本文選題：MiRNA-a + 水通道蛋白　； 參考：《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年01期

【摘要】：本研究初步探討過表達(dá)miRNA-320a對(duì)抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞遷移、侵襲的可能的機(jī)制。實(shí)驗(yàn)開始前我們利用生物信息學(xué)軟件進(jìn)行分析對(duì)比miRNA-320a與水通道蛋白4(AQP4)之間的靶點(diǎn)結(jié)合關(guān)系,然后我們用miRNA-320a mimic及Ncontrol對(duì)U251細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染,48 h后進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。首先用q-PCR驗(yàn)證過表達(dá)轉(zhuǎn)染情況,以及水通道蛋白4(AQP4)m RNA的表達(dá)水平,其次用劃痕和Transwell檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞株的遷移侵襲能力,最后用Western blotting測(cè)定AQP4的表達(dá)水平。生物信息分析可得miRNA-320a在AQP4 m RNA 3'UTR區(qū)域能穩(wěn)定結(jié)合,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染mimic后,過表達(dá)組明顯升高,且過表達(dá)組AQP4 m RNA的表達(dá)明顯被抑制,劃痕和Transwell實(shí)驗(yàn)提示了過表達(dá)miRNA-320a后能抑制U251細(xì)胞株的遷移侵襲能力(p0.01)。Western blotting結(jié)果顯示,過表達(dá)miRNA-320a與對(duì)照組相比能明顯抑制AQP4蛋白的表達(dá)。所有研究結(jié)果提示miRNA-320a能靶向作用AQP4 m RNA 3'UTR區(qū)域,并抑制其蛋白表達(dá),從而抑制了腫瘤細(xì)胞U251的遷移侵襲能力,為臨床治療惡性膠質(zhì)瘤提供新的參考。
[Abstract]:In this study, we investigated the possible mechanism of overexpression of miRNA-320a in inhibiting the migration and invasion of glioma U251 cells. Before the experiment, we used bioinformatics software to analyze and compare the target binding relationship between miRNA-320a and aquaporin 4 (AQP4), then we transfected U251 cell line with miRNA-320a mimic and Ncontrol for 48 h. The expression of aquaporin-4 (AQP4) mRNA and the expression of aquaporin-4 (AQP4) mRNA were detected by q-PCR, then the migration and invasion ability of transfected cells was detected by scratch and Transwell, and the expression of AQP4 was detected by Western blotting. Bioinformatics analysis showed that miRNA-320a could bind stably in the region of AQP4 mRNA 3 UTR. The results showed that after transfection of mimic, the expression of AQP4 mRNA in overexpression group was significantly increased, and the expression of AQP4 mRNA in overexpression group was significantly inhibited. The results of scratch and Transwell experiments showed that overexpression of miRNA-320a could inhibit the migration and invasion of U251 cell line (p0.01). Western blotting showed that overexpression of miRNA-320a could significantly inhibit the expression of AQP4 protein. All the results suggest that miRNA-320a can target AQP4 mRNA 3UTR and inhibit its protein expression, thus inhibiting the migration and invasion of tumor cell U251, and providing a new reference for clinical treatment of malignant glioma.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院組織細(xì)胞工程與干細(xì)胞研究室;重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基因項(xiàng)目(31271368)基金資助
【分類號(hào)】：R739.41

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本文編號(hào)：2099879