本文選題：干細胞 + 微RNAs��； 參考：《中國組織工程研究》2017年33期

【摘要】：背景:mi R-15b在腫瘤起始和發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用,于是作者推測miR-15b可能參與調(diào)解膠質(zhì)瘤干細胞細胞的遷移和侵染,而這目前尚無相關(guān)報道,并且其機制也不清楚。目的:探討mi R-15b對膠質(zhì)瘤干細胞遷移和侵染的影響及相關(guān)分子機制。方法:實時熒光定量PCR檢測膠質(zhì)瘤組織、正常成人腦組織,膠質(zhì)瘤干細胞及非膠質(zhì)瘤干細胞中mi R-15b的表達情況。(1)分別以ABCG2特異性si RNA、對照si RNA轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤干細胞;(2)分別以mi R-15抑制物、mi R-15模擬物及mi R-對照分別轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤干細胞。轉(zhuǎn)染后48 h,Transwell檢測細胞遷移和侵染能力,ELISA法和明膠酶譜實驗檢測細胞培養(yǎng)上清中基質(zhì)金屬蛋白酶2/9蛋白量及活性變化。將膠質(zhì)瘤干細胞及非膠質(zhì)瘤干細胞分別注入裸鼠皮下,30 d內(nèi)觀察成瘤情況。結(jié)果與結(jié)論:(1)與正常腦組織相比,膠質(zhì)瘤中mi R-15b的表達明顯較低且與膠質(zhì)瘤所處階段呈負相關(guān)性。與非膠質(zhì)瘤干細胞相比,膠質(zhì)瘤干細胞中mi R-15b的表達顯著下調(diào);(2)與mi R-對照組比較,mi R-15b模擬物組細胞遷移及侵染能力顯著下降(P0.01),mi R-15b抑制物組細胞遷移及侵染能力顯著增加(P0.01);Target Scan生物學(xué)軟件預(yù)測表明ABCG2為mi R-15b潛在的靶基因;(3)與對照si RNA組比較,ABCG2 si RNA組細胞遷移及侵染能力顯著下降(P0.01);(4)ELISA檢測表明,上調(diào)mi R-15b基因表達顯著抑制基質(zhì)金屬蛋白酶2/9蛋白的表達;(5)ELISA法和明膠酶譜實驗檢測結(jié)果表明,ABCG2 si RNA轉(zhuǎn)染可顯著抑制基質(zhì)金屬蛋白酶2/9蛋白的活性,但不影響其表達量;(6)裸鼠體內(nèi)實驗表明,膠質(zhì)瘤干細胞具有更強的成瘤能力;(7)結(jié)果表明,mi R-15b通過靶作用于ABCG2調(diào)控膠質(zhì)瘤干細胞的遷移和侵染,上調(diào)mi R-15b表達可抑制膠質(zhì)瘤干細胞的遷移和侵染。
[Abstract]:Background: mi R-15b plays an important role in the initiation and development of tumor, so the authors speculate that miR-15b may be involved in the mediation of glioma stem cell migration and infection, which has not been reported and its mechanism is not clear. Objective: to investigate the effect of mi R-15b on the migration and infection of glioma stem cells and its molecular mechanism. Methods: Real-time fluorescent quantitative PCR was used to detect glioma tissue and normal adult brain tissue. The expression of mi R-15b in glioma stem cells and non-glioma stem cells. (1) glioma stem cells were transfected with ABCG2 specific si RNAs and control siRNA, respectively; (2) glioma stem cells were transfected with mi R-15 inhibitor, mi R-15 mimics, and mi R- control cells, respectively. 48 h after transfection, the ability of cell migration and infection was detected by Transwell and the changes of matrix metalloproteinase 2 / 9 protein and activity in the supernatant of cell culture were detected by Elisa and gelatin zymogram. Glioma stem cells and non glioma stem cells were injected into nude mice subcutaneously for 30 days. Results and conclusion: (1) the expression of miR-15b in gliomas was significantly lower than that in normal brain tissues and was negatively correlated with the stage of glioma. Compared with non-glioma stem cells, The expression of mi R-15b in glioma stem cells was significantly down-regulated. (2) the migration and infection ability of the cells in the Mi R-15b mimic group was significantly decreased (P0.01). (P0.01) the cell migration and invasion ability of the MIR-15b inhibitor group was significantly increased (P0.01) Target Scan biological software. It was predicted that ABCG2 was a potential target gene of mi R-15b. (3) compared with the control group, the migration and infection ability of ABCG2 siRNA group was significantly decreased (P0.01); (4) Elisa. The up-regulation of miR-15b gene expression significantly inhibited the expression of matrix metalloproteinase 2 / 9 protein. (5) the results of Elisa and gelatinase assay showed that ABCG2si RNA transfection could significantly inhibit the activity of matrix metalloproteinase 2 / 9 protein. (6) the glioma stem cells had stronger tumorigenesis ability in nude mice, (7) the results showed that the glioma stem cells could regulate the migration and infection of glioma stem cells by targeting ABCG2. Upregulating the expression of mi-15 b can inhibit the migration and infection of glioma stem cells.
【作者單位】： 鄭州大學(xué)附屬醫(yī)院(南陽醫(yī)院)南陽中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;鄭州大學(xué)附屬醫(yī)院(南陽醫(yī)院)南陽中心醫(yī)院神經(jīng)外科;鄭州大學(xué)附屬醫(yī)院(南陽醫(yī)院)南陽中心醫(yī)院腫瘤內(nèi)科;鄭州大學(xué)附屬醫(yī)院(南陽醫(yī)院)南陽中心醫(yī)院病理科;解放軍沈陽軍區(qū)總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金資助項目(81401097)~~
【分類號】：R739.41

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本文編號：2064612