本文選題：CXCL13 + CXCR5��； 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:癲癇的發(fā)病機(jī)制目前仍然不清楚。最近的研究表明,大腦的炎癥過程在癲癇形成中很常見且起到至關(guān)重要的作用。而C-X-C趨化因子配體13(CXCL13)及其唯一受體C-X-C趨化因子受體5(CXCR5)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中高度表達(dá)并參與炎癥反應(yīng)。本研究旨在評估CXCL13和CXCR5在難治性癲癇(IE)患者和顳葉癲癇(TLE)模型(氯化鋰-匹魯卡品點燃)大鼠的腦組織中的表達(dá),以確定CXCL13-CXCR5信號通路在癲癇形成中的作用。方法:1.收集20例難治性顳葉癲癇患者的顳葉皮質(zhì)標(biāo)本和20例腦外傷患者的組織學(xué)正常顳葉皮質(zhì)標(biāo)本。2.SD大鼠腹腔注射氯化鋰-匹魯卡品建立慢性癲癇模型,對照組大鼠腹腔注射生理鹽水。3.使用免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)研究顳葉癲癇患者和癲癇大鼠腦組織中CXCL13和CXCR5的細(xì)胞定位。實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-q PCR)、免疫組織化學(xué)、蛋白印跡方法測定各組CXCL13和CXCR5的mRNA和蛋白表達(dá)量的變化。結(jié)果:免疫熒光雙標(biāo)結(jié)果顯示CXCL13主要表達(dá)在神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中,而CXCR5主要表達(dá)在神經(jīng)元的細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中。研究發(fā)現(xiàn)CXCL13和CXCR5的mRNA表達(dá)水平與蛋白表達(dá)水平在TLE患者和TLE大鼠中顯著升高。此外,在匹魯卡品癲癇模型大鼠中,CXCL13和CXCR5的蛋白表達(dá)水平在首次發(fā)作達(dá)到癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)之后的不同時間階段有不同的改變趨勢,這些癲癇階段包括急性期(6、24和72小時組),潛伏期(7和14天組)和慢性期(30和60天組)。結(jié)論:CXCL13和CXCR5在難治性顳葉癲癇患者和癲癇大鼠的腦組織中表達(dá)升高。CXCL13-CXCR5信號通路可能在IE中發(fā)揮了致病作用。CXCL13和CXCR5可能作為一種在癲癇患者大腦中表達(dá)的潛在的炎癥相關(guān)生物標(biāo)志物。
[Abstract]:Objective: the pathogenesis of epilepsy is still unclear. Recent studies have shown that inflammation in the brain is common and critical in epilepsy formation. C-X-C chemokine ligand 13 (CXCL13) and its only receptor, C-X-C chemokine receptor 5 (CXCR5), are highly expressed in the central nervous system (CNS) and participate in inflammatory reactions. The purpose of this study was to evaluate the expression of CXCL13 and CXCR5 in the brain of patients with intractable epilepsy (IE) and rats with temporal lobe epilepsy (TLE), and to determine the role of CXCL13-CXCR5 signaling pathway in epileptogenesis. Method 1: 1. The temporal cortex specimens of 20 patients with refractory temporal lobe epilepsy and the normal temporal cortex specimens of 20 patients with brain trauma were collected. 2. SD rats were injected intraperitoneally with lithium chloride-pilocarpine to establish a chronic epilepsy model. Rats in control group were intraperitoneally injected with normal saline. The cellular localization of CXCL13 and CXCR5 in the brain of temporal lobe epilepsy patients and epileptic rats was studied by immunofluorescence double labeling technique. The mRNA and protein expressions of CXCL13 and CXCR5 were detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-q PCR), immunohistochemistry and Western blot. Results: immunofluorescence double labeling results showed that CXCL13 was mainly expressed in the cell membrane and cytoplasm of neurons and astrocytes, while CXCR5 was mainly expressed in the cell membrane and cytoplasm of neurons. It was found that the mRNA and protein expression levels of CXCL13 and CXCR5 were significantly increased in TLE patients and TLE rats. In addition, the protein expression levels of CXCL13 and CXCR5 in Pilucapine epileptic model rats showed different trends at different time stages after the onset of epileptic status (SE). These epileptic stages included acute (6o 24 and 72 h), latency (7 and 14 days) and chronic (30 and 60 days). Conclusion the increased expression of CXCL13 and CXCR5 in the brain of intractable temporal lobe epilepsy patients and epileptic rats. CXCL13-CXCR5 signaling pathway may play a pathogenic role in IE. CXCL13 and CXCR5 may be a potential inflammation expressed in the brain of epileptic patients. Disease related biomarkers.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R742.1

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本文編號：2118178