成熟相關(guān)2',3'-環(huán)核苷酸3'-磷酸二酯酶(CNP)重組蛋白表達(dá)明顯上調(diào),同時(shí)SOX10、MBP、MAG、PLP表達(dá)均明顯上調(diào);但呈現(xiàn)低甲基化水平。結(jié)論 MeCP2沉默可促進(jìn)OPCs終末分化標(biāo)志物的表達(dá)及甲基化水平的降低,從而促進(jìn)OPCs成熟分化。
[Abstract]:Objective to investigate the role and mechanism of DNA methyl-binding protein (MeCP) 2 in regulating terminal differentiation of oligodendrocyte precursor cells (OPCs). Methods (1) the effects of meCP2 silencing on the differentiation and maturation of OPCs were observed by Western blot, and (2) the methyl-specific polymerase chain reaction (BSP) and quantitative real-time PCR (qRT-PCR) were used to explore the methyl-knot of oligodendpoints marker Sry associated with Box17 factor (Sox) 10nDNA. Methylation and expression of myelin associated glycoprotein (MAG), myelin associated glycoprotein (MBP) and myelin sheath lipoprotein (PLP). Results compared with normal cells, the expression of CNP recombinant protein was significantly up-regulated in OPCs treated with MeCP2 silencing, and the expression of SOX10MBP- MAGP-PLP was significantly up-regulated in OPCs, but it showed a low methylation level. Conclusion MeCP2 silencing can promote the expression of terminal differentiation markers and decrease the level of methylation of OPCs, thus promoting the mature differentiation of OPCs.
【作者單位】： 張家口學(xué)院醫(yī)學(xué)系;
【分類(lèi)號(hào)】：R741

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本文編號(hào)：2128150